刘振盈
- 作品数：13 被引量：33H指数：5
- 供职机构：山东大学生命科学学院微生物技术国家重点实验室更多>>
- 发文基金：山东省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 多能硫杆菌RubisCO基因同源性分析被引量：3
- 1997年
- 以氧化亚铁硫杆菌1,5—二磷酸核酮糖羧化酶/加氧酶(RubisCO)基因为探针,与氧化硫硫杆菌和多能硫杆菌的染色体DNA杂交。结果表明,氧化硫硫杆菌的染色体DNA能够与氧化亚铁硫杆菌RubisCO基因探针杂交。而多能硫杆菌不能与其杂交,然而却能够与球形红杆菌RubisCO基因探针杂交,同源性高。由于RubisCO在进化上的高度保守性,因此认为它们在RubisCO进化关系上应属于不同的类群。
- 刘振盈颜望明徐海岩郑雷罗小平
- 关键词：硫杆菌属二磷酸核酮糖羧化酶加氧酶
- 多能硫杆菌RuhisCO墓因在大肠杆菌中表达产物分析被引量：2
- 1998年
- 通过对多能硫杆菌RubiSCO的基因表达分析表明该基因能够在pBR322的P1启动子、pUC19的lac启动子以及pKK223-3的tac启动子的启动下，在大肠杆菌中表达，RubisCO基因片段在pUC19和pKK223-3载体上的表达活性较高。进一步对RubisCO基因表达产物进行了非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳，检测到了RubisCO蛋白质带。
- 刘振盈张华
- 关键词：多能硫杆菌RUBISCO基因大肠杆菌
- 多能硫杆菌1,5-二磷酸核酮糖羧化酶/加氧酶的酶学特征及基因检测被引量：1
- 1997年
- 从固体平板的生长情况及RubisCO酶活性测定结果，表明多能硫杆菌是通过卡尔文循环固定的CO2，并具有该循环的关键酶──1，5－二磷酸核酮糖羧化酶／加氧酶．进一步将多能硫杆菌染色体DNA用各种限制性内切酸酶切，Southern转移到硝酸纤维素滤膜上，与光合细菌Rhodobactersphaeroides的RubisCO基因（rbcL－rbcS）探针杂交，显示出杂交带型，说明多能硫杆菌具有R．sphaeroides同源的羧化酶基因，并初步将该基因定位在3．0kb的PstⅠ片段内．
- 刘振盈颜望明郑雷
- 关键词：二磷酸核酮糖羧化酶加氧酶酶学
- 氧化亚铁硫杆菌Tf-55基因文库的构建被引量：5
- 1993年
- 以λEMBL3噬菌体 DNA作为载体,用BamHI/EcoRI双酶切后,与Sau3AI部分酶切的氧化亚铁硫杆菌Tf-55染色体10～23Kb DNA片段连接,体外包装成重组噬菌体,所得重组子为6×104Pfu（噬菌斑形成单位）达到了建库要求的理论值。并用酶切分析及分子杂交的方法对该库进行了验证。
- 刘振盈颜望明
- 关键词：氧化亚铁硫杆菌基因文库
- 氧化亚铁硫杆菌质粒pTf—52限制图谱和嵌合质粒pSDF—1的构建被引量：4
- 1990年
- 从一株氧化亚铁硫杆菌(Thiobacillus ferrooxidans)中分离到一个分子量为4.5×10~6Md 的质粒 pTf—52,用 Pst Ⅰ、BglⅡ、Kpn Ⅰ酶切此质粒,进行限制性酶切分析,作出了 pTf—52的限制图谱;并将 pTf—52插入到 pBR325的 Pst Ⅰ位点,体外重组,转化 E.coli HB101,构建成一个能够在 E.coli 中进行复制的嵌合质柱 pSDF—1(Tc^rCm^rAp^s),分子量为8.2×10~6Md。经限制性酶切分析,确证 pSDF—1是由 pBR325和 pTf—52重组成的,并确定了这两种质粒在 pSDF—1中的连接方向。
- 刘振盈颜望明
- 关键词：硫杆菌氧化亚铁脱硫
- 多能硫杆菌RubisCO基因鉴定以及在大肠杆菌中的表达被引量：5
- 1997年
- 多能硫杆菌(Thiobacillus versutus)是兼性化能自养细菌,在生理学和分类学上具有重要的地位,也是研究硫杆菌生理、生化、遗传学的理想材料。该菌通过卡尔文循环固定CO_2,其关键酶是1,5-二磷酸核酮糖羧化酶/加氧酶(简称RubisCO)。我们从多能硫杆菌中分离得到的RubisCO基因片段能够在大肠杆菌细胞中表达,说明自养细菌与异养细菌在基因表达方面是相似的。
- 刘振盈颜望明
- 关键词：多能硫杆菌RUBISCO基因基因表达
- 多能硫杆菌1,5-二磷酸核酮糖羧化酶/加氧酶基因的启动子克隆和表达被引量：2
- 1997年
- 将３．４ｋｂ的多能硫杆菌１，５－二磷酸核酮糖羧化酶／加氧酶基因（ｒｂｃＬ－ｒｂｃＳ）片段亚克隆到启动子探测质粒载体ｐＫＬ６的ＨｉｎｄⅢ位点，该基因片段能够启动ｐＫＬ６的ｌａｃ基因的表达，说明３．４ｋｂ的ｒｂｃＬ－ｒｂｃＳ基因带有自己的启动子．
- 刘振盈颜望明徐海岩郑雷罗小平
- 关键词：多能硫杆菌RUBISCO基因无性系启动子
- 多能硫杆菌基因文库的构建以及Rubis CO基因的筛选被引量：5
- 1997年
- 以pUC9质粒DNA作为载体，用PstⅠ酶切、碱性磷酸酯酶处理后，与PstⅠ部分酶切的多能硫杆菌染色体DNA3－10kbDNA片段连接，转化大肠杆菌JM83，在MacConkey培养基上筛选重组于，所得的重组子为6.5×103，达到建库要求的理论值。进一步用光合细菌Rhodobactersphaeroides类型Ⅱ磷酸核酮糖羧化酶／加氧酶基因（rbcL－rbcS）为探针，从该库中筛选到了含有多能硫杆菌的1，5－二磷酸核酮糖羧化酶／加氧酶（RubisCO）基因片段的重组子，从而进一步证明所构建多能硫杆菌基因文库的完整性和可靠性。
- 刘振盈颜望明徐海岩郑雷
- 关键词：多能硫杆菌基因文库RUBISCO基因
- 一种简单、快速制备与转化大肠杆菌受体细胞的方法
- 1998年
- 用TSB溶液取代常规的CaCl2溶液，制备大肠杆菌受体细胞。在菌体处于对数早期时离心收集细胞，用TSB缓冲液悬浮后，即可用于质粒DNA的转化。转化效率可达107～108转化子／μgDNA。
- 刘振盈张华
- 关键词：质粒DNA大肠杆菌
- 抗砷质粒pSDR941的构建及其在专性自养极端嗜酸性氧化硫硫杆菌中的表达被引量：7
- 1997年
- 将具有广泛寄主范围的ＩｎｃＱ质粒ｐＪＲＤ２１５的Ｋｍｒ基因片段删掉，置换进大肠杆菌抗砷质粒ｐＵＭ３上的抗砷基因及Ｐ１启动子片段，构建成新的抗砷质粒ｐＳＤＲ９４１，为１２．４ｋｂ，通过接合的方式将其转移到氧化硫硫杆菌中并获得了表达，与对照菌相比，含质粒ｐＳＤＲ９４１的氧化硫硫杆菌的抗砷水平从１５ｍｍｏｌ／Ｌ提高到３０ｍｍｏｌ／Ｌ．
- 邵群颜望明刘振盈姚敦义
- 关键词：抗砷基因质粒构建
