双杰
- 作品数：20 被引量：123H指数：4
- 供职机构：青海大学医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金教育部科学技术研究重点项目青海大学中青年科研基金更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学轻工技术与工程生物学更多>>
- 青海牧区57份自制牦牛乳制品中产EPS乳酸菌的分离鉴定及特性研究
- 2016年
- 目的从青海牧区牧民家庭自制牦牛乳制品(酸奶、曲拉)中分离产EPS乳酸菌,得到青海地区产EPS乳酸菌种群系统发育树,并鉴定高产EPS乳酸菌,为后期产EPS乳酸菌在乳品工业中的开发及利用提供理论基础。方法随机采集样本,乳酸菌采用Ca CO3的MRS平板法分离,以形态结合生化实验初筛,用分子生物学方法即16s r DNA序列测定、NCBI数据库BLAST比对,构建系统进化树,最终确定乳酸菌种属;用苯酚–硫酸法对乳酸菌进行多糖产量定量分析;用琼脂扩散法行抑菌试验。模拟体外胃肠道环境完成生长实验。结果从57份样品中分离出纯菌种86株,生化试验结合16s r DNA分析确定乳酸菌菌株52株,归属于5个菌属,分别是嗜热乳酸链球菌(33株)、粪肠球菌(6株)、侧孢短芽孢杆菌(4株)、干酪乳杆菌(5株)、嗜酸乳杆菌(4株);产EPS菌株为31株,以嗜热链球菌为主,EPS浓度为(16.09±5.39)mg/L,最高浓度达28.83 mg/L,产量最高的是嗜热链球菌,来自果洛州;抑菌试验中的52株乳酸菌菌株对四种致病菌均有抑制作用,排除强酸和H2O2干扰后,有部分菌株无抑菌圈,且所有菌株抑制病原菌生长的能力较弱。模拟胃肠道生存实验中,不同时间生存率有差异,χ2=247.87(秩和检验值=卡方值),P<0.01,存活率中位数(四分位数间距,%)为:模拟胃液3 h为92.70(91.75,93.54)、肠液3 h为88.54(87.99,89.18)、肠液6 h为84.36(83.21,86.28)、肠液12 h为76.02(74.42,77.21)、肠液24 h为65.43(64.32,66.94),存活率随时间的延长而降低。结论青海传统牦牛发酵乳中主要的优势乳酸菌为嗜热链球菌,其次为粪肠球菌和干酪乳杆菌;青海牧区传统牦牛发酵乳中乳酸菌产EPS产量相对较低;乳酸菌对四种肠道病原菌的抑制作用较弱,其中对大肠杆菌抑制作用最强;乳酸菌抵抗胃酸生长能力较强;在不同胃肠道生长环境(模拟)中乳酸菌存活率有差异;不同菌株间存活率不完全相同。
- 唐超群永胜朱徳锐刘静双杰
- 关键词：牦牛乳制品
- L.casei Zhang PG对鸡新城疫疫苗免疫协同作用的研究
- 2010年
- 目的了解干酪乳杆菌(L.casei Zhang)肽聚糖(peptidoglycan,PG)作为新城疫疫苗佐剂对免疫鸡血清中HI抗体、IgG及T淋巴细胞转化率的影响。方法把L.casei ZhangPG作为佐剂和弗氏完全佐剂分别添加到鸡新城疫疫苗里,制成L.casei Zhang PG佐剂鸡新城疫疫苗和弗氏完全佐剂鸡新城疫疫苗后,分别使小鸡致免;二免后每周采样,连续采6周后检测其血清中的HI抗体效价、IgG含量以及鸡脾脏中T淋巴细胞的转化率。结果 L.casei ZhangPG佐剂组鸡血清中HI抗体效价、IgG含量均显著提高,鸡脾脏中T淋巴细胞转化率也明显提高。结论 L.casei ZhangPG是鸡新城疫疫苗的良好佐剂。
- 双杰永胜宝进学张七斤
- 关键词：ZHANG肽聚糖鸡新城疫疫苗
- 几种乳酸菌S-层蛋白的普查以及slp基因的克隆与序列分析被引量：5
- 2010年
- 从内蒙古传统发酵乳制品中分离的几种乳酸菌,包括干酪乳杆菌、乳酸乳球菌、发酵乳杆菌、植物乳杆菌、嗜酸乳杆菌、双歧乳杆菌和嗜酸乳杆菌标准株(L.acidophilus ATCC4356)等为实验材料,应用SDS-PAGE方法和PCR方法分别进行S-层蛋白(S-layers pro-tein,SLP)的普查和slp基因的检测。结果表明:在各种乳酸菌中,经SDS-PAGE电泳方法检测,只有植物乳杆菌、嗜酸乳杆菌和其标准菌株的样品中出现膜外蛋白的可疑条带,大小为44～66ku之间,与文献报道的slp基因表达产物大小范围是一致;经PCR方法检测,只有嗜酸乳杆菌和其标准菌株L.acidophilus ATCC4356中扩增出slp基因可疑条带,其大小约为1 300 bp。并对嗜酸乳杆菌slp基因进行克隆、基因序列测序和分析。
- 双杰包秋华永胜王艳霞张和平格日勒图
- 关键词：嗜酸乳杆菌S-层蛋白克隆与序列分析
- 青海部分牧区牦牛传统乳制品中优势乳酸菌的鉴定被引量：1
- 2013年
- 目的本文旨在从青海牧区传统乳制品中分离牦牛乳优势乳酸菌,获得青海地区传统乳制品乳酸菌物种资源,构建青海地区乳酸菌种群系统发育树,鉴定其优势菌种属。方法从青海省玉树州、果洛州、黄南州等牧区采集传统乳制品,富聚培养、筛选分离乳酸菌,通过形态学特征和生理生化实验,并结合16S rRNA基因序列测定,进行系统进化分析。结果从12份样品中分离到乳酸菌纯菌种9株,发现来源于三种不同属菌株:嗜热乳酸链球菌属(5株)、粪肠球菌属(3株)、侧孢短芽孢杆菌属(1株)。结论玉树州、果洛州、黄南州等地区牦牛传统乳制品中嗜热乳酸链球菌(55.6%)为优势菌种,粪肠球菌属(33.3%)以及侧孢短芽孢杆菌属(11.1%)为次级菌种。
- 双杰永胜唐超群王萱张昱勤
- 关键词：牦牛乳制品乳酸菌
- 慢性高原红细胞增多症患者中性粒细胞吞噬能力及呼吸爆发功能被引量：4
- 2012年
- 目的通过与高原地区健康人相比较,探讨青海慢性高原红细胞增多症(HAPC)患者外周血多形核中性粒细胞(PMN)的吞噬能力及呼吸爆发功能。方法①用全自动血细胞分析仪检测HAPC患者红细胞数、血红蛋白及白细胞分类数等;②用流式细胞仪检测中性粒细胞对FITC标记细菌的吞噬能力;③用双乙酰基二氯荧光素(DCFH-DA)荧光探针法检测中性粒细胞呼吸爆发功能。结果①HAPC患者的红细胞数、血红蛋白及红细胞压积均高于健康组,但白细胞百分率、中性粒细胞百分率、淋巴细胞百分率及单核细胞百分率与健康组相比无明显差异;②机体在缺氧状态下,PMN吞噬能力及呼吸爆发能力降低,HAPC患者尤为明显。结论高原缺氧在一定程度上降低PMN的吞噬和杀伤能力。
- 永胜蒲小燕高翔双杰龙启福耿排力
- 关键词：高原红细胞增多症中性粒细胞
- 高原红细胞增多症患者中性粒细胞[Ca^(2+)]_i及NADPH氧化酶活性变化被引量：4
- 2013年
- 目的观察高原红细胞增多症(HAPC)患者外周血中性粒细胞[Ca2+]i及NADPH氧化酶活性变化。方法 HAPC患者30例(HAPC组),世代居住的健康者29例(健康组),分离两组外周血中性粒细胞,两组细胞各添加fMLP(终浓度为0、0.001、0.01、0.1、1、10μmol/L)及PMA(终浓度为0、10、20、30、40、50μmol/L)后,采用钙离子荧光探针(Fura-2/AM)法检测两组中性粒细胞内[Ca2+]i;ELISA法检测中性粒细胞NADPH氧化酶活性。结果 fMLP终浓度为0.1、1、10μmol/L时,健康组中性粒细胞[Ca2+]i分别为(223.6±34.6)、(260.7±30.0)、(316.6±53.8)nmol/L;HAPC组分别为(203.2±25.6)、(235.5±35.9)、(278.1±47.1)nmol/L,两组比较,P<0.05或<0.01。fMLP终浓度为0.1、1、10μmol/L时,健康组中性粒细胞NADPH氧化酶活性分别为(81.3±16.9)、(97.6±23.7)、(119.5±33.8)pmol/(10-6个细胞·30 min);HAPC组分别为(72.0±16.9)、(83.6±15.3)、(102.9±26.3)pmol/(10-6个细胞·30min),两组比较,P<0.05或<0.01。PMA终浓度为30、40、50μmol/L时,健康组中性粒细胞[Ca2+]i分别为(224.9±33.1)、(326.7±45.3)、(646.9±78.1)nmol/L;HAPC组分别为(205.5±26.3)、(293.9±52.6)、(567.9±103.1)nmol/L,两组比较,P<0.05或<0.01。PMA终浓度为30、40、50μmol/L时,健康组中性粒细胞NADPH氧化酶活性分别为(258.2±25.1)、(327.3±38.5)、(383.1±36.7)pmol/(10-6个细胞·30 min);HAPC组分别为(213.8±36.3)、(291.3±50.5)、(337.2±36.0)pmol/(10-6个细胞·30 min),两组比较,P<0.01。结论高原缺氧降低人外周血中性粒细胞NADPH活性及[Ca2+]i浓度升高幅度。
- 永胜双杰芦殿香赵海龙白海燕耿排力
- 关键词：高原红细胞增多症中性粒细胞细胞内钙离子
- 人疱疹病毒6型感染神经胶质瘤细胞中miR-301a表达的变化及生物学意义
- 2022年
- 人疱疹病毒6A型(Human Herpesvirus 6A,HHV6A)感染与神经胶质瘤的发病有关,但具体机制尚不清楚。HHV6A感染能够增加miR-301a的表达,而miR-301a表达在胶质瘤发病中起促进作用。为了观察HHV6A感染神经胶质瘤细胞中miR-301a表达的变化及生物学意义,本研究培养了神经胶质瘤细胞株U87、U251、U373,HHV6A感染后检测了miR-301a及RUNX3(Runt-Related Transcription Factor 3,RUNX3)的表达;U87细胞在感染HHV6A的同时分别转染阴性对照(Negative Control,NC)miR、miR301a抑制物、NC siRNA、RUNX3 siRNA,检测细胞增殖、迁移、侵袭;采用双荧光素酶报告基因实验验证miR-301a靶向RUNX3。结果显示,HHV6感染的U87、U251、U373细胞中miR-301a表达增加、RUNX3表达降低且HHV6感染的U87中miR-301a上调、RUNX3下调幅度最大。在U87细胞中,与对照组比较,HHV6组增殖、迁移、侵袭增强,RUNX3表达降低;与miR-NC+HHV6组比较,miR-301a敲低+HHV6组增殖、迁移、侵袭减弱,RUNX3表达增加;与HHV6+miR-301a敲低+si-NC组比较,HHV6+miR-301a敲低+si-RUNX3组增殖、迁移、侵袭增强,RUNX3表达降低;经双荧光素酶报告基因验证,miR-301a靶向RUNX3基因mRNA 3’UTR。结果表明,HHV6A感染神经胶质瘤细胞中miR-301a表达增加,进而通过靶向抑制RUNX3促进细胞增殖、迁移、侵袭。本研究初步探究了HHV6A感染促进神经胶质瘤细胞增殖、迁移、侵袭的作用及分子机制,进而为深入认识神经胶质瘤恶性生物学行为的调控机制及发病机制提供了实验依据,也为今后发现神经胶质瘤新的防治靶点提供思路。
- 王锋存刘军莉双杰
- 关键词：神经胶质瘤RUNX3
- L. casei Zhang PG对小鼠巨噬细胞吞噬功能的影响被引量：3
- 2010年
- 目的观察干酪乳杆菌(L.caseiZhang)肽聚糖(peptidoglycan,PG)对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬率、吞噬指数及巨噬细胞表面C3b受体的影响。方法应用酵母菌体外吞噬法观察巨噬细胞的吞噬功能;应用伊红染色法计数酵母细胞花环(Yc-花环)形成率;应用动物实验法进行小鼠毒性试验。结果 L.caseiZhang PG组腹腔巨噬细胞吞噬率和吞噬指数分别为67.69±7.08和2.11±0.39,明显高于对照组的31.22±4.18和0.78±0.14,差异有显著性。L.caseiZhang PG组巨噬细胞表面Yc-花环形成率为60.01±4.02,明显高于对照组的35.07±5.71,差异有显著性。毒性试验结果显示,连续观察一周L.caseiZhang PG组小鼠,小鼠均无耸毛、消瘦或食欲不振等中毒现象。结论 L.caseiZhang PG对巨噬细胞有一定的激活作用,能提高其吞噬功能,且安全可靠。
- 双杰永胜张七斤
- 关键词：肽聚糖巨噬细胞C3B受体
- fMLP、PMA、LTB_4对大鼠吞噬细胞能力的影响
- 2013年
- 目的观测fMLP、PMA、LTB4对大鼠吞噬细胞能力的影响。方法通过密度梯度离心法分离大鼠腹腔吞噬细胞,对分离后得到的巨噬细胞及中性粒细胞使用fMLP、PMA、LTB4诱导后,通过荧光显微镜观察其对荧光微球的吞噬能力,进行相关判断。结果静息状态下,大鼠腹腔巨噬细胞对荧光微球的吞噬能力显著大于中性粒细胞;经fMLP、PMA、LTB4诱导后,巨噬细胞及中性粒细胞对荧光微球的吞噬能力增强。结论大鼠腹腔中性粒细胞吞噬能力小于巨噬细胞;fMLP、PMA、LTB4可致大鼠中性粒细胞、巨噬细胞的的吞噬能力提高。
- 高翔永胜双杰
- 基于认证背景下《临床寄生虫学检验》教学改革与探索被引量：2
- 2018年
- 目的为改变传统的教学模式,课题组在2018年春季学期对本学院2015级临床检验本科班的《临床寄生虫学检验》课程从优化教材内容、完善教学方法、改善考核体系三方面进行改革和探索。方法本研究对医学院2015级临床检验本科班《临床寄生虫学检验》课程的讲授方法、课堂作业、实验课学习方法、期末考试试题的类型及学生最终成绩的评定方法进行了改革。结果通过与学生座谈认为这种学习方法可以让学生全面掌握整个课程内容,培养了学生的自学意识和思考问题能力,同时也锻炼了专业英语能力。结论这种混合式教学方法值得在其它专业寄生虫学教学中推广和应用。
- 曹得萍白海燕双杰唐超群李超群
- 关键词：教学改革
