吴涛
- 作品数：24 被引量：171H指数：7
- 供职机构：南方医科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金中国博士后科学基金广东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 不同浓度5-溴脱氧尿嘧啶核苷标记山羊骨髓基质干细胞的体外研究
- 2009年
- 目的利用5-溴脱氧尿嘧啶核苷（BrdU）标记山羊骨髓基质干细胞（BMSCs），检测其最佳标记浓度、时间及细胞毒性，探讨其作为山羊BMSCs标记及示踪方法的可行性。方法抽取10个月龄健康中国青山羊骨髓，贴壁培养并鉴定。以浓度分别为5、10、15和20μmol／L的BrdU标记第4代细胞，分别记为A、B、C、D组；未用BrdU标记的细胞作为空白对照组（E组）。分别标记12、24、48和72h后，免疫荧光法检测各组标记阳性率，锥虫蓝拒染法检测标记后细胞存活率。结果原代及传代培养的山羊BMSCs形态主要为梭形，经诱导后能向成骨细胞和软骨细胞分化。标记后，荧光显微镜下胞核呈绿色荧光。随着标记时间和浓度的增加，各实验组标记阳性率逐渐增高，于15μmlol／L孵育48h后，其标记率可达到（93．32±3．25）％，与15μmol／L孵育72h和20μmol／L孵育48、72h差异无统计学意义（P〉0．05），与其他各组各时间点差异有统计学意义（P〈0．05）；各时间点空白对照组标记阳性率均为0。锥虫蓝拒染实验示各组细胞存活率均在90％以上，差异无统计学意义（P〉0．05）。结论BrdU浓度为15μmol／L，标记时间为48h时，对山羊BMSCs可得到最佳的标记效果，且安全性较高。
- 张晓强李旭金丹黎健伟吴涛江汕裴国献
- 关键词：山羊5-溴脱氧尿嘧啶核苷干细胞生物学标记
- Qtracker体外标记兔成骨诱导分化后细胞的初步研究
- 2010年
- 目的探讨Qtracker体外标记兔成骨诱导分化后细胞的特点及可行性。方法抽取3个月龄健康新西兰大白兔骨髓，贴壁培养骨髓基质干细胞（BMSCs），传至第3代后向成骨细胞诱导，并做鉴定。Qtracker分别以1、2、4、8、16和32nmol／10‘细胞的浓度标记成骨诱导分化后细胞，分别记为A、B、C、D、E、F组；未标记的细胞作为空白对照组（G组）。分别利用荧光显微镜计数和流式细胞术两种方法检测标记阳性率，台盼蓝拒染法检测标记后细胞存活率，甲基噻唑基四唑（MTr）法观察Qtracker染料对细胞增殖的影响。结果兔BMSCs经诱导后能向成骨细胞诱导分化。经Qtracker标记后，荧光显微镜下胞浆呈绿色荧光。随着标记浓度的增加，A、B、C、D、E、F组细胞标记阳性率逐渐增高，于8nmol／10。细胞的浓度标记时，在荧光显微镜下计数，标记率可达到（93．58±2．08）％；通过流式细胞仪检测，其标记率为（95．24±1．31）％，经两种方法测定，D、E、F组间标记率差异均无统计学意义（P〉0．05），且与其他各组比较差异均有统计学意义（P〈0．05）；G组各时间点标记阳性率均为0。以不同浓度标记后各组细胞存活率均在96％以上，且各组之间差异无统计学意义（P〉0．05）。标记Qtracker后对细胞的增殖无影响（P〉0．05）。结论Qtracker可用于兔成骨诱导分化后细胞的体外标记，在浓度为8nmol／10^5细胞下可得到最佳的标记率，且其对成骨诱导分化后细胞的增殖无明显影响。
- 杨科跃范欣欣金丹江汕姜晓锐吴涛张晓强裴国献
- 关键词：骨髓细胞成骨细胞生物学标记
- Gamma钉与DHS微创治疗老年股骨转子间骨折的前瞻性研究被引量：36
- 2008年
- 目的 对应用Gamma钉和DHS微创治疗老年股骨转子间骨折患者的疗效进行分析比较.方法 对2004年1月至2006年12月收入院的58例股骨转子间骨折患者进行前瞻性随机对照研究,AO分型A1型21例,A2型37例;应用Gamma钉30例,DHS 28例.术前评价两组患者一般资料差异无统计学意义,具有可比性.分别对两组患者手术创伤、术后功能及并发症等情况进行统计学分析对比.结果 Gamma钉和DHS在切口平均长度、术后6d疼痛评分方面比较,差异无统计学意义;两者对比,DHS组的手术时间相对较短,术中平均出血量、术后引流量较少,两组差异有统计学意义.Gamma钉组的早期功能恢复优于DHS组,在骨折愈合及远期疗效方面差异无统计学意义.在并发症方面,Gamma钉固定易出现股骨骨折,DHS易出现髋内翻和内固定失败,切口感染、深静脉血栓形成及骨不连等两者差异无统计学意义.结论 老年股骨转子间骨折内固定术应遵循易操作、创伤小、并发症少的原则.A1型骨折尽可能采用DHS固定,A2型骨折若伴有明显骨质疏松,建议应用Gamma钉固定,以利于尽早开始功能锻炼,术中应尽可能减少扩髓.骨折部位在Gamma钉入点附近时建议使用DHS固定.
- 杜浩郭锐张晓强吴涛扈延龄裴国献
- 关键词：股骨骨折
- 不同比例激活富血小板血浆对其生长因子浓度及人骨髓基质干细胞增殖的影响被引量：7
- 2008年
- 目的确定激活剂凝血酶与富血小板血浆（PRP）混合的最适比例，并探讨凝血酶与PRP中血小板衍生生长因子-AB（PDGF-AB）和转化生长因子-β1（TGF-β1）对人骨髓基质干细胞（hBMSCs）增殖的联合作用。方法按1000U凝血酶溶于1mL质量百分比为10％的CaCl2配制激活剂。按PRP与激活剂混合比例为1：1、5：1、10：1、20：1、40：1分为A、B、C、D、E5组。ELISA法测定各组0、1、8、24、120h后PRP凝胶中PDGF-AB、TGF—β1的浓度；MTT法评价各组PRP凝胶上清对hBMSCs增殖的影响。结果PRP与凝血酶混合后，PDGF—AB、TGF-β1浓度立即升高，在激活1h后达到高峰。B、C、D组PRP凝胶中PDGF—AB、TGF-β1的浓度最高，并明显促进hBMSCs的增殖；而A组则抑制hBMSCs的增殖。结论PRP对hBMSCs增殖的作用与其所含有PDGF—AB、TGF—β1存在浓度依赖性，而凝血酶可能在一定浓度范围内主要通过对PRP中生长因子浓度的调控来影响hBMSCs的增殖，但是当凝血酶浓度过高时则抑制hBMSCs的增殖。
- 黄谦吴涛金丹黄爱文江汕裴国献
- 关键词：血浆血小板凝血酶骨髓细胞
- 淫羊藿苷可促进羊骨髓间充质干细胞的增殖和成骨分化
- 目的探讨淫羊藿苷对羊骨髓间充质干细胞(gBMSCs)增殖和分化的影响及其作为组织工程骨诱导活性因子的可行性。方法对体外培养的第3代gBMSCs用浓度分别为0.1、1、10、100 uM的淫羊藿苷培养基进行培养,采用MTT...
- 吴涛金丹南开辉裴国献
- 异基因造血干细胞移植后迟发性非感染性肺部并发症的发生率和危险因素分析
- ＜正＞目的:通过临床病例总结,阐明接受allo-HSCT后迟发性非感染性肺部并发症（LONIPCs）的发病率和危险因素。方法:回顾性分析2003年1月-2006年8月南方医院144例接受allo-HSCT并存活超过3个月...
- 吴涛刘启发范志平孙竞徐丹张钰魏永强黄芬
- 文献传递
- 可控释淫羊藿苷的仿生组装骨诱导修复材料被引量：13
- 2009年
- 中药来源的植物黄酮淫羊藿苷具有良好的成骨药理活性,其来源广泛、价格低廉、性质稳定,有望作为一种新的成骨因子应用于骨组织工程研究.本研究采用原位复合和冷冻干燥技术,探索性地仿生构建了淫羊藿苷-壳聚糖/羟基磷灰石(淫羊藿苷-CS/HA)复合材料,并对其物理特征、力学性能、体外细胞相容性、药物控释行为和原位骨缺损修复进行了研究.结果表明:淫羊藿苷载药过程对CS/HA复合材料的物理结构无显著影响,对其力学性能的影响与载药剂量相关;该材料细胞相容性良好,可诱导人骨髓间充质干细胞向成骨方向分化;在体外释药缓慢,对所载淫羊藿苷的控释时间可达90d以上;另外,体内骨修复试验亦证明该材料具有良好的骨传导性和骨诱导活性,能有效填充骨缺损并促进早期成骨.这些结果都说明淫羊藿苷-CS/HA复合材料是一种理想的骨组织工程诱导修复材料,其制备方法可为载药支架材料研究提供新的思路.
- 吴涛南开辉陈景帝金丹江汕赵培冉徐俊昌杜浩张晓强黎健伟裴国献
- 关键词：淫羊藿苷羟基磷灰石控释仿生骨组织工程
- 瘦素对hBMSCs成骨分化的作用及机制研究被引量：4
- 2009年
- 目的探讨瘦素(leptin,LEP)对hBMSCs成骨分化的作用及机制。方法采用全骨髓法培养hBMSCs,取第3代hBMSCs分为A、B、C、D、E、F组,待细胞贴壁后各组分别加入400、200、100、50 ng/mL LEP、100 ng/mL BMP和普通培养基2 mL进行培养。于培养后7 d行ALP染色、21 d行矿化结节染色,倒置相差显微镜观察染色结果;并于培养后7、14、21 d,检测各组ALP活性、骨钙素(osteocalcin,OCN)水平,筛选LEP的最佳诱导浓度;B、E、F组细胞培养7 d后,采用RT-PCR检测成骨相关基因:核心结合因子(core-binding factorα1,Cbfα1)、ALP、ColⅠ、OCN mRNA的表达。结果诱导培养7 d,ALP染色结果显示,A、B、C、D、E组细胞胞浆均呈蓝色阳性着色,F组呈弱阳性;诱导培养21 d,矿化结节染色结果显示,A、B、C、D、E组细胞染色呈阳性,F组呈阴性。B组培养后7、14、21 d,ALP、OCN活性低于E组,但显著高于其余各组,差异均有统计学意义(P<0.05),200 ng/mL LEP为最佳浓度。B、E、F组细胞培养7 d,F组Cbfα1、ALP、ColⅠ、OCN mRNA均不表达;B、E组各产物mRNA均有表达,但B组低于E组。结论LEP可促进hBMSCs成骨分化,其机制可能为LEP促进了成骨相关基因的表达。
- 徐俊昌吴涛钟招明赵成毅汤勇智陈建庭
- 关键词：成骨分化基因表达
- 荧光活性染料DiI标记的大鼠骨髓基质干细胞生长增殖及其成骨分化被引量：2
- 2009年
- 背景:目前关于骨髓基质干细胞的标记报道较多,各有其优缺点,寻找一种有效、简便的细胞标记与示踪的方法尤为关键。目的:观察经荧光活性染料DiI标记的大鼠骨髓基质干细胞生长增殖与成骨分化情况。设计、时间及地点:细胞学体外观察,于2008-09/12在南方医科大学组织工程研究中心完成。材料:SD大鼠10只,由南方医科大学实验动物中心提供。DiI应用液为美国Molecular ProbeInc公司产品。方法:全骨髓法体外分离培养大鼠骨髓基质干细胞,取传至第3代细胞,加入无血清的DMEM制成细胞悬液,再加入1×109L-1的DiI应用液5μL,37℃下孵育25min,清洗离心后,加入DMEM高糖完全培养基,荧光显微镜观察细胞荧光强度及形态变化。另取传至第3代细胞,加入含地塞米松、维生素C、β-磷酸甘钠、体积分数为10%胎牛血清的成骨诱导剂进行诱导分化。主要观察指标:DiI标记后细胞形态变化,XTT比色法测定细胞增殖状况,细胞上清液中乳酸脱氢酶活性,成骨诱导后细胞碱性磷酸酶活性及成骨分化能力。结果:锥虫蓝染色见骨髓基质干细胞活力好,仅偶见蓝染细胞,荧光显微镜下DiI标记后全部细胞的胞浆、胞膜均显红色荧光,标记的骨髓基质干细胞呈梭形,胞浆丰富,保持了良好的正常形态,DiI标记阳性率为100%,标记早期细胞形态呈荧光环状,48h后细胞中荧光颗粒增多,荧光增强,细胞核未染荧光。与未标记细胞比较,DiI标记的骨髓基质干细胞增殖吸光度、培养上清液乳酸脱氢酶活性、碱性磷酸酶活性均无明显变化(P>0.05)。成骨诱导7d后,钙钴法染色两组骨髓基质干细胞均见不同程度的胞质呈棕黑色改变。结论:DiI能有效标记体外培养的骨髓基质干细胞,并在细胞内稳定表达,且标记细胞形态良好,对活体细胞无毒性作用;此外,DiI标记不影响骨髓基质干细胞的生长、增殖及成骨分化能力。
- 黎洪棉余元龙柳大烈吴涛赵培冉梁双武
- 关键词：骨髓基质干细胞DII增殖分化
- 跟腱切断法诱导大鼠异位骨化动物模型的建立被引量：5
- 2009年
- [目的]探讨建立一种异位骨化(heterotopie ossification,HO)动物模型,并初步研究其形成机制。[方法]36只雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠随机分为三组(n=12):单纯切开皮肤组(sham)、跟腱半切组(partial A-chilles’tenotomy,PAT)、跟腱全切断组(Achilles’tenotomy,AT),于术后6、10周分别行跟腱X线和组织学检查,观察异位骨形成情况。[结果](1)sham和PAT组6、10周均未发生HO;(2)AT组:术后6周,3只大鼠X线片可见异位骨,3只组织学检查发现有软骨形成;术后10周,6只大鼠均出现HO。这种异位骨具有骨小梁和骨髓结构,是通过软骨化骨形成。[结论]跟腱切断术能有效诱导大鼠HO,该方法简单、有效、易行,结果稳定。
- 徐俊昌吴涛吴桂华钟招明汤勇智赵成毅陈建庭
- 关键词：跟腱异位骨化
