刘旺根
- 作品数：59 被引量：468H指数：15
- 供职机构：郑州大学基础医学院更多>>
- 发文基金：河南省科技攻关计划河南省教育厅自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生文化科学农业科学更多>>
- 甲型H1N1流感病毒双抗体夹心ELISA检测方法的初步建立被引量：3
- 2011年
- 建立甲型H1N1流感病毒双抗体夹心ELISA检测方法,通过优化IPTG浓度和诱导时间确定HA融合蛋白的最佳表达条件,并进行Western bloc和血凝试验鉴定。用纯化蛋白制备单克隆抗体,建立检测甲型H1N1流感病毒的双抗体夹心ELISA检测方法,对其交叉反应、符合率进行验证。结果表明,HA蛋白在BL21(DE3)中得到表达,主要以包涵体的形式存在,分子质量为64 ku,最佳诱导条件为IPTG终浓度0.2 mmol/L,诱导时间4 h。Western blot鉴定其与H1N1病毒有相同的抗原性,血凝试验表明无血凝活性。制备HA单抗并初步建立双抗体夹心ELISA检测方法,检测100份阳性PCR样本,符合率为96%。建立的夹心ELISA方法可用于H1N1亚型流感病毒的初步诊断。
- 王云龙周春峰孙新城李玉林陈冬焕李恒思昌静峰王国强董彩文刘旺根
- 关键词：血凝素甲型H1N1流感病毒原核表达双抗体夹心ELISA
- 巢式RT-PCR技术检测肺癌患者外周血及淋巴结中微量转移癌细胞被引量：1
- 2003年
- 目的 建立检测肺癌患者外周血及淋巴结中微转移癌细胞的敏感分子检测方法 ,并探讨其临床应用价值。方法 采用巢式反转录聚合酶链反应 (RT- PCR)技术特异引物扩增细胞角蛋白 19(CK19) m RNA,检测76例肺癌患者外周血及淋巴结中 CK19m RNA的表达情况。结果 76例肺癌患者中 39例外周血 CK19m RNA阳性 ,阳性率为 5 1.3% (39/ 76 ) ,2 7例肺良性病变中仅 1例阳性 ,阳性率 3.7% ,15例健康对照者均为阴性。全部肺癌患者 15 7枚淋巴结中 CK19m RNA阳性率 38.9% (6 1/ 15 7) ,常规病理方法检测淋巴结阳性率 14 .6 % (2 3/15 7) ,两者相比 ,P<0 .0 5 ;HE染色阴性的 134枚淋巴结中 ,经巢式 RT- PCR技术检测证实存在癌转移的阳性率为 2 8.3% (38/ 134) ,两者相比 ,P<0 .0 5。结论 巢式 RT- PCR技术是一种特异性和敏感性均较高的微量癌细胞转移检测方法 。
- 杨丽萍王红霞刘旺根王雪萍冯黎张舒林
- 关键词：肺癌外周血淋巴结细胞角蛋白19
- 医学形态学设计性实验课考核办法及评分标准的探索被引量：3
- 2007年
- 2005年河南省高等教育教学改革研究项目,课题编号:116;河南中医学院苗圃工程项目教学研究课题。
- 刘旺根蒋时红王琦王雪萍张桂兰杨少文
- 关键词：教学改革医学形态学设计性实验评分标准
- 黄芪建中汤对脾虚型慢性萎缩性胃炎大鼠免疫功能的影响被引量：10
- 2006年
- 目的:观察黄芪建中汤对脾虚型慢性萎缩性胃炎(CAG)大鼠免疫功能的影响。方法:将24只Wistar大鼠随机分为4组:①正常对照组;②CAG组:6只大鼠以2%的水杨酸钠灌胃8周造成胃粘膜损伤,后4周结合饥饱失常、劳倦过度使大鼠致虚;③维酶素组:6只已造模大鼠,使用维酶素治疗21 d;④黄芪建中汤组:6只已造模大鼠,使用黄芪建中汤治疗21 d。观察大鼠胸腺指数、脾指数、巨噬细胞吞噬功能、血清IgG和回肠黏液SIgA的含量。结果:与正常对照组比较,CAG组大鼠的上述指标显著降低,经黄芪建中汤和维酶素治疗21 d后,大鼠的上述指标显著改善。结论:黄芪建中汤可显著增强CAG大鼠的免疫功能。
- 王红伟蒋时红刘旺根
- 关键词：黄芪建中汤脾虚型慢性萎缩性胃炎免疫功能
- 黄芪建中汤干预脾虚型慢性萎缩性胃炎大鼠胃黏膜表皮生长因子含量、诱导型一氧化氮合成酶和表皮生长因子受体基因的表达被引量：21
- 2006年
- 目的:观察黄芪建中汤对造模脾虚型慢性萎缩性胃炎大鼠的治疗作用及机制,并且为临床应用提供试验依据。方法:实验于2003-12/2005-09在河南中医学院实验动物中心和郑州大学细胞分子生物学研究中心完成。雄性Wistar大鼠30只,体质量(170±10)g,饲养1周后按体质量编号完全随机法分为4组,即正常对照组6只:不做任何处理;慢性萎缩性胃炎组8只:以2%的水杨酸钠灌胃8周造成胃黏膜损伤,后4周结合饥饱失常、劳倦过度使大鼠致虚;维酶素组8只:造模后,给予7.9%维酶素2mL灌胃,1次/d,连续21d;黄芪建中汤组8只:造模后,给予2.5kg/L黄芪建中汤水箭剂2mL灌胃,1次/d,连续21d。末次给药后所有大鼠再逐只处死,平行胃小弯取小块胃窦部胃壁组织,手工制成胃黏膜组织芯片,用原位杂交的方法检测诱导型一氧化氮合成酶-mRNA和表皮生长因子受体-mRNA的表达量。从剩余胃黏膜组织中精确称取2g,置于玻璃匀浆器中研磨制成组织匀浆,按放免试剂盒说明测定其表皮生长因子含量。结果:纳入大鼠30只,造模过程中死亡1只,造模结束后抽样处死5只,24只进入结果分析。①原位杂交结果:诱导型一氧化氮合成酶-mRNA和表皮生长因子受体-mRNA基因表达的阳性部位呈现紫蓝色颗粒,前者以慢性萎缩性胃炎组显色最强,后者主要以胃小凹底部和胃腺中上部显色突出。②与正常对照组大鼠相比,慢性萎缩性胃炎组大鼠胃黏膜组织的上述指标均显著增高[(333.00±56.71),(453.67±68.25);(0.73±0.21)(3.14±0.77)μg/L;(124.36±26.13),(318.42±45.38),(P<0.01,P<0.05)],经黄芪建中汤治疗21d后,恢复至接近正常水平,其中对诱导型一氧化氮合成酶-mRNA和表皮生长因子受体-mRNA表达量的恢复作用显著优于维酶素。结论:黄芪建中汤对慢性萎缩性胃炎有良好的治疗作用,其机制与下调慢性萎缩性胃炎大鼠胃黏膜表皮生长因子含量、诱导型一氧化氮合成酶-
- 刘旺根蒋时红
- 关键词：黄芪建中汤胃炎表皮生长因子
- 3种治法方药诱导H_(22)荷瘤小鼠细胞凋亡的实验研究被引量：9
- 2009年
- 目的:观察比较活血化瘀方、清热祛湿方和养阴柔肝方3种不同治法的中药复方对H22肝癌移植瘤抑瘤作用,并初步探讨其机理。方法:采用皮下接种肝癌H22细胞的方法建立荷瘤小鼠模型,分别用上述3种中药复方水煎液ig给药11 d,观察各组荷瘤小鼠的肿瘤生长情况,采用缺口末端标记法测定肿瘤细胞凋亡指数,免疫组织化学方法测定凋亡蛋白Bcl-2,Bax的表达情况。结果:与模型对照组比较,3种复方均可抑制H22肝癌移植瘤生长,促进瘤体细胞凋亡,降低瘤体细胞Bcl-2/Bax比值(P<0.01);其中清热祛湿方与养阴柔肝方作用后Bcl-2/Bax分别为0.16±0.04,0.19±0.02,显著低于模型组(2.71±0.06),且与活血化瘀方1.24±0.10比较差异具有统计学意义(P<0.01),但前二者之间比较无统计学意义(P>0.05)。结论:活血化瘀、清热祛湿、养肝柔肝3种方法均可抑制H22肝癌移植瘤生长,其机制与通过调控凋亡相关蛋白Bcl-2,Bax的表达诱导肿瘤细胞凋亡有关。
- 蒋时红刘旺根谢慧珺王雪萍张文娴
- 关键词：不同治法细胞凋亡
- 三种治法方药对肝癌H_(22)荷瘤小鼠免疫功能影响的比较研究被引量：2
- 2010年
- 目的:观察比较活血化瘀方、清热祛湿方和养阴柔肝方三种不同治法中药复方对H22荷瘤小鼠免疫功能的影响。方法:采用皮下接种肝癌H22细胞的方法建立荷瘤小鼠模型,分别用上述三种中药复方水煎液灌胃处理11d,称量各组脾脏重量,计算脾指数;应用双抗体夹心ABC-ELISA法检测荷瘤小鼠血清IL-2、TNF-α含量的变化。结果:活血化瘀、清热祛湿、养阴柔肝方对H22小鼠脾指数无显著影响(P>0.05);与正常对照组相比,模型对照组血清IL-2的含量显著降低(P<0.05),各用药组与模型对照比较显著升高(P<0.05),三个用药组之间两两比较,也具有显著性差异(P<0.05);与正常对照组相比,各组血清TNF-α的含量均显著升高(P<0.05),与模型对照比较,各用药组显著降低(P<0.05)。结论:三种治法均可有效提高移植性H22荷瘤小鼠的IL-2水平,提高小鼠的免疫力,从而对机体起到保护作用,这可能是其有效抗肝癌的疗效机制之一;三种治法(尤其是清热祛湿组)具有抑制荷瘤鼠机体TNF-α水平异常升高的作用,使其维持在一定水平而发挥抗肿瘤、调节机体免疫功能等积极作用。
- 蒋时红谢慧珺刘旺根张文娴
- 关键词：不同治法H22小鼠脾指数
- 黄芪建中汤对慢性萎缩性胃炎大鼠胃黏膜屏障功能的影响被引量：25
- 2007年
- 目的:通过观察黄芪建中汤对慢性萎缩性胃炎(CAG)大鼠胃粘膜血流量和前列腺素E2的影响,探讨治疗CAG的机理,为其临床应用提供实验依据。方法:将24只Wistar大鼠随机分为4组,①正常(C)组:作为正常对照组;②CAG组:6只大鼠以2%的水杨酸钠灌胃8w造成胃粘膜损伤,后4w结合饥饱失常、疲劳过度使大鼠致虚;③维酶素(V)组:6只已造模大鼠,使用维酶素治疗21d;④黄芪建中汤(RA)组:6只已造模大鼠,使用黄芪建中汤治疗21d。治疗结束后,分别应用中性品红清除法和放射免疫法测定其胃粘膜血流量和前列腺素E2含量。结果:与正常大鼠相比,CAG组大鼠胃粘膜血流量和前列腺素E2含量显著降低(P<0.01);经黄芪建中汤治疗21d后,上述指标明显改善并明显优于V组。结论:黄芪建中汤可以显著改善CAG大鼠的胃粘膜血流量,提高其前列腺素E2含量,提示其具有加强CAG大鼠的胃粘膜屏障功能,从而达到对CAG治疗和逆转的效果。
- 刘旺根陈四清冯黎王琦吴景兰
- 关键词：胃炎
- 合论虚寒证证候与线粒体异常被引量：2
- 2007年
- 虚寒证的宏观症状主要有四肢怕冷、身体蜷卧、畏寒、喜温喜暖等对温度变化的主观感觉。我们完成一系列虚寒证实验后发现虚寒证涉及能量代谢相关的差异表达基因多达15个。因机体细胞产能的核心定位于线粒体,通过线粒体内膜上的产能链条——呼吸链来实现能量合成,若线粒体遭受氧化性损伤,则使细胞ATP合成量下降,细胞能量供给不足,由此推论线粒体异常可能会引发包括虚寒证在内的一系列与能量代谢异常相关的病证。
- 刘旺根杨丽萍王米渠王明臣
- 关键词：虚寒证线粒体能量代谢
- 黄芪建中汤对脾虚型慢性萎缩性胃炎大鼠消化系统的影响被引量：6
- 2007年
- 目的:探讨黄芪建中汤对慢性萎缩性胃炎(CAG)的疗效及其机制。方法:将24只Wistar大鼠随机分为正常对照组(C)、CAG组、维酶素(V)组、黄芪建中汤(HJD)组,观察大鼠胃黏膜、空肠黏膜、肝和胰外分泌部组织中的糖原含量、SDH、LDH、ANAE和ACP活性。结果:与正常大鼠相比,CAG组大鼠一般状况欠佳,体质量明显减轻;大鼠胃黏膜萎缩、变薄,胃黏膜炎症程度积分和胃黏膜糜烂程度积分明显升高,而胃黏膜厚度和腺管总长度明显降低;空肠和肝也呈现出不同程度的病理学改变;大鼠上述脏器的糖原含量、SDH、ANAE、ACP和LDH活性多数显著降低;经黄芪建中汤治疗21d后,上述指标明显改善并明显优于维酶素组。结论:脾虚型CAG状态下,机体存在多脏器代谢紊乱,黄芪建中汤对之有良好的复健作用,其疗效显著优于维酶素。
- 刘旺根蒋时红王琦王雪萍吴景兰
- 关键词：黄芪建中汤慢性萎缩性胃炎脾虚组织代谢
