刘丽丽
- 作品数：14 被引量：32H指数：2
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- 基于血清蛋白质组学筛选弓形虫病候选诊断抗原
- 目的 弓形虫病是世界范围的严重机会致病性寄生虫病,也是一种重要的人兽共患原虫病。全球人口大约有30%是携带者,在欧洲是最常见的寄生虫病。由于目前尚没有国产的批准上市弓形虫抗体检测试剂盒,检查和处理尚未规范,常见假阳性反应...
- 刘丽丽
- 关键词：蛋白质组学二维电泳ROP2弓形体病
- 文献传递
- 基于蛋白质组学筛选弓形虫病候选诊断抗原
- 目的：弓形虫病是世界范围的严重机会致病性寄生虫病,也是一种重要的人兽共患原虫病。全球人口大约有30％是携带者,在欧洲是最常见的寄生虫病。由于目前尚没有国产的批准上市弓形虫抗体检测试剂盒,检查和处理尚未规范,常见假阳性反应...
- 刘丽丽
- 关键词：弓形虫病血清蛋白质组学病理机制
- 文献传递
- 三种免疫调节剂增强弓形虫重组ROP2疫苗保护效应的研究被引量：2
- 2013年
- 目的观察弗氏佐剂(Freund’s Adjuvant,FA)、匹多莫德(Pidotimod,PT)和西咪替丁(Cimetidine,CIM)等3种免疫调节剂增强重组弓形虫棒状体蛋白2(rROP2)疫苗的免疫保护效应。方法将100只BALB/c小鼠随机分为PBS对照组、重组rROP2疫苗组、FA-rROP2疫苗组、PT-rROP2疫苗组和CIM-rROP2疫苗组等5组;FA、PT和CIM分别与rROP2抗原混合皮下注射免疫,检测小鼠细胞免疫和体液免疫指标,并观察弓形虫RH株攻击感染后的生存时间。结果 FA-rROP2组、CIM-rROP2组小鼠血清IFN-γ、特异性IgG、脾细胞增殖活性及外周血CD4+/CD8+比值均显著高于rROP2蛋白组(P<0.05);PT对外周血CD4+/CD8+比值无明显影响,但显著增加了IFN-γ的水平及脾细胞增殖活性。小鼠攻击试验表明,FA-rROP2组、PT-rROP2组以及CIM-rROP2组小鼠存活时间显著长于rROP2组和PBS对照组组;rROP2蛋白组各项指标均显著高于PBS组(P<0.05)。结论 FA、PT和CIM可增强rROP2蛋白抗原诱导的细胞免疫和体液免疫反应,都能延长攻击感染小鼠的生存时间,具有增强rROP2蛋白疫苗保护效应的功能。其中CIM的佐剂样免疫促进作用接近于FA,但副作用显著低于后者,具有临床实用的潜在价值。
- 陈兴智杨小迪杨雯陈勇刘丽丽沈继龙孙新
- 关键词：弓形虫匹多莫德西咪替丁免疫佐剂
- 日本血吸虫感染鼠巨噬细胞IL-13Rα2的表达被引量：1
- 2011年
- 目的检测IL-13的诱骗受体IL-13Rα2在血吸虫病巨噬细胞的表达,为从细胞水平探讨Th2型免疫性疾病分子病理机制奠定基础。方法建立日本血吸虫病鼠模型,采用免疫荧光标记法分别检测肝肉芽肿和原代巨噬细胞IL-13Rα2蛋白的表达情况。结果荧光显微镜下观察:肝肉芽肿内可见似"咖啡豆样"散在分布的IL-13Rα2免疫阳性信号,巨噬细胞膜内缘呈异常增强的环状荧光。结论巨噬细胞是IL-13Rα2阳性表达细胞,IL-13Rα2是血吸虫病重要的免疫病理调节分子。
- 王维郑胜生祁瑶闻惠琴刘丽丽沈继龙
- 关键词：血吸虫病肉芽肿巨噬细胞IL-13RΑ2CD68
- 概述弓形虫病及其研究进展
- 刘丽丽
- 日本血吸虫酪氨酸羟化酶基因的克隆、真核表达及鉴定
- 2010年
- 目的扩增日本血吸虫的酪氨酸羟化酶(Schistosoma japonicumTyrosine Hydroxylase,Sj TH)编码基因,构建pcDNA3.1(+)-SjTH真核表达载体,并检测其在COS-7细胞中的表达情况。方法以日本血吸虫成虫cDNA为模板,RACE PCR扩增Sj TH编码基因,并与pGEM-T连接进行亚克隆,双酶切后回收目的基因,并与真核表达载体pcDNA3.1(+)连接,PCR和双酶切初步鉴定后测序,纯化无内毒素重组质粒pcDNA3.1(+)-Sj TH,转染入COS-7细胞,G418筛选阳性克隆,RT-PCR和Western blot鉴定重组Sj TH蛋白的表达。结果 RACE PCR扩增出SjTH编码基因,大小约1392bp,经双酶切鉴定、测序及Blast分析鉴定重组真核质粒构建成功。脂质体介导无内毒重组真核质粒pcDNA3.1(+)-SjTH转染入COS-7细胞,G418筛选出阳性克隆,RT-PCR证实阳性单克隆细胞带有SjTH编码基因,Western blot鉴定单克隆细胞表达重组SjTH蛋白,大小约54kD。结论真核表达载体pcDNA3.1(+)-SjTH构建成功,G418筛选出阳性克隆,真核表达重组SjTH蛋白,为后续研究SjTH蛋白功能奠定基础。
- 石杜娟徐元宏胡元生周银娣刘丽丽钟政荣罗庆礼沈继龙
- 关键词：日本血吸虫酪氨酸羟化酶真核表达
- 基于蛋白质组学技术的弓形虫病诊断抗原的筛选
- 胡元生刘丽丽沈继龙温和刘婷婷石杜娟
- 关键词：弓形虫病蛋白质组学诊断抗原
- 刚地弓形虫缓殖子期特异抗原BSR4的重组表达与免疫特性的初步研究被引量：2
- 2012年
- 目的重组表达刚地弓形虫(Toxoplasma gondii)Prugniaud(PRU)株缓殖子期特异抗原(BSR4)基因,并检测其免疫特性。方法将已构建的重组表达质粒pET28a(+)-BSR4转化至大肠埃希菌(E.coli)BL21中,经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达并纯化。分别以慢性感染PRU株刚地弓形虫小鼠血清和健康小鼠血清为一抗,用蛋白质印迹(Western blottting)鉴定BSR4重组蛋白的免疫反应性。用3H-TdR掺入法检测慢性感染PRU株刚地弓形虫小鼠脾淋巴细胞对不同浓度BSR4重组蛋白的特异性增殖水平,计算刺激指数(SI)。以BSR4重组蛋白为抗原,用ELISA法检测急性(抗弓形虫IgG-IgM+)和慢性(抗弓形虫IgG+IgM-)弓形虫病患者血清,以及健康人血清,各20份,评判该蛋白的免疫反应性。结果重组质粒pET28a(+)-BSR4经IPTG诱导后表达重组蛋白BSR4,经变性、复性和纯化后获得相对分子质量(Mr)45 000的可溶性蛋白。Western blotting分析结果显示,该蛋白能被慢性弓形虫感染小鼠血清识别。脾淋巴细胞增殖试验表明,1、5和25μg/ml重组蛋白BSR4刺激感染弓形虫小鼠脾淋巴细胞的SI分别为1.13、0.88和1.17,显著高于未感染组(分别为0.46、0.24和0.49,均P<0.01)。ELISA检测结果显示,BSR4抗原能被慢性弓形虫病患者血清(IgG+IgM-)特异性识别(20/20),而不能被急性弓形虫病患者血清(IgG-IgM+)识别(0/20)。结论重组BSR4蛋白具有特异的免疫原性和免疫反应性。
- 陈兴智郭凯陈勇刘丽丽沈继龙焦玉萌方强孙新
- 关键词：刚地弓形虫免疫原性免疫反应性
- 社区获得性肺炎的病原体调查与药物敏感性分析被引量：18
- 2009年
- 目的研究社区获得性肺炎CAP病原体种类、药物敏感性等,为临床有效诊断、治疗提供依据。方法对154名社区获得性肺炎患者的标本进行细菌培养和血清学检测,并进行药物敏感性试验。用PCR检测社区获得性肺炎非典型病原体。结果在社区获得性肺炎患者中多重感染十分常见;在典型病原体感染中,以肺炎链球菌最为常见;在非典型病原体感染中,以肺炎支原体最为常见,非典型病原体感染在8～14岁阶段检出率最高;明确了各种病原体对常用抗菌药物的敏感性。结论明确了该地区社区获得性肺炎的病原谱,及其对药物敏感性的差异,为临床有效治疗提供了依据。
- 陈光福胡元生沈继龙石杜鹃刘丽丽李若梅汪学龙温和
- 关键词：肺炎社区获得性感染病原微生物敏感性试验
- 基于生物信息学对胃癌生存预后相关基因的分析被引量：1
- 2022年
- 目的:通过生物信息学方法对胃癌芯片数据集进行分析,获得与胃癌生存预后相关的基因。方法:从NCBI GEO数据库下载与胃癌相关的数据集GSE19826、GSE29998、GSE54129、GSE79973,利用R软件对数据集进行差异分析并整合,获取差异表达基因,利用DAVID、String、KM-Plot等在线分析网站对差异表达基因进行功能分析、蛋白质间相互作用以及与胃癌预后的关系,利用Cytoscape对分析结果进行可视化处理,得出候选关键基因13个:FNDC1、CTHRC、COL1A1、COL1A2、COL6A3、COL10A1、INHBA、SULF1、SFRP4、BGN、THBS2、THY1、TIMP1。结果:通过对四个芯片数据集进行差异分析及整合后获得上调基因21个,下调基因27个,这些差异表达基因大多富集于细胞外基质、内质网腔等,主要参与胶原蛋白分解、细胞黏附等生物学功能,涉及蛋白质的消化与吸收通路、细胞外基质通路、局部黏附通路以及细胞色素P450代谢通路;并且筛选出的关键基因均与胃癌的预后有关。结论:生物信息学方法可以有效、大规模地分析并获得与胃癌生存预后相关的关键基因,为癌症的诊断及治疗提供了新的方向。
- 刘丽丽朱芳来
- 关键词：胃癌生物信息学预后基因
