司云凤
- 作品数：4 被引量：6H指数：2
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- SHP-2在三氧化二砷诱导HEK293T细胞凋亡中的作用被引量：3
- 2009年
- 目的探讨蛋白酪氨酸磷酸酶SHP-2在三氧化二砷(As2O3)诱导HEK293T细胞凋亡中的作用。方法将pIRES-GFP空载体、pIRES-GFP-SHP-2野生型和pIRES-GFP-SHP-2C459S突变体载体通过磷酸钙方法转染HEK293T细胞;在5μmol.L-1的As2O3孵育48 h后,用流式细胞术检测细胞凋亡率;Western blot方法检测Cyt-C、Caspase-3、p-ERK、ERK、p-JNK及JNK的表达变化。结果5μmol.L-1As2O3可诱导HEK293T细胞凋亡,SHP-2能抑制其作用;SHP-2C459S突变体组Cyt-C和Caspase-3表达均高于空载体组,SHP-2野生型组则低于空载体组;SHP-2野生型组p-ERK表达高于空载体组,SHP-2C459S突变体组则相反;p-JNK的表达,SHP-2C459S突变体组高于空载体组,而SHP-2野生型组低于空载体组。结论SHP-2可抑制As2O3诱导的HEK293T细胞凋亡,其机制可能与激活ERK和抑制JNK途径有关。
- 司云凤祝晓春孙东升齐琦王果元金成艳王丽娜徐长庆田野张力
- 关键词：三氧化二砷细胞凋亡JNK细胞信号转导
- SHP-2在三氧化二砷诱导的人胚肾293T细胞凋亡中的作用及机制
- 目的：探讨蛋白酪氨酸磷酸酶(SHP-2)在三氧化二砷(As2O3)诱导的HEK293T细胞的凋亡中的作用和机制。
方法：将pIRES-GFP空载体、pIRES-GFP-SHP-2野生型和pIRES-GFP-SHP-...
- 司云凤
- 关键词：蛋白酪氨酸磷酸酶三氧化二砷细胞凋亡流式细胞仪
- SHP-2^(C459/S)突变体在三氧化二砷诱导的HEK293T细胞凋亡中的作用
- 2009年
- 目的观察三氧化二砷(As2O3)对293T细胞凋亡和增殖的影响并探讨SHP-2在其中的作用。方法显性负性SHP-2突变体SHP-2C459/S与具有绿色荧光蛋白基因的载体pEGFP-C1共转染入HEK293T细胞,Ho-echst33258染色检测细胞凋亡,细胞计数及荧光分光光度法检测细胞增殖。结果SHP-2C459/S突变体能增强细胞凋亡和减轻增殖抑制。结论SHP-2可能参与到As2O3诱导的细胞凋亡和增殖抑制的信号转导通路中。
- 董红岩司云凤孙东升祝晓春齐琦王果元金成艳王丽娜李全凤赵雅君田野徐长庆张力
- 关键词：SHP-2三氧化二砷凋亡
- SHP-2通过ERK和JNK通路调节PC12细胞应对NGF的细胞生存和凋亡被引量：3
- 2009年
- 目的:探讨蛋白酪氨酸磷酸酶SHP-2在神经生长因子(NGF)作用下大鼠嗜铬细胞瘤PC12细胞生存及NGF撤除后细胞凋亡的过程中的作用及机制。方法:SHP-2抑制剂NSC87877作用于PC12细胞,MTT测定PC12细胞存活率;流式细胞仪检测细胞凋亡率。将pIRES-GFP空载体、pIRES-GFP-SHP-2野生型和pIRES-GFP-SHP-2C459S突变体通过脂质体方法转染PC12细胞;加入NGF作用1h和撤除NGF5h后分别用Westernblotting方法检测细胞外信号调节蛋白激酶(ERK)、磷酸化ERK(p-ERK)、c-Jun氨基末端激酶(JNK)及磷酸化JNK(p-JNK)表达变化。结果:MTT和流式细胞仪检测表明SHP-2可以促进PC12细胞生存,抑制细胞凋亡。Western blotting结果显示无SHP-2抑制剂组和转染pIRES-SHP-2野生型组p-ERK表达在加入NGF的过程中升高;撤除NGF后,各组p-ERK表达均降低,pIRES-GFP-SHP-2C459S突变体组和pIRES-GFP组p-ERK表达明显低于pIRES-GFP-SHP-2野生型组,NGF去除+SHP-2抑制剂组的表达水平明显低于NGF去除对照组;NGF去除+SHP-2抑制剂组p-JNK表达高于NGF去除对照组;pIRES-GFP-SHP-2C459S突变体组高于pIRES-GFP空载体组,pIRES-GFP-SHP-2野生型组低于pIRES-GFP空载体组。结论:SHP-2可能通过对ERK的正向激活,抑制JNK的激活,增强NGF作用下PC12细胞生存及抑制NGF撤除后所致细胞凋亡,从而在NGF的信号转导中起到一个中心环节的作用。
- 祝晓春张力司云凤孙东升齐琦王果元董红岩王秀丽李弘王丽娜赵雅君李全凤徐长庆田野
- 关键词：蛋白质酪氨酸磷酸酶PC12细胞ERK通路JNK通路
