俞强
- 作品数：15 被引量：100H指数：6
- 供职机构：中国科学院上海药物研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金军队“十五”科研基金中山大学校科研和教改项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学更多>>
- 白藜芦醇诱导胃癌细胞脱落凋亡被引量：7
- 2004年
- 目的 研究白藜芦醇诱导胃癌细胞脱落凋亡的作用。方法 采用细胞形态学观察、Annxin-V和PI细胞染色和流式细胞仪检测,观察白藜芦醇(0.1、0.2、0.5 mmol/L)对脱落培养胃癌细胞B(3C823、SGC7901和HGC27的生长状态、细胞周期的影响及诱导脱落凋亡的作用。结果 倒置显微镜下发现脱落培养的胃癌细胞聚集成团生长,0.1 mmol/L白藜芦醇作用细胞后可抑制抗脱落凋亡的胃癌细胞聚集成团;流式细胞仪检测和Annxin-V和PI细胞染色表明0.5 mmol/L白藜芦醇可分别阻滞脱落培养的BG(2823、SGC7901和HGC27细胞于G0/G1、S、G2/M期,并可诱导这3株胃癌细胞发生脱落凋亡,其中自藜芦醇诱导HGC27细胞脱落凋亡比例达19.3％,远高于其他两株胃癌细胞。结论 白藜芦醇可诱导胃癌细胞发生脱落凋亡。
- 李莹药立波王立峰韩炯韩月恒刘新平林树新俞强
- 关键词：白藜芦醇胃癌细胞
- 人胃癌细胞株抗脱落凋亡特性的分析被引量：11
- 2003年
- 目的 :研究胃癌细胞HGC2 7,BGC82 3 ,MGC80 3 ,SGC790 1抗脱落凋亡的特性 .为研究肿瘤细胞抗脱落凋亡的机制奠定基础 .方法 :应用软琼脂集落形成实验 ,DNAladder检测 ,流式细胞术等技术观察胃癌细胞脱落培养后细胞生长状况的改变 .结果 :对照组细胞MDCK(狗的正常肾脏上皮细胞系 )在软琼脂中不生长 ,没有形成细胞集落 ;悬浮培养 15h后 ,可见有细胞凋亡特征性的DNAladder出现 ;流式细胞仪检测 ,悬浮培养 2 4 ,4 8h可见有凋亡峰出现 .而HGC2 7等 4种胃癌细胞系在软琼脂中均形成大小不等的细胞集落 ,脱落培养15h后 ,没有细胞凋亡特征性的DNAladder出现 ,流式细胞仪检测 ,与贴壁培养的对照组相比细胞周期没有显著性差异 ,也没有凋亡峰的出现 .结论 :MDCK细胞属于锚着依赖性细胞 ,可出现脱落凋亡 .胃癌细胞HGC2 7,BGC82 3 ,MGC80 3 ,SGC790
- 李莹韩炯王立峰林树新药立波俞强刘新平
- 关键词：胃肿瘤肿瘤细胞
- RNAi引起的Paxillin和p130Cas下调抑制胃癌细胞失巢性生长被引量：16
- 2005年
- P130Cas和paxillin分子是整合素家族下游重要的衔接分子.为了探索这两个分子在肿瘤细胞抗失巢凋亡中的作用,应用RNAi技术分别抑制抗失巢凋亡的胃癌细胞BGC82 3中paxillin和p130cas基因的表达,观察它们对细胞失巢性生长的影响.依据siRNA设计原则,分别设计针对p130cas和paxillin的两条序列;成功的构建了特异性封闭上述两分子的载体pWH1 p130cas和pWH1 paxillin .构建的载体瞬时转染贴壁培养和失巢培养的BGC82 3后,RT PCR和Western印迹检测发现paxillin和p130Cas分子在mRNA及蛋白水平的表达量均明显降低;倒置显微镜下观察发现,贴壁培养的胃癌细胞发生皱缩、脱落;失巢培养的细胞聚集成团的现象受到明显抑制,细胞团比对照组小,且较松散;MTT实验结果表明,失巢培养的BGC82 3pWH1 paxillin 组细胞存活率(32 19%±6 11% )和BGC82 3pWH1 p13 0cas组细胞存活率(2 8 5 2 %±5 0 2 % )与对照组相比显著下降(P <0 0 1vscontrol) ;FCM实验结果发现与失巢培养的对照组相比,BGC82 3pWH1 paxillin和BGC82 3pWH1 p13 0cas组细胞G1期抬高,并出现了凋亡峰.运用RNAi技术分别抑制了BGC82 3细胞中paxillin和p130Cas分子的表达,初步证明paxillin和p130Cas是细胞存活的重要信号分子,在肿瘤细胞抗失巢凋亡过程中具有重要的作用.
- 李莹药立波刘新平王立峰韩月恒林树新俞强
- 蛋白酪氨酸磷酸化水平与乳腺癌细胞株抗失巢凋亡特性的关系被引量：3
- 2004年
- 背景与目的:正常上皮或内皮细胞脱离与细胞外基质的联系时会发生失巢凋亡(anoikis),而大多数来源于上皮或内皮的肿瘤细胞则丧失了这种特性,多数相关研究表明肿瘤细胞的抗失巢凋失特性与细胞信号转导的异常密切相关。本研究初步探讨信号分子的蛋白酪氨酸磷酸化水平与肿瘤细胞抗失巢凋亡特性之间的关系。方法:用琼脂糖凝胶电泳检测DNA梯状带,用流式细胞术以及软琼脂集落形成实验等方法观察正常狗肾脏上皮细胞株MDCK(Madin-Darbycaninekidney)和3种乳腺癌细胞株MCF-7、Bcap-37以及MDA-MB-231的抗失巢凋亡特性。同时分析广谱蛋白酪氨酸激酶抑制剂染料木黄酮(genistein)对肿瘤细胞这种特性的抑制作用,并通过Westernblot检测3种乳腺癌细胞在悬浮培养与贴壁培养时总体蛋白酪氨酸磷酸化水平的差异。结果:3种乳腺癌细胞均表现出明显的抗失巢凋亡特性,进一步的研究证明这种特性可被染料木黄酮所抑制。Westernblot的结果显示与贴壁培养时相比,在悬浮培养的MDCK细胞中所有的蛋白酪氨酸的磷酸化水平均呈现下降趋势;而在肿瘤细胞中,尽管大多数蛋白质酪氨酸的磷酸化水平下降,但是可见有酪氨酸磷酸化水平异常增高的蛋白条带(幅度3.5～6.5倍)。结论:3种乳腺癌细胞均具有不同程度的抗失巢凋亡特性,而信号蛋白酪氨酸的异常?
- 韩炯刘新平药立波俞强
- 关键词：乳腺癌失巢凋亡癌细胞株
- 为了兴趣和有用而读博
- 2015年
- 为什么要读博士？对报考我的研究生以及所有来问我这个问题的学生,我都会让他们考虑这么几个问题：
第一,先问一问自己为什么要读博士,是否热爱科学,对科学有无兴趣。
如果不是对科学有兴趣,我劝他们不要来读博士。科学和艺术一样,是热爱和牺牲。如果不是为了兴趣,读博士是很受罪的。做研究是一种生活方式。
- 俞强
- 关键词：热爱科学分币占有欲
- EphB2受体N端结构域蛋白的纯化及其对胃癌细胞蛋白酪氨酸磷酸化的作用被引量：1
- 2001年
- EphB2受体在细胞生长、分化和信号转导过程中具有重要作用,为深入研究其在胃癌的信号转导中的作用及功能,检测了EphB2受体刺激胃癌细胞后的酪氨酸磷酸化的变化。利用Ni-NTA金属螯合亲和层析法将在E.coli中融合表达的重组蛋白EphB2受体的N端球状区进行纯化,并经Western印迹进行确证和ELISA方法检测该蛋白活性,得到纯度95％以上的融合蛋白,并有结合其天然配体的活性,EphB2受体诱导可以使胃癌细胞发生明显的蛋白质酪氨酸磷酸化的改变,即通过反向刺激其ephrinB配体引起了胃癌细胞信号转导通路中一些信号分子酪氨酸磷酸化的改变。
- 张晓光药立波俞强刘新平季少平韩炯苏成芝
- 关键词：胃癌细胞信号转导酪氨酸激酶N端结构域
- 虎仗提取物白藜芦醇诱导胃癌细胞HGC27凋亡被引量：8
- 2004年
- 目的 :观察虎仗提取物白藜芦醇对胃癌细胞HGC2 7细胞周期和增殖的影响及凋亡诱导作用 .方法 :采用MTT法和软琼脂集落形成实验观察白藜芦醇对细胞增殖的影响 ,Annxin V&PI染色及流式细胞仪检测观察白藜芦醇对细胞周期的影响及诱导凋亡的作用 .结果 :MTT实验发现白藜芦醇作用HGC2 7细胞 2 4h后 ,细胞存活率显著下降 (P <0 .0 1)并呈剂量依赖性 ,软琼脂集落形成实验发现HGC2 7细胞在0 .5mmol/L白藜芦醇作用下无细胞集落的形成 ,Annxin V&PI染色及流式细胞仪检测发现白藜芦醇可引起HGC2 7阻滞于G1期 ,并可诱导HGC2 7发生凋亡 (8.39% ) .结论 :白藜芦醇可抑制胃癌细胞HGC2 7增殖并可诱导细胞发生凋亡 .
- 李莹药立波王立峰韩炯韩月恒刘新平林树新俞强
- 关键词：白藜芦醇凋亡胃肿瘤肿瘤细胞
- 葡萄籽提取物原花青素诱导乳腺癌MCF-7细胞脱落凋亡被引量：26
- 2003年
- 目的 检测葡萄籽提取物原花青素诱导乳腺癌 MCF-7细胞脱落凋亡的作用。方法 采用 DNA ladder检测及软琼脂集落形成试验方法 ,观察乳腺癌 MCF-7细胞对脱落凋亡的敏感性以及原花青素诱导其脱落凋亡的作用。结果 MCF-7细胞具有抗脱落凋亡的特性 ,而 0 .1mmol/L 原花青素即可引起悬浮培养的 MCF-7细胞凋亡。表现为细胞染色质 DNA断裂及软琼脂集落形成受阻。结论 原花青素可诱导乳腺癌 MCF-7细胞脱落凋亡。
- 韩炯李莹刘新平汪云药立波俞强
- 关键词：葡萄籽原花青素肿瘤细胞
- 葡萄籽提取物原花青素诱导胃癌细胞脱落凋亡被引量：27
- 2004年
- 目的 研究葡萄籽提取物原花青素诱导胃癌细胞脱落凋亡的作用。方法 采用细胞形态学观察、Annxin V和PI细胞染色实验和流式细胞仪检测方法观察原花青素对悬浮培养的胃癌细胞生长状态和细胞周期的影响以及诱导脱落凋亡的作用。结果 0 1mmol·L-1原花青素可抑制抗脱落凋亡的胃癌细胞聚集成团 ,0 5mmol·L-1原花青素可阻滞悬浮培养的不同胃癌细胞于不同的细胞周期 ,并诱导胃癌细胞发生脱落凋亡。
- 李莹药立波韩炯王立峰韩月恒刘新平林树新俞强
- 关键词：原花青素胃癌细胞
- 胃癌细胞抗脱落凋亡的分子机制被引量：2
- 2004年
- 目的探求胃癌细胞抗脱落凋亡的信号转导机制。方法用soft agar实验观察信号分子抑制剂对胃癌细胞非锚定生长的影响,流式细胞仪检测信号分子抑制剂对脱落培养胃癌细胞周期的影响及凋亡诱导作用,Western印迹检测胃癌细胞脱落培养后相关信号分子表达水平及活性的变化。结果信号分子抑制剂genistein、AG17和AG825完全抑制了胃癌细胞集落的形成、阻滞细胞于细胞周期的不同时期,而且诱导细胞脱落凋亡的作用比较明显;而LY、PD和SB作用细胞后,所形成的细胞集落与对照组相比略小、数目略少,亦阻滞细胞于细胞周期的不同时期,但是诱导细胞脱落凋亡的比例较低。Western印迹检测发现,胃癌细胞脱落培养24 h后,细胞的蛋白酪氨酸磷酸化水平明显增加,ERK的表达水平无显著差异,但是ERK-p水平显著升高。结论蛋白酪氨酸激酶、HER2激酶、ERK激酶和PDGFR激酶途径是胃癌细胞抗脱落凋亡的重要信号通路和信号分子。PI-3K途径和p38MAPK分子与胃癌细胞锚定非依赖性增殖密切相关,与胃癌细胞的锚定非依赖性存活无关。
- 李莹药立波韩炯王立峰韩月恒刘新平林树新俞强
- 关键词：凋亡胃癌细胞信号转导
