吕玉兵
- 作品数：9 被引量：5H指数：2
- 供职机构：中国科学院植物研究所植物分子生理学重点实验室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 棕色固氮菌突变种（UW<,45>、DJ<,54>和DJ<,35>）的缺失FeMoco钼铁蛋白的纯化、特性鉴定及结晶研究
- 一.棕色固氮菌突变种UW<,45>、缺失nifH(DJ<,54>)和缺失nifH(DJ<,35>)突变种的钼铁蛋白的纯化、特性鉴定及结晶研究：棕色固氮菌突种UW<,45>的菌体破碎后,所得粗提物经两次DEAE52柱层析后...
- 吕玉兵
- 关键词：棕色固氮菌突变种固氮酶
- 文献传递
- 固氮酶铬铁蛋白的晶体生长(英文)被引量：1
- 2002年
- 在合适的结晶条件下 ,从含Cr无氨培养基中生长的固氮菌 (AzotobactervinelandiiLipmann)突变种UW3 中纯化出的CrFe蛋白可从溶液中析出深棕色斜四棱柱晶体 ,晶体最大的两条对角线长度分别可达 0 .2 5mm和 0 .12mm。PEG 80 0 0、MgCl2 、NaCl、Tris和Hepes缓冲液的浓度及结晶方法等对该蛋白的出晶率、晶核数目、晶体大小和质量都有明显影响。CrFe蛋白结晶所需的上述化合物的最适浓度与在Mn中生长的固氮菌突变种UW3 的MnFe蛋白和缺失nifZ固氮菌突变种的ΔnifZMoFe蛋白结晶所需的最适浓度有所不同。结果表明 。
- 张华峰王耀萍吕玉兵赵颖代小虎董志刚黄巨富
- 关键词：固氮菌突变种晶体生长
- 含锰固氮酶组分Ⅰ蛋白的纯化和特性(英文)被引量：2
- 2001年
- 棕色固氮菌 (AzotobactervinelandiiLipmann)突变种UW3 能在无Mo而含Mn的无氨培养基中固氮生长。低浓度的Mn对UW3 突变种生长有促进作用。从在Mn中生长的UW3 菌体中分离得到的部分纯固氮酶组分Ⅰ蛋白含有Mn和Fe原子 (Fe/Mo/Mn为 10 .41∶0 .19∶1.0 0 )并具有OPMoFe蛋白一半的还原乙炔和质子的活性。这种蛋白的吸收光谱和圆二色谱与MoFe蛋白存在明显的差异 ,含Mn蛋白的亚基分子量都与MoFe蛋白的α亚基相近。初步结果表明 ,这种含Mn蛋白可能是一种固氮酶组分Ⅰ蛋白。
- 黄巨富汪道涌董志刚汪志平张华峰吕玉兵许祥明赵颖
- 关键词：蛋白纯化
- 棕色固氮菌缺失nifE的突变种固氮酶钼铁蛋白的结晶(英文)被引量：2
- 2003年
- 从限氨固氮培养基中培养棕色固氮菌 (AzotobactervinelandiiLipmann)缺失nifE的突变种DJ35中 ,分离纯化得到缺失FeMoco的钼铁蛋白 (ΔnifEAv1 )。在一定条件下结晶得到深棕色短斜四棱柱晶体。结晶溶液中各组分的浓度以及结晶方法等对其晶核数目、晶体大小和质量有明显影响。目前用气相扩散的悬滴法所得的最大晶体的二维边长分别为 0 .1 2mm和 0 .1 3mm。
- 赵颖赵剑峰吕玉兵汪志平王耀萍黄巨富
- 关键词：棕色固氮菌
- 固氮酶锰铁蛋白的晶体生长(英文)被引量：1
- 2001年
- 从以Mn代钼的固氮培养基中固氮生长的固氮菌 (AzotobactervinelandiiLipmann)突变种UW3 中分离纯化的MnFe蛋白 ,在一定的结晶条件下 ,可从溶液中析出深棕色的短斜四棱柱晶体。Tris和Hepes缓冲液、NaCl、MgCl2 和PEG的浓度及结晶方法等 ,对该蛋白的出晶率、晶核数目、晶体大小和质量均有明显的影响 ,PEG浓度的改变还可使该蛋白晶体的晶型发生变化。MnFe蛋白结晶所需的上述化合物的最适浓度与缺失nifZ固氮菌突变种ΔnifZMoFe蛋白结晶所需的最适浓度有所不同。SDS凝胶电泳表明 ,晶体溶解后的蛋白与结晶前的MnFe蛋白基本相同。结果表明 。
- 黄巨富董志刚汪道涌吕玉兵张华峰王耀萍韩毅代小虎
- 关键词：晶体生长
- 缺失nifZ的棕色固氮菌突变种钼铁蛋白的晶体生长研究(英文)被引量：2
- 2000年
- 在一定的结晶条件下 ,缺失nifZ的棕色固氮菌 (AzotobactervinelandiiLipmann)突变种钼铁蛋白将从溶液中结晶出深棕色的短斜四棱柱晶体。PEG 80 0 0、MgCl2 、NaCl、Tris的浓度及缓冲液的pH对该蛋白的结晶及晶体生长影响的系统研究表明 ,浓度和pH较低时 ,不出晶体 ;随着浓度逐渐提高及pH高于 8.0 ,在一周内出现大量小晶体 ;再提高浓度 ,便延长结晶时间但出质好、体积大而数少的晶体 ;然后晶体随浓度的提高而又变小、变多、甚至晶质变差 ,直至不再出晶体。影响晶体生长的各因子的最适浓度随其他条件的改变而有所不同。当缓冲液的pH为 8.2而PEG 80 0 0、MgCl2 、NaCl、Tris和蛋白质的浓度分别为 1.86 %、30 0mmol/L、40 0mmol/L、5 3mmol/L和 4.6 4g/L ,在一滴悬滴液中只有一颗较大的优质晶体 (最大两边线均为 0 .16mm)。
- 黄巨富王耀萍董志刚黄孝明汪道涌吕玉兵汪志平
- 关键词：棕色固氮菌晶体生长
- 缺失nifH的棕色固氮菌突变种固氮酶钼铁蛋白的结晶被引量：1
- 2004年
- 从限氨固氮培养基中培养的缺失nifH的棕色固氮菌(Azotobacter vinelandii Lipmann)突变种DJ54中，分离纯化出部分纯的缺失FeMoco的钼铁蛋白(△nifH Avl)。用相同纯化方法分别从DJ35和UW45突变种中纯化的△nifE Avl和NifB^-Avl的纯度明显高于△nifH Avl的纯度。在合适的结晶条件下，可得到这三种蛋白的深棕色短斜四棱柱晶体。△nifH Avl与NifB^-Avl一样，晶体形成所需的时间比△nifE Avl的长。而它结晶所需的沉淀剂和缓冲液最适浓度则与△nifE Avl的相同。SDS—PAGE鉴定表明，结晶的△nifH Avl与OP Avl的组成相似。这表明，在△nifH Avl溶液中形成的晶体可能就是该蛋白质的晶体。
- 边少敏赵剑峰吕玉兵赵颖周会娜王耀萍黄巨富
- 关键词：棕色固氮菌突变种固氮酶钼铁蛋白NIFH沉淀剂
- 两种新型固氮酶组分Ⅰ蛋白的晶体生长研究
- ＜正＞ 由固氮酶起关键作用的生物固氮是自然界最重要的活动之一。经典固氮酶由组分Ⅰ蛋白（MoFe蛋白）和组分Ⅱ蛋白（Fe蛋白）组成。长久以来,人们一直将Mo当作固氮酶必需的组成元素,但无Mo含V和只含铁的第二和第三固氮酶体...
- 赵颖赵剑峰吕玉兵代小虎仓怀兴王耀萍黄巨富
- 文献传递
- 含铬固氮酶组分Ⅰ蛋白的纯化和特性(英文)被引量：1
- 2002年
- 在含Mo固氮培养基中不能生长而在无Mo条件下可固氮生长的固氮菌 (AzotobactervinelandiiLipmann)突变种UW3 ,能在无Mo而含Cr的无氮培养基中生长。从菌体中分离得到的部分纯固氮酶组分Ⅰ蛋白含有Cr和Fe原子 (Fe/Mo/Cr为 11.6 0∶0 .41∶1.0 0 ) ,并能表达相当于棕色固氮菌野生型固氮菌MoFe蛋白对乙炔和质子还原的 70 %的活性。与从Mn中生长的UW3 菌体中所提取纯化的MnFe蛋白不同 ,这种含铬蛋白与MoFe蛋白 (α2 β2 )一样 ,是由两种亚基组成的四聚体。初步结果表明 ,这种含Cr蛋白可能是一种固氮酶组分Ⅰ蛋白。
- 黄巨富董志刚张华峰吕玉兵赵颖汪志平
- 关键词：固氮酶固氮菌
