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周杰
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武汉大学人民医院
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医药卫生
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合作作者
邓伟
武汉大学人民医院
黄从新
武汉大学人民医院
郭凯
武汉大学人民医院
尹小菲
武汉大学人民医院
吴攀
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L型钙通道在LQT1发病机制中作用的实验研究
2008年
目的分析L型钙电流(ICaL)在犬三层心室肌细胞中的特点,探讨其在LQT1发病机制中的作用。方法成年杂种犬14只,体重13~15k,雌雄不拘。分离犬三层心室肌细胞,采用全细胞膜片钳技术记录动作电位(AP)和ICaL,依次用Chromanol 293B(50umol/L)阻断慢激活延迟整流性钾电流(IKs)模拟LQT1,用异丙肾上腺素(100nmol/L)激活β肾上腺素受体(β-AR),观察AP和ICaL的变化。分三层取少量心室肌组织,采用实时定量逆转录聚合酶链反应(RT—PCR)技术,检测各层L型钙通道α1C亚单位的mRNA含量。结果正常情况下,犬三层心室肌细胞ICaL电流密度差异无统计学意义[外层(4.253±0.782)pA/pF,中层(4.392±0.714)pA/pF,内层(4.182±0.665)pA/pF,P〉0.05],而中层心室肌细胞动作电位时限(APD)较内层和外层的长[外层(721.48±26.59)ms,中层(911.80±31.24)ms,内层(783.52±25.27)ms,P〈0.05];阻断IKs后ICaL电流密度没有变化,而APD均明显延长[(外层(835.21±27.34)ms,中层(1089.21±30.55)ms,内层(830.64±27.12)ms,与阻断IKs前相比,P〈0.05)];β-AR兴奋使三层心室肌细胞ICaL显著增加,且三者变化差异无统计学意义[(外层(5.654±0.756)pA/pF,中层(5.458±0.702)pA/pF,内层(5.600±0.819)pA/pF,P〉0.05]。但β-AR兴奋使外层和内层心室肌细胞APD缩短,中层心室肌细胞APD延长,三者变化差异有统计学意义[外层(792.63±26.71)ms,中层(1127.85±32.10)ms,内层(811.32±27.52)ms,P〈0.05]。实时定量RT—PCR结果显示,三层心室肌细胞中α1C亚单位的mRNA含量差异无统计学意义(外层0.112±0.019,中层0.077±0.018,内层0.109±0.012,P〉0.05)。结论L型钙通道在犬三层心室肌中的分布没有差异,在LQT1模型中,Iso使三层心室肌细
郭凯
黄从新
王晞
曹峰
刘育
周杰
尹小菲
邓伟
胡萍
关键词:
心室肌细胞
L型钙电流
Β肾上腺素受体
长QT综合征
犬三层心室肌细胞的分离和鉴别
被引量:3
2008年
目的探讨有效分离和鉴别犬三层心室肌细胞的方法。方法用带有左室前降支的犬心肌组织块灌流分离心室肌细胞,得到的心肌细胞先根据解剖部位大致分成三层,再采用膜片钳技术,在电流钳模式下,随机选择各层15个细胞记录动作电位(AP),根据AP的形态、时程、频率依赖性进一步判断是否为相应层的心室肌细胞。结果经左室前降支插管灌流心肌组织块,可以得到数量多、状态好的心肌细胞。在15个心室肌细胞中,能准确判断其层次的有:外层7个、中层5个、内层8个。结论经冠状动脉插管灌流分离犬心室肌细胞是可行的,结合解剖部位和动作电位特点,能有效鉴别不同层的心室肌细胞。
郭凯
黄从新
吴攀
尹小菲
周杰
邓伟
关键词:
心室肌细胞
动作电位
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