刘银坤
- 作品数：26 被引量：143H指数：6
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- 发文基金：国家自然科学基金美国中华医学基金“九五”国家科技攻关计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 尿毒症患者血清中分子肽物质的提纯和生物活性研究被引量：2
- 1998年
- 分离、纯化尿毒症中分子物质并研究其生物活性。采用反相高效液相色谱技术将初提的中分子组分进一步纯化，并通过提纯猪肾Ｎａ＋、Ｋ＋－ＡＴＰａｓｅ及体外培养正常人外周血单个核细胞来研究其生物活性。结果表明，尿毒症中分子组分第２～３峰经两步反相高效液相色谱提纯出含肽的中分子化合物。该组分浓度在１．０ｇ／Ｌ以上对Ｎａ＋、Ｋ＋－ＡＴＰａｓｅ有抑制作用；浓度在０．２５ｇ／Ｌ以上对淋巴细胞的增殖有抑制作用。结论：尿毒症患者血清中含有高浓度的含肽中分子物质，其对Ｎａ＋。
- 孔维信徐元钊廖履坦刘银坤周康
- 关键词：尿毒症中分子物质高效液相色谱生物活性
- GM_3、GD_3作用下SMMC－7721肝癌细胞内磷脂酰肌醇（1，4，5）三被引量：1
- 1994年
- 外源性ＧＭ３（１０ｎｍｏｌ／ｍＬ）、ＧＤ３（１ｎｍｏｌ／ｍＬ）可使ＳＭＭＣ－７７２１人肝癌培养细胞内钙浓度呈快速的短暂升高，其到达峰值时间为４５秒，一次作用后，内钙水平于２－３ｍｉｎ内恢复至对照水平。在一定时间间隔中连续几次加入ＧＭ３或ＧＤ３后内钙水平的变化表明，ＧＭ３所引起的［Ｃａ２＋］ｉ的增加依赖于内质网钙贮的释放和细胞外钙的流入；而ＧＤ３增加［Ｃａ２＋］ｉ与此二系统无关。进一步研究表明，在细胞内钙达峰值时，１０ｎｍｏｌ／ｍＬＧＭ３可使ＩＰ３（１，４，５）浓度增加９．３倍，ｃＡＭＰ浓度增加８２％；１ｎｍｏｌ／ｍＬＧＤ３反使Ｉｐ３浓度增加１．２倍，提示ＧＭ３、ＧＤ３升高内钙的不同机制。
- 崔文刘银坤顾伯俊陈锐群
- 关键词：神经节苷脂磷脂酰肌醇三磷酸环腺苷酸
- 外源性GM_3／GD_3对人肝癌培养细胞原癌基因表达的研究
- 1995年
- 应用原位分子杂交技术及细胞图象分析证实了人肝癌细胞株ＳＭＭＣ７７２１细胞经１０μｇ／ｍｌ的ＧＭ_３／ＧＤ_３处理后，ＧＤ_３处理组细胞内Ｎ－ｒａｓ基因ｍＲＮＡ的阳性信号弥漫分布于整个细胞，而经ＧＭ_３处理组和对照组阳性信号集中于核膜。ＧＭ_３／ＧＤ_３处理组及对照组ｃ－ｆｏｓ基因ｍＲＮＡ的阳性信号均集中于核膜，但ＧＭ_３处理组信号强度最大。上述结果提示，ＧＤ_３可使某些肿瘤细胞向更加恶性的方向发展，而ＧＭ_３则可使某些肿瘤细胞向正常方向转化。
- 何伟刘银坤张夏英宋家
- 关键词：肝癌GM3GD3原癌基因
- 外源性神经节苷脂GM_3对人肝癌细胞生长的抑制作用被引量：2
- 1996年
- 为了解神经节苷脂（ＧＭ_３）是通过何种途径来调节细胞生长的。运用ＲＮＡ和蛋白质含量的测定及免疫组化法，结果发现：ＧＭ_３（１０ｍｇ／Ｌ）可明显抑制人肝癌细胞株ＳＭＭＣ－７７２１细胞增殖，抑制率达到２８．８１％；同时能降低细胞内平均ＲＮＡ和蛋白质含量，以ＧＭ_３处理细胞３ｄ时最为明显。ＧＭ_３能使ｃ－ｆｏｓ蛋白量在短时间内剧增，ＧＭ_３处理３０ｍｉｎ时增加了２．８５倍；而ｃ－ｍｙｃ蛋白量在短时间内明显减少，ＧＭ_３处理４５ｍｉｎ时抑制率达到８１．３１％。以上结果提示ＣＭ_３抑制细胞增殖可能与抑制ＲＮＡ、蛋白质合成及影响某些癌蛋白的表达有关。
- 康小伟张夏英陈锐群刘银坤
- 关键词：肝肿瘤神经节苷脂GM3细胞生长
- 神经节苷脂对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬活力的影响被引量：4
- 1993年
- 各类神经节苷脂对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬酵母菌作用的实验结果表明:GM_3、GM_1可激活巨噬细胞,其相对吞噬激活百分率(RP)分别为108和30,吞噬指数(R)为对照组的二倍;GD_2GD_(1a)、GD_(1b)和唾液酸可抑制巨噬细胞,其RP值分别为-48、-37、-31和-43,R值下降至对照组的50％。在2～30μg/ml范围内,GM_2、GD_3处理组未发现明显剂量效应。脑苷脂对巨噬细胞活力的影响无统计学意义。
- 刘银坤胡颂恩应明张夏英
- 关键词：神经节苷脂巨噬细胞
- 肝细胞增殖抑制因子抗血清的制备及其肝内原位表达
- 1996年
- 用９０％纯度的肝细胞增殖抑制因子（ＨＰＩ）制备了效价为１∶３２的兔抗鼠ＨＰＩ抗血清，并检测了ＨＰＩ在肝内的原位表达。结果表明，正常成年大鼠、兔和豚鼠肝细胞均表达ＨＰＩ，肝小叶中央带肝细胞表达尤强，非肝细胞无ＨＰＩ表达。胎鼠和新生鼠肝细胞及非肝细胞无ＨＰＩ表达。肾内各处结构和细胞也无ＨＰＩ表达。在肝大部切除后１～２ｄ，肝细胞无ＨＰＩ表达，４ｄ后呈弱阳性表达并逐渐增强，至１０ｄ时达正常成年鼠表达水平。在肝癌发生中，转化肝细胞和肝癌细胞无ＨＰＩ表达。研究结果提示。
- 孙亚平孙亚平成令忠刘银坤顾云娣严缘昌
- 关键词：肝细胞抗血清原位
- 用国产酶标板测定黄曲霉毒素的条件被引量：1
- 1991年
- 用ELISA法测定黄曲霉毒素B_1及其代谢产物M_1,适合于大规模的流行病现场调查。由于主要试剂和酶标板都靠进口,难于在国内推广。我们改进了测定方法,并使用国产试剂和器材的稳定性、可靠性、重复性与进口抗体和酶标板相同。 材料与方法 材料 黄曲霉毒素B_1(AFB_1),黄曲霉毒素M_1(AFM_1),辣根过氧化物酶(HRP),抗AFM_1抗血清和AFB_1-HRP(见方法),ABTS(2,2'-azino-diethy bentiazoline-6-
- 张夏英郭红卫刘银坤俞顺章
- 关键词：酶标板黄曲霉毒素ELISA
- 大鼠肝抑素纯化及其对再生肝细胞和肝癌细胞增殖的影响被引量：3
- 1997年
- 制备大鼠肝抑素（ＨＣ）纯品，研究它对再生肝细胞和肝癌细胞体外增殖的影响。用ＤＥＡＥ－Ｃｅｌｌｕｌｏｓｅ阴离子交换层析法提取ＨＣ纯品，用液法检测ＨＣ样品的生物活性。结果：提取的ＨＣ纯品的ＳＤＳ电泳纯度达８９．５％， Ｍｒ １３．５ × １０３；该 ＨＣ纯品对大鼠再生肝细胞和人肝癌细胞体外增殖有明显抑制作用，抑制率分别为６３．１％（０．２ ｍｇ／Ｌ）和７７．７％（０．３ ｍｇ／Ｌ），但对人胃癌细胞增殖无抑制效应。结论：结果提示提取的ＨＣ是抑制再生肝细胞和肝癌细胞增殖的特异性因子。
- 孙亚平成令忠刘银坤朱继红张夏英顾云娣
- 关键词：肝肿瘤肝细胞肝癌细胞纯化
- 尿毒症中分子量物质分离方法的改进被引量：2
- 1994年
- 尿毒症中分子量物质分离方法的改进孔维信，刘银坤，廖履坦尿毒症中分子量物质传统的分离方法是先将尿毒症患者的血清经过醋酸纤维超滤膜［截留分子量在４．９ｋｕ（５ｋＤ）］取得血清用滤液，然后在ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－１５柱上进行凝胶层析［１，２］。本文介绍一种改...
- 孔维信刘银坤廖履坦
- 关键词：尿毒症
- RU486对子宫蜕膜神经节苷脂组分的影响被引量：5
- 1993年
- 采用Ladisch微量分部、Sephadex G-25柱层析及高效薄层定量(HPTLC)分析,研究9例服RU486妇女与4例未服药早孕妇女子宫蜕膜神经节苷脂(Gg)图谱及定量分析。发现服药组的Gg总量(以脂结合唾液酸量表示)94.6±8.4μg/S蜕膜,为正常对照组的1.78倍(P<0.01);其中GM及GD含量明显高于对照组(P<0.05);单组分分析表明,服药组GM;含量高于对照组(分别为62.5±8.2与27.1±1.5μg/g蜕膜,P<0.05),GD_3明显降低(分别为4.4±0.76与8.0±1.7μg/g蜕膜,P<0.05),并出现GD_(1b)与GT_(1b)(对照组缺如)。Gg变化可能是RU486阻断孕酮生物效应,从而影响Gg代谢酶系的结果。并讨论了Gg与RU486抗早孕作用的可能联系。
- 周剑萍应明刘银坤张俊慧胡颂恩
- 关键词：米非司酮蜕膜神经节苷脂类
