刘庆勇
- 作品数：19 被引量：36H指数：3
- 供职机构：山东大学更多>>
- 发文基金：山东省自然科学基金济南市科技发展计划项目山东省卫生厅科技基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 简化输尿管镜术治疗输尿管结石(附470例报告)被引量：7
- 2006年
- 目的探讨及总结简化输尿管镜术治疗输尿管结石的疗效及诊治经验。方法在门诊内镜手术室骶管阻滞麻醉或尿道表面麻醉下行输尿管镜术加气压弹道碎石术治疗输尿管结石470例。结果459例一次性碎石成功,成功率为97.7%。其中输尿管上段结石成功率为50%,中段98.0%,下段为100%。结论简化输尿管镜术治疗输尿管结石创伤小、安全可靠,不须住院,医疗费用较低,对中下段结石成功率较高,可作为其内镜治疗的首选方法。
- 郭峰孙光张龙洋刘庆勇王司军王朝阳程琳
- 关键词：输尿管镜气压弹道碎石输尿管结石
- G250抗原肽与HBcAg融合基因原核表达载体的构建及表达蛋白的免疫分析被引量：1
- 2014年
- 目的构建肾癌G250抗原肽与HBcAg重组基因的原核表达质粒pET28a(+)/C-G250肽-C,并通过大肠杆菌进行原核表达并纯化,分析表达融合蛋白的免疫原性及抗原性。方法 PCR扩增编码G250抗原中249～268氨基酸的基因片段,将G250肽插入去除主要免疫优势区的重组质粒pGEMEX/HBcAg中,获得重组质粒pGEMEX/C-G250肽-C,为更换酶切位点,以pGEMEX/C-G250肽-C为模板,PCR扩增C-G250肽-C基因片段,最终将目的基因亚克隆入原核表达质粒pET28a(+)中,IPTG诱导融合蛋白表达,利用Ni 2+-NTA亲和层析法纯化重组融合蛋白,SDSPAGE鉴定融合蛋白的表达,纯化后融合蛋白经腹腔注射免疫BALB/c小鼠,间接ELISA法检测小鼠血清中抗体的滴度。结果酶切及基因测序鉴定证实融合基因正确重组于表达质粒pET28a(+)中,原核表达并纯化后,该分离纯化融合蛋白纯度达95%以上,其相对分子质量约为22.35。BALB/c小鼠经4次免疫后,所有小鼠血清中均可检测到抗体,免疫第6周其血清中抗体滴度可达到1∶5.12×105,抗G250肽抗体滴度达到1∶6.4×104,抗HBcAg抗体滴度不超过1∶4×103。结论成功构建肾癌G250抗原肽与HBcAg重组基因原核表达质粒pET28a(+)/C-G250肽-C,在大肠杆菌中可高效表达,纯化后融合蛋白具有较强的免疫原性,能诱导小鼠产生高滴度和高特异性的抗体。
- 刘波孙泽强刘庆勇陈杰王司军杨广笑王全颖
- 关键词：G250HBCAG
- SAC重组腺相关病毒载体的构建及其对前列腺癌CAM移植瘤的抑制作用被引量：1
- 2012年
- 目的构建携带NT4-SAC-HA2-TAT融合基因的重组腺相关病毒载体,并感染前列腺癌鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)移植瘤,观察目的基因前列腺凋亡反应基因-4(par-4)选择性癌细胞凋亡结构域(SAC)的表达及其对CAM移植瘤的生长抑制作用。方法利用磷酸钙共沉淀法将包装质粒pAAV/Ad、腺病毒辅助质粒pFG140及重组穿梭质粒pSSCMV/NT4-SAC-HA2-TAT共转染293细胞,制备重组腺相关病毒(rAAV),斑点杂交法检测病毒滴度。取孵育9 d龄健康鸡胚,CAM接种前列腺癌细胞系PC-3细胞,建立前列腺癌的CAM移植瘤模型,接种3 d后挑选成瘤鸡胚随机分为3组:空白对照组(PBS),空病毒组(AAV)和重组病毒组(rAAV),观察瘤体生长情况,上述处理4 d后测量比较不同组移植瘤体积,并切片染色病理检查。免疫荧光法检测移植瘤中SAC融合肽的表达。结果酶切鉴定结果证实成功构建pSSCMV/NT4-SAC-HA2-TAT,斑点杂交法检测重组病毒滴度约为3.34×1010～3.34×1011cfu/mL。免疫荧光法证实SAC融合肽表达。移植瘤能在CAM上生长,可见瘤周围丰富毛细血管汇集,rAAV组瘤体显著缩小,病理HE染色可见瘤细胞局限及侵袭抑制。结论成功构建SAC重组腺相关病毒载体并感染前列腺癌CAM移植瘤,重组病毒表达分泌的SAC融合肽对前列腺癌CAM移植瘤具有诱导细胞凋亡、抑制肿瘤细胞侵袭性增殖等作用。
- 于张健张士宝刘庆勇阮喜云杨广笑王全颖
- 关键词：重组腺相关病毒鸡胚绒毛尿囊膜雄激素非依赖性前列腺癌移植瘤
- 人硫氧还蛋白cDNA的克隆和表达
- 2004年
- 贾堂宏刘庆勇阮喜云杨伯平宋国栋刘效恭纪宗正王全顾杨广笑
- 关键词：人硫氧还蛋白CDNA克隆
- 人硫氧还蛋白cDNA克隆和表达及其在肾缺血/再灌注损伤中的保护作用
- 目的1.克隆人硫氧还蛋白(Human thioredoxin,hTRX)cDNA并在大肠杆菌E.coli DH5a中表达。2.利用大鼠肾缺血/再灌注模型,来观察hTRX对大鼠肾的保护作用,以便为hTRX用于器官缺血/再灌...
- 刘庆勇阮喜云杨伯平李宗武王恒才张建军刘效恭纪宗正
- 关键词：人硫氧还蛋白RT-PCR
- 文献传递
- 人血浆及精浆中钙、镁、锌、铜对精液成分的影响被引量：10
- 2004年
- 为了观察人血浆及精浆中钙、镁、锌、铜对精液成分的影响 ,对正常生育力男子和生育力低下男子标准化血液及精液标本进行测定。应用终点比色法测定总钙、镁浓度 ,应用火焰原子吸收分光光度计法测定锌和铜的浓度。研究分析显示 ,生育力正常组与生育力低下组间血浆和精浆中钙、镁、锌、铜的浓度无差异。血浆锌浓度与精子计数、精子活动度和异形精子数呈弱相关性 ,精浆中锌和镁浓度与精子计数呈弱相关性 ,血浆铜浓度与精子活动度呈正相关 ;精浆中钙、镁、锌间呈强相关关系。尽管钙、镁、锌、铜在精子发生及生育功能中起重要作用 ,但精浆。
- 李宗武朱传金刘庆勇
- 关键词：精浆精子计数生育功能精子活动精子发生
- 肾衰竭锂中毒引起的微量元素反应被引量：2
- 2004年
- 多尿综合征主要是由于慢性服用锂盐造成的 ,其并发症也常在治疗躁狂 -抑郁性疾病的过程中发生。据知 ,肾脏在中毒性金属的全身性积蓄方面起着关键性作用。研究不仅测定血清和尿液中剂量依赖性的锂浓度 ,也对大鼠服用碳酸锂后肾中毒早期较敏感的生化指标进行了评估。研究表明 :当尿锂浓度为 ( 9.79± 1 .68) mmol/L时 ,发生必需的铜、蛋白质、N-乙酰 -β-葡糖氨酶活性和多尿变化 ,相应的血锂浓度为 ( 0 .3± 0 .0 6) mmol/L,这些值与大鼠服用 1 5 0mg/kg体重的总剂量相符合。总之 ,铜浓度、多尿和尿蛋白、N-乙酰 -β-葡糖氨酶活性的增高可以作为锂诱导肾中毒后肾脏的全身性代谢应答的早期指标。因此 。
- 刘庆勇阮喜云孙晓辉
- 关键词：服用多尿中毒肾衰竭全身性肾脏
- 腔内治疗急性梗阻性尿外渗13例报告
- 急性梗阻性自发性尿外渗(SUEAO)临床少见。自2002.8-2008.4,我院收治此病13例,腔内治疗全部获得成功,现报告如下。1临床资料1.1一般资料本组13例,男8例,女5例。年龄26-74岁,平均48.3岁。13...
- 李宗武刘庆勇张建军陈杰
- 文献传递
- 家族性特发性高尿钙病人患肾结石的危险性被引量：1
- 2003年
- 约 40 %的肾结石病人有特发性高尿钙 ,有时与肾结石家族史有关。对于这些家族中高尿钙的病人结石形成的频率和危险性仍知之甚少。因此 ,对 33个家族中 2 1 6例高尿钙患者进行了一项前瞻性研究。研究结果显示 ,高尿钙患者主诉肾结石的发生率为 46%( 61 /1 32 ) ,而正常尿钙者为 1 1 %( 7/63,P <0 .0 0 0 1 )。在多因素分析中 ,年龄、尿钙排出量、尿酸排出量是肾结石的独立危险因素。肾结石的危险性随着尿钙水平的增高而增高。结论认为 ,家族性高尿钙病人在尿钙和结石病之间存在一种显著的剂量相关关系。与结石形成有关的其他因素包括高尿酸排泄 (这说明可能有较高的饮食摄入 )和年龄 (这说明可能病人对高尿钙和高尿酸暴露的时间长短 )。
- 刘庆勇杨伯平王继英
- 关键词：肾结石危险性流行病学
- NT_4-SAC-HA_2-TAT融合基因表达载体的构建及鉴定被引量：1
- 2009年
- 目的构建NT4-SAC-HA2-TAT融合肽cDNA克隆,探讨前列腺凋亡反应基因-4(Par-4)核心区凋亡肽(SAC)作为目的基因对前列腺癌的治疗作用。方法应用互为引物模板法合成两端具有NaeI和KpnI酶识别位点的SACcDNA片段。将所得SAC和已有HA2-TAT片段克隆到具有相应酶切位点的pBV220-NT4质粒,得到pBV220-NT4-SAC-HA2-TAT重组质粒。PCR扩增NT4-SAC-HA2-TATcDNA片段,并将其克隆到pGEM-T easy中,转化细菌筛选阳性克隆,酶切鉴定,序列测定分析。结果经DNA测序、限制性内切酶酶切等证实,PCR获得了编码NaeI和KpnI酶切位点的SAC cDNA片段,并将NT4、SAC、HA2-TAT亚克隆于pBV220内。结论成功构建了NT4-SAC-HA2-TAT融合基因的原核表达载体pBV220-NT4-SAC-HA2-TAT。
- 张士宝刘庆勇阮喜云陈杰张建军李宗武杨广笑王全颖
- 关键词：融合肽基因疗法
