吴传芬
- 作品数：9 被引量：19H指数：3
- 供职机构：中国科学院昆明动物研究所更多>>
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- 砂鼠利什曼原虫(Leishmania gerbilli)的亚显微结构被引量：2
- 1988年
- 砂鼠利什曼原虫(Leishmania gerbilli)存在于我国西北甘肃某地的砂土鼠或大砂鼠(Rhombomys opimus)体内,是中国特有的种类,王捷等60年代分离培养成功。对L.gerbilli的前鞭毛体的亚显微结构的观察表明:1.质膜下微管间距约为50nm,比别的利什曼原虫的宽;2.鞭毛基部极少观察到基板(basal plate);3.线粒体发达,从动基体所在部位伸向虫体各个部位,内有复杂的结构;4.在通常情况下,L.gerbilli的动基体呈棒状,但当细胞膨胀后则无论在光镜或电镜下动基体均呈扁环结构;5.虫体后部有发达的复片层结构。这一结构由一系列的膜卷绕成,其意义不明。
- 吴传芬李靖炎
- 关键词：利什曼原虫亚显微结构
- 前环藻细胞核骨架及其真实性的研究
- 1993年
- 采用细胞成份的选择性抽提方法,结合常规电镜和DGD(Diethylene Glycol Distearate)包埋一去包埋电镜技术制备典型涡鞭毛虫前环藻的细胞核骨架,结果表明其核内存在一个蛋白性质的纤维网状结构,并且通过核纤层与中等纤维发生联系形成一个贯穿核质的骨架体系。即使在未经任何抽提处理的情况下,前环藻细胞的染色体之间仍然存在骨架结构。根据典型涡鞭毛虫的特点及细胞核骨架的定义,可以肯定其中包含了核骨架部分,这一实验结果排除了核骨架是因抽提处理造成结构假象的可能性;另外,在制备核骨架时,于选择性抽提液CSK液中加入1％巯基乙醇抑制二硫键的形成,结果同样观察到核内有一个致密的纤维网络结构,并且与选择性抽提制备的核骨架相似,这也说明核骨架结构并不是由于蛋白质分子间二硫键的交联而造成的结构假象。以上结果都证明核骨架是一个真实存在的结构。
- 方志林吴传芬李靖炎
- 关键词：细胞核骨架
- 特殊涡鞭毛虫——尖尾藻的核骨架被引量：8
- 1992年
- 采用分级抽提,DGD包埋-去包埋剂电镜技术在特殊涡鞭毛虫——尖尾藻的细胞核内显示出了一个纤维网络结构。此网络结构不溶于CSK液和可抽去微管与微丝的溶液,不被DNase所酶解和热三氯醋酸所抽提,因而是一个非DNA性质的纤维蛋白网络结构。它的一系列形态结构特征——整个呈网络形态,纤维的粗细为2.8—24nm,与细胞质内的中间纤维有广泛的连接,含有少量对维持其结构完整性所必需的RNA成分等,都十分相似于典型真核细胞的核骨架结构,但所显示的核纤层为一层不均匀、不连续的结构,这有别于典型真核细胞的核纤层。 本工作首次证实了特殊涡鞭毛虫——尖尾藻已进化产生了核骨架结构,且与典型真核细胞的核骨架在形态结构上已很接近。
- 文建凡吴传芬李靖炎
- 关键词：涡鞭毛虫核骨架
- 涡鞭毛虫（甲藻）着丝粒／动粒蛋白的检查被引量：4
- 1996年
- 利用ＡＣＡ血清、抗人着丝粒蛋白Ｂ的单抗和多抗、抗ＣＨＯ细胞动粒蛋白的单抗，对典型涡鞭毛虫隐沟虫（隐甲藻）（Ｃｒｙｐｔｈｅｃｏｄｉｎｉｕｍｃｏｈｎｉｉ）和特殊涡鞭毛虫尖尾虫（尖尾藻）（Ｏｘｙｒｒｈｉｓｍａｒｉｎａ）的着丝粒／动粒蛋白进行了检查。用ＡＣＡ血清作的荧光观察表明，隐沟虫的这些蛋白虽结合在核骨架上，但在间期时并不形成点状的前着丝粒。免疫印迹检查表明两种涡鞭毛虫的着丝粒蛋白Ｂ彼此一致，而且与四膜虫和眼虫的也高度一致。但用ＡＣＡ血清作免疫印迹检查时，尖尾虫的蛋白虽与四膜虫和眼虫的相近，与隐沟虫的却有极大的差异。以抗动粒蛋白的单抗作此种检查时，尖尾虫与眼虫的反应带相同，而隐沟虫则与源真核生物（Ａｒｃｈｅｚｏａ）贾第虫（Ｇｉａｒｄｉａｌａｍｂｌｉａ）的相同；而且隐沟虫和贾第虫都与几种原细菌有两条相同的反应带，其中５０ｋＤ的一条是尖尾虫和眼虫都没有的。上述发现不仅从一个新的方面支持了认为应把尖尾虫从典型涡鞭毛虫分出来独立为一个门的主张（李靖炎，１９９０），而且指出典型涡鞭毛虫在后真核生物（Ｍｅｔａｋａｒｙｏｔａ）中间是非常原始的。
- 吴传芬李靖炎代嘉陵王永潮
- 关键词：涡鞭毛虫着丝粒动粒蛋白
- 免疫印迹技术的一些改进被引量：3
- 1996年
- 本文描述了作者在研究低等生物着丝粒蛋白过程中对免疫印迹技术所作的一些改进：１．分离胶由１２％ＳＤＳ聚丙烯酰胺均一胶改作５％—１２％（或１５％）的线性梯度胶，使不同分子量范围的蛋白都能得以较好地分离；２．用眼虫色素代替溴酚蓝作示踪剂，以能适时地终止电泳；３．转移由４００ｍＡ３．５ｈ改为２００ｍＡ１７ｈ，由冰箱内空气冷却改为流水浴冷却，提高了冷却效率；４．对转移后的硝酸纤维素膜作除ＳＤＳ处理；使转移后的蛋白在一定程度上得以复性；５．抗体孵育温度由３７℃或室温１—２ｈ改为４℃冰箱过夜，降低了本底，提高了印迹反应的特异性。我们已用改进后的方法对一些低等生物作了一系列的着丝粒蛋白研究，取得了比较满意的结果。
- 吴传芬代嘉陵李靖炎王永潮
- 关键词：免疫印迹电泳生化技术
- 源真核生物贾第虫与原细菌着丝粒／动粒蛋白的免疫印迹检查被引量：4
- 1996年
- 以抗人着丝粒蛋白Ｂ的单抗和多抗以及抗ＣＨＯ细胞动粒蛋白的单抗对源真核生物（ａｒｃｈｅｚｏａ）蓝氏贾第虫（Ｇｉａｒｄｉａｌａｍｂｌｉａ）和分别代表原细菌的３个枝的３种原细菌（Ｈａｌｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ、Ｔｈｅｒｍｏｐｌａｓｍａ、Ｓｕｌｆｏｓｐｈａｅｒｅｌｌｕｓ）作了免疫电泳检查，并以小眼虫和大肠杆菌作为对照。结果表明，３种原细菌都呈阳性反应；而且贾第虫的反应情况显然比纤毛虫、眼虫、典型涡鞭毛虫、尖尾虫（Ｏｘｙｒｒｈｉｓ）等单细胞后真核生物的更接近于原细菌的情况。这不仅从一个新的方面为真核细胞起源于古代的原细菌的学说提供了新的佐证，而且从着丝粒／动粒蛋白方面证明了源真核生物贾第虫的原始性。本工作还为认识着丝粒蛋白Ｂ和动粒蛋白的起源和演化提供了线索。
- 吴传芬李靖炎代嘉陵卢思奇王永潮
- 关键词：贾第虫着丝粒动粒蛋白免疫印迹
- 中国砂鼠利什曼原虫（Leishmania gerbilli）的细微结构及动质体碱性昼白的细胞化学特性的初步研究
- 吴传芬
- 嗜热四膜虫的着丝粒蛋白检查
- 1996年
- 目前国际上的着丝粒蛋白研究工作几乎全是以酵母和高等生物为材料进行的。为了从起源与进化的角度考察着丝粒蛋白，我们以人喉癌培养细胞ＨｅｐⅡ作为对照材料，以两种ＡＣＡ血清和ＣＥＮＰ－Ｂ单抗、多抗以及ＣＨＯ动粒蛋白单抗为探针，用间接免疫荧光和免疫印迹技术对嗜热四膜虫（Ｔｅｔｒａｈｙｍｅｎａｔｈｅｒｍｏｐｈｉｌａ）作检查。免疫荧光结果表明，ＨｅｐⅡ细胞的着丝粒抗原在间期核中呈点状分布：与ＨｅｐⅡ细胞的不同，嗜热四膜虫的着丝粒抗原在问期核中的分布呈不规则的斑块状。免疫印迹结果表明，作为单细胞生物的纤毛虫虽然在进化上距离哺乳动物和人甚远，但却已具备了与哺乳动物和人的相似的着丝粒／动粒点抗原蛋白。这说明着丝粒和动粒的蛋白组分可能是发生得很早的，而且是相当保守的。
- 吴传芬代嘉陵杨新林李靖炎王永潮
- 关键词：四膜虫着丝粒蛋白
- 小眼虫的着丝粒蛋白检查
- 1996年
- 为了从起源与进化的角度考察着丝粒蛋白，我们从比酵母更低等的原生生物着手，检查它们的着丝粒蛋白。另文我们已报道了对四膜虫研究的结果，本文报道的是对小眼虫（Ｅｎｇｌｅｎａｇｒａｃｉｌｉｓ）的检查。我们的结果表明：眼虫细胞核里存在的ＡＣＡ抗原的分子量，包括了用ＡＣＡ血清在高等生物中检出来的ＣＥＮＰ－Ａ、ＣＥＮＰ－Ｂ、ＣＥＮＰ－Ｃ和ＣＥＮＰ－Ｄ这几类基本的着丝粒蛋白组分。作免疫荧光染色后，细胞核呈很强的阳性反应，但分辨不出前着丝粒小点。核仁不被荧光染色，除了核仁外似乎整个核都被染色。这可能反映了抗原的分布在核内不是集中成点状的。经过制备核骨架的程序处理后，细胞核仍为阳性（尽管荧光较弱）。如此看来，眼虫至少已有相当大一部分的ＡＣＡ抗原是与核骨架结合着的。对分离的细胞核作相应的抽提处理后再作免疫印迹检查，得到的阳性反应带也证明了这一点。
- 吴传芬代嘉陵李靖炎王永潮
- 关键词：小眼虫着丝粒蛋白
