刘雪妮
- 作品数：8 被引量：24H指数：3
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- 慢性HBV感染者外周血T-bet mRNA的表达及意义
- 2013年
- [目的]4g讨T-bet在慢性乙型肝炎发病过程中所起的作用。【方法】应用实时定量PCR检测37例CHB患者（CHB组）、12例慢性乙型肝炎病毒（HBV）携带者（HBV组）和20例健康对照者（对照组）外周血单个核细胞T—betmRNA的表达水平。【结果】CHB组T—betmRNA的表达水平明显高于HBV组和对照组（P均〈0．01）。HBV组T—betmRNA的表达水平明显低于对照组（P〈0．05）。CHB重度组T—betmR—NA的表达水平明显高于CHB轻度组（P〈0．01）。【结论】T—bet在慢性HBV感染的不同状态具有差异性表达，其可能在机体抗HBV的免疫应答中发挥了重要的作用。
- 张毅刘雪妮臧国庆汤正好江红奚敏余永胜
- 关键词：肝炎病毒乙型信使
- 胞质转导肽-HBcAg18-27-Tapasin体外诱导小鼠髓源性树突状细胞成熟及在T淋巴细胞增殖中的作用被引量：5
- 2012年
- 目的观察融合蛋白胞质转导肽（CTP）-HBcAg18-27-Tapasin诱导体外培养的小鼠髓源性树突状细胞（Dc）成熟和对T淋巴细胞增殖的作用。方法体外分离、培养近交系BALB／c小鼠髓源性DC，加入重组粒细胞一巨噬细胞集落刺激因子和IL-4培养5d，再加入脂多糖诱导成熟。10,ug／LCTP—HBcAg18-27-Tapasin、50,ag／LCTP—HBcAg18-27-Tapasin、10p．g／LCTP-HBcAg18-27及RPMI-1640培养液加入培养介质。流式细胞术测定DC表面分子表达，EusA法测定DC培养上清液中的IL-12p70的水平，细胞计数试剂盒检测T淋巴细胞增殖反应，流式细胞术检测增殖的T淋巴细胞内的细胞因子。多个样本均数间的比较采用单因素方差分析，组间两两比较采用LSD法。结果成功体外诱导小鼠髓源性DC；CTP—HBcAg18-27-Tapasin能明显上调DC表面分子CD80、CD86及主要组织相容性复合体-1分子的表达；509g／LCTP—HBcAg18-27-Tapasin组诱导DC分泌的IL-12p70水平为（61．12±10．25）pg／mL，依次高于10／xg／LCTP-HBcAg18-27-Tapasin组的（50．43±10．42）pg／mL、10〉g／LCTP-HBcAgl8m组的（40．17±8．54）pg／mL和空白组的（30．51±8．03）pg／mL（F=15．85，P=0．030和P=0．037）；CTP—HBcAg18-27-Tapasin诱导DC刺激T淋巴细胞增值能力明显高于对照组；流式细胞仪检测融合蛋白诱导的CTL水平50μg／LCTP-HBcAg18-27-Tapasin组为（2．05±0．41）％、10μg／LCTP-HBcAg18-27-Tapasin组为（1．06±0．10）％，高于10〉g／LCTP-HBcAg18-27组的（O．45±0．11）％和空白组的（O．09±0．02）％（F=60．22，P=0．003）。结论CTP-HBcAg18-27-Tapasin可以促进DC的分化、成熟，增强DC刺激T淋巴细胞增殖能力并能增加CTL的表达。
- 刘红红陈小华周丽芹刘雪妮余永胜臧国庆汤正好
- 关键词：T淋巴细胞
- 恩替卡韦+胸腺肽治疗乙型肝炎肝硬化的效果及不良反应观察被引量：2
- 2020年
- 目的研究恩替卡韦+胸腺肽治疗乙型肝炎肝硬化的效果及不良反应。方法选取2017年1月~2018年1月聊城市人民医院收治的乙型肝炎肝硬化患者作为本研究对象,根据随机抽签分组方式将100例乙型肝炎肝硬化患者进行分组,其中观察组实施恩替卡韦+胸腺肽治疗;对照组实施恩替卡韦治疗,将两组肝功能指标、肝纤维化四项数值、治疗效果和不良反应情况进行比较。结果观察组患者治疗后TB(20.03±1.52)μmol/L、ALT(22.12±1.32)IU/L、ALB(39.82±1.24)g/L与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。两组患者肝纤维化四项数值比较,前者更低(P<0.05)。观察组患者治疗总有效率(98.00%)高于对照组(P<0.05)。两组患者不良反应发生率比较,前者更低(P<0.05)。结论恩替卡韦+胸腺肽治疗乙型肝炎肝硬化的效果显著,且安全性高,值得研究和推广。
- 刘雪妮刘雪妮刘春华
- 关键词：恩替卡韦胸腺肽乙型肝炎肝硬化
- 丙型肝炎病毒感染患者血清中细胞因子含量的研究被引量：12
- 2016年
- 目的探讨丙型肝炎病毒感染患者血清中细胞因子IL-6、IL-12、IL-18的变化与丙型肝炎患者病程发展的相关性,以了解患者免疫状况,为疾病的诊治提供参考。方法选取2013年10月-2015年6月医院就诊的63例丙型肝炎病毒感染患者作为研究对象,按临床症状分为3组,无临床症状组20例,慢性丙型肝炎轻度组25例,慢性丙型肝炎中重度组18例,另选健康志愿者21人为正常对照组,采用酶联免疫吸附法ELISA测定血清中IL-6、IL-12及IL-18水平,全自动生化分析仪检测谷丙转氨酶(ALT)水平;采用SPSS16.0软件对数据进行统计分析。结果 IL-6、IL-12及IL-18水平轻度及中重度组显著高于对照组(P<0.05);无临床症状组相应细胞因子水平也有升高,但与对照组比较差异无统计学意义;各组慢性丙型肝炎患者IL-12/IL-6的值与对照组比较显著下降(P<0.05);但无临床症状组与对照组比较差异无统计学意义;慢性丙型肝炎患者的血清IL-12、IL-6、IL-18水平与ALT呈正相关,相关系数分别为0.534、0.583、0.549(P<0.05)。结论慢性丙型肝炎患者IL-12与IL-6比例失衡可能与丙型肝炎病毒感染的免疫发病机制相关,患者血清中IL-12、IL-6及IL-18细胞因子与肝脏炎症相关,水平越高肝脏炎症越严重。
- 李庆方高爱荣石庆凤崔燕平刘雪妮
- 关键词：丙型肝炎细胞因子白细胞介素
- CTP-HBcAg_(18-27)-Tapasin融合表达载体的构建及其表达和纯化被引量：2
- 2013年
- 目的构建CTP-HBcAg18-27-Tapasin融合基因表达质粒并分离、纯化融合蛋白。方法以质粒pCMV-SPORT6中Tapasin基因为模板,设计一对引物,上游引物带有融合基因CTP-HBcAg18-27序列,进行PCR反应;PCR产物回收纯化克隆到质粒pREST-B中,双酶切及测序鉴定;将鉴定正确的质粒转化大肠埃希菌BL21(DE3)诱导表达;镍柱亲和层析法纯化融合蛋白;Western blotting鉴定融合蛋白。结果由质粒pCMV-SPORT6 PCR扩增得到1 480 bp大小的条带,为CTP-HBcAg18-27-Tapasin融合序列;将其克隆到表达质粒pREST-B后经酶切、测序结果正确;表达质粒转化DE3后成功表达,经纯化得到52.3 KD的蛋白;Western blotting鉴定为CTP-HBcAg18-27-Tapasin融合蛋白。结论成功构建了CTP-HBcAg18-27-Tapasin融合表达质粒,并成功表达,为进一步研究此融合蛋白的功能提供了实验基础。
- 刘红红陈小华周丽芹刘雪妮余永胜臧国庆汤正好
- 关键词：CTPTAPASIN融合蛋白
- CTP-HBcAg18-27-Tapasin融合蛋白胞内转导功能的检测被引量：6
- 2012年
- 目的:观察融合蛋白CTP-HBcAg18-27-Tapasin在抗原提呈细胞内的转导功能。方法:体外分离培养近交系BALB/c小鼠髓源性DC,加入重组粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子和白细胞介素-4培养5d,再加入脂多糖诱导DC成熟。不同剂量的CTP-HBcAg18-27-Tapasin及RP-MI-1640培养液加入细胞培养介质中,激光共聚焦显微镜下观察免疫荧光在细胞内的分布及定位,并对荧光强度进行定量分析,进一步以West-ern blot观察不同组细胞中Tapasin表达的差异来检测CTP-HBcAg18-27-Tapasin的转导效率。结果:成功体外诱导培养并鉴定小鼠骨髓源性树突状细胞,免疫荧光法证实CTP-HBcAg18-27-Tapasin能够穿透树突状细胞膜进入细胞质,而不能进入细胞核,且荧光强度50μg/L CTP-HB-cAg18-27-Tapasin组依次高于10μg/L CTP-HBcAg18-27-Tapasin组和空白组,Western blot也证实CTP-HBcAg18-27-Tapasin能够穿透细胞膜进入树突状细胞,结果显示差异有统计学意义。结论:CTP-HBcAg18-27-Tapasin具有穿透树突状细胞膜定位于胞浆的能力。
- 刘红红陈小华周丽芹刘雪妮余永胜臧国庆汤正好
- 关键词：CTP
- 乙肝病毒核心蛋白的结构及其去功能化在乙肝抗病毒治疗中的应用
- 2010年
- 核心蛋白由乙型肝炎病毒(HBV)c基因编码,可包被前基因组mRNA形成核衣壳,在HBV复制中发挥着关键作用。通过如RNA干扰、抗核心蛋白抗体及构建核心蛋白突变体等方式实现其去功能化,可阻断核衣壳形成,达到抑制HBV复制的目的,可作为乙肝抗病毒治疗的一个新靶点。
- 刘雪妮潘庆春臧国庆余永胜
- 关键词：乙型肝炎病毒核心蛋白
- 阻断Notch1信号通路对慢性乙肝患者外周血T细胞免疫功能的影响被引量：2
- 2011年
- 目的:观察阻断Notch1信号对慢性乙型病毒性肝炎患者外周血单个核细胞(PBMC)T-bet表达,Th1和Th2型细胞因子表达以及细胞毒性T淋巴细胞(CTL)细胞毒活性的影响,探讨Notch1信号通路在调节慢性乙型病毒性肝炎患者外周血T细胞免疫功能的作用。方法:将慢性乙型病毒性肝炎患者PBMC随机分为实验组,阴性对照组和空白对照组,分别给予抗-Notch1,IgG2b和RPMI-1640培养液,采用实时荧光定量PCR(real-time Q-PCR)检测各组T-bet mRNA的表达情况,采用ELISA法检测Th1型细胞因子IFN-γ,IL-2和Th2型细胞因子IL-4,IL-10的分泌水平,采用乳酸脱氢酶释放法检测CTL对靶细胞HepG2.2.15细胞毒活性的变化。结果:用抗体阻断Notch1信号通路后,慢性乙型病毒性肝炎患者PBMC中T-bet mRNA表达增强,Th1型细胞因子IFN-γ和IL-2浓度增高,而Th2型细胞因子IL-4和IL-10浓度减少,且CTL细胞毒活性明显增强,与阴性对照组和空白对照组相比差异有统计学意义(P均<0.01)。结论:阻断Notch1信号通路可增强慢性乙肝患者PBMC中T-bet mRNA表达,使Th1型细胞因子分泌增加,Th2型细胞因子分泌减少,且使CTL细胞毒活性增强,说明阻断Notch1信号通路可增强慢性乙肝患者T细胞免疫反应,Notch1信号通路可能参与慢性乙型病毒性肝炎患者机体的免疫耐受,且可能与T-bet有关。
- 刘雪妮裴金仙李小亮臧国庆余永胜
- 关键词：慢性乙肝NOTCH1T细胞免疫T-BETCTL
