俞作仁
- 作品数：13 被引量：37H指数：3
- 供职机构：中国协和医科大学更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划国家攀登计划更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生农业科学更多>>
- 利用cDNA微阵列技术检测成熟精子中的mRNA
- ＜正＞ 精子发生是一个特殊的细胞分化过程,要经历减数分裂、细胞核浓缩、细胞变态等特异现象。精子发生后期,核组蛋白被鱼精蛋白替换,染色质紧密浓缩,基因转录活性受抑制。成熟精子的细胞核集中于头部,染色质仍处于包装状态。为了研...
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- 文献传递
- 长白猪精原细胞的分离和纯化被引量：20
- 2002年
- 目的 分离和纯化猪的精原细胞 ,从而对与人类具有高同源性的猪的精子发生进行研究。 方法 酶消化法制备 2月龄未成熟长白猪睾丸组织的单细胞悬液 ,以 2 %～ 4 %牛血清白蛋白 (BSA)连续梯度作为分离介质 ,采用重力沉降法并结合细胞贴壁培养的方法分离精原细胞。 结果 重力沉降法分离细胞后所获精原细胞纯度为 91% ,进一步经过贴壁培养纯化后 ,精原细胞纯度达到 94 2 %。 结论 该方法方便、快捷 ,分离效果好 ,能满足在分子水平研究精原细胞的需要。
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- 关键词：长白猪精原细胞纯化细胞分离生殖生物学
- 小鼠精子发生后期生精细胞的基因表达谱被引量：8
- 2002年
- 在精子发生后期由圆形精子细胞分化为成熟精子的过程称为精子形成（spermiogenesis）.为探索参与精子细胞变态的相关基因,利用cDNA微阵列技术研究了Balb/c 小鼠精母细胞、圆形精子细胞及长形精子细胞的1176个已知基因的表达谱.结果表明在这3种生精细胞中,共检测到208个基因的表达,其中大多数基因从精母细胞到圆形精子和长形精子表现为表达下调,但有7个基因在圆形精子细胞中表达上调,3个基因在长形精子细胞中表达上调.从以上差异表达的基因中选取了7个基因,利用半定量RT-PCR方法对微阵列的结果进行了验证.发现其中的6个基因在不同生精细胞中的差异表达与微阵列结果一致,1个基因未显示出差异表达.这些结果为研究精子形成相关基因的表达、调节以及功能提供了重要的线索.
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- 关键词：精子形成CDNA微阵列基因表达谱生殖生物学小鼠生精细胞
- 小鼠生精细胞阶段特异性表达基因的分析及其组织特异性表达特征
- ＜正＞ 为探索精子发生过程中一些特殊现象的分子基础,筛选精子发生相关基因,本研究从小鼠睾丸中分离出了7种不同发生阶段的生精细胞:原始A型精原细胞、B型精原细胞、细线期精母细胞、粗线期精母细胞、圆形精子细胞、延长中的长形精...
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- 文献传递
- 中心体蛋白Centrin家族在大鼠精子发生过程中的表达
- 2001年
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- 关键词：中心体蛋白CENTRIN精子发生
- 大鼠中心体蛋白家族基因的克隆及其在睾丸中的表达特征被引量：1
- 2002年
- centrin是进化上高度保守的中心体蛋白家族,已从多种生物中克隆到其同源基因,但基因文库中尚无大鼠centrin序列的报道.采用RT-PCR从大鼠睾丸组织中克隆到centrin-1,-2和-3 cDNA片段,对其衍生的氨基酸序列进行同源性比较,结果显示,人、小鼠、大鼠中相应的centrin蛋白同源性很高.采用半定量RT-PCR技术研究了它们在大鼠精子发生过程中的表达特征.结果表明,centrin-1的表达具有睾丸组织和生精细胞特异性,并呈现出发育阶段相关的规律,它仅在减数分裂开始后转录,其mRNA水平在圆形精子细胞中达到高峰.centrin-2和centrin-3在睾丸精原细胞中有高表达,进入减数分裂后其mRNA水平迅速降低,同时在一些体细胞中也有表达.推测centrin-1可能在减数分裂或精子细胞变态分化过程中发挥作用,而centrin-2,-3可能与有丝分裂有关.
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- 关键词：睾丸精子发生基因克隆基因表达
- 大鼠cenexin蛋白多克隆抗体的制备及其在精子发生过程中的表达的研究
- 2001年
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- 关键词：精子发生中心体蛋白多克隆抗体
- 原红细胞在体外EPO诱导分化进程中基因表达谱的研究
- ＜正＞ 红细胞在分化过程中,体积变小,核仁消失,核浓缩,血红蛋白积聚,最后排核。这其中涉及到许多基因表达的变化,但有关红细胞分化的调控机理尚不清楚。为了研究调节红细胞分化的分子机理,我们用Atlas Mouse 1.2 ...
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- 文献传递
- 中心体蛋白Centrin在不育症病人精子中的异常表达被引量：1
- 2002年
- 为研究中心体蛋白Centrin与男性不育的关系,从而深入理解Centrin在精子发生过程中的功能,用抗Centrin多克隆抗体对10例正常人及18例男性不育症病人的成熟精子进行了免疫荧光染色.结果发现,在正常男性成熟精子中有两个明显的点状荧光阳性信号,位于鞭毛的基体部,分别为近端中心粒和远端中心粒;而一些不育病人精子中Centrin蛋白定位异常,染色信号呈弥散分布,未显示正常大小的近端和远端中心粒.这表明中心体蛋白异常可能与某些男性不育相关,这一表型有可能用作某些男性不育及精子异常的新标志.
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- 关键词：CENTRIN男性不育症精子中心体蛋白
- 中心体蛋白Cenexin在大鼠精子发生过程中的表达特征被引量：3
- 2002年
- 中心体蛋白Cenexin是成熟中心粒的唯一标志分子。为阐明中心粒在大鼠精子发生过程中的成熟以及功能,我们首先通过RT-PCR技术从大鼠睾丸组织中扩增出了Cenexin cDNA片段,原核表达重组蛋白后,用其免疫小鼠制备了高滴度的抗Cenexin的多克隆抗体,然后利用免疫荧光染色、Western Blot和半定量RT-PCR方法,研究了大鼠精子发生过程中Cenexin蛋白和基因的表达特征。结果显示Cenexin mRNA水平在精原细胞和精母细胞中较高,随后表达水平下降,而蛋白质分子在精原细胞到精子细胞中都定位于细胞的一个中心粒上,表示有成熟中心粒的存在,在长形精子细胞中该蛋白位于鞭毛的基体部。附睾的绝大多数成熟精子中Cenexin免疫染色消失。中心体蛋白Cenexin在精子变态期的表达变化可能与精子鞭毛形成的起始有关。
- 孙晓冬俞作仁马静葛晔华李赛薛社普韩代书
- 关键词：中心体蛋白精子发生
