周杰
- 作品数：4 被引量：9H指数：2
- 供职机构：天津医科大学代谢病医院内分泌研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金天津市自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- miR-20a-5p调控小鼠骨髓来源间充质干细胞脂肪分化和成骨分化的机制研究
- 朱恩东王冠男齐奇袁海瑞周杰王宝利
- microRNA-200c对3T3-L1前体脂肪细胞向脂肪细胞分化的调控作用被引量：2
- 2017年
- 目的 探讨microRNA（miRNA）-200c对3T3-L1前体脂肪细胞分化的影响.方法 利用实时PCR检测miRNA-200c在小鼠骨髓间充质干细胞（MSCs）向脂肪细胞分化过程及向骨细胞分化过程中的表达.通过将miRNA-200c类似物、miRNA-200c抑制剂转染至3T3-L1前体脂肪细胞,从而在细胞中增强或抑制miRNA-200c的表达,油红O染色检测转染后3T3-L1前体脂肪细胞诱导成熟后的脂滴形成情况.实时PCR检测转染后脂肪细胞特异性转录因子过氧化物酶体增殖物活化受体γ（PPARγ）和表征基因aP2在成脂过程中的表达变化.结果 实时PCR结果显示,在小鼠骨髓MSCs诱导成脂后miRNA-200c表达升高（t=24.709,P＜0.01）,而诱导成骨后,miRNA-200c表达下降（t=8.783,P＜0.01）.转染miRNA-200c类似物后,3T3-L1前体脂肪细胞中脂滴明显增多,PPARγ和aP2表达显著升高（t=7.674、9.657,P均＜0.01）;转染miRNA-200c抑制剂后,3T3-L1前体脂肪细胞中脂滴明显减少,PPARγ、aP2表达显著降低（t=9.483、6.419,P均＜0.01）.结论 miRNA-200c能够促进3T3-L1前体脂肪细胞向脂肪细胞分化.
- 李吉隆周杰王宝利
- 关键词：微小RNA脂肪细胞细胞分化
- 1,25-二羟基维生素D_3抑制脂肪细胞分化作用的研究被引量：4
- 2013年
- 目的研究1,25-二羟基维生素D3[1,25(OH)2D3]对脂肪细胞分化的影响及其机制。方法以间充质干细胞系C3H10T1/2为研究对象,将其分为6组,分别为对照组、诱导分化组和4个不同剂量的1,25(OH)2D3处理组。其中对照组加入溶媒,诱导分化组加入脂肪细胞诱导分化试剂,1,25(OH)2D3处理组除了加入脂肪细胞诱导分化试剂外,予以10-9、10-8、10-7、10-6mol/L 1,25(OH)2D3处理。处理后5 d进行油红O染色,RT-PCR检测脂肪细胞特异性转录因子和Wnt/β-catenin信号通路相关因子表达水平,Western blot检测β-catenin蛋白水平。结果1,25(OH)2D3能够强烈抑制脂肪细胞生成,阻断脂肪细胞特异性转录因子过氧化物酶体增殖物激活受体(PPAR)γ、CCAAT增强子结合蛋白(C/EBP)α及脂肪细胞表征因子aP2 mRNA表达,下调Wnt/β-catenin信号通路抑制因子分泌性卷曲相关蛋白1(sFRP1)mRNA,上调β连环素(β-catenin)蛋白水平。结论1,25(OH)2D3强烈抑制脂肪细胞分化,该作用可能与其激活Wnt/β-catenin信号通路有关。
- 关晓慧王君郭菲周杰王宝利
- 关键词：脂细胞骨化三醇Β连环素
- Nfic基因3′UTR双荧光素酶报告质粒的构建及其与miR-20a靶向关系的验证被引量：3
- 2016年
- 目的构建核因子C(nuclear factor I-C,Nfic)基因3′非编码区(3′UTR)荧光素酶报告质粒,利用双荧光素酶报告基因验证micro RNA-20a(miR-20a)与其潜在靶基因Nfic的靶向关系。方法通过micro RNA靶基因预测软件Targetscan获取miR-20a与Nfic基因3′UTR潜在的互补结合位点;PCR扩增出Nfic基因3′UTR序列,将此序列克隆至荧光素酶报告载体p MIR-Report Luciferase;将重组荧光素酶报告质粒与miR-20a mimics(实验组)或NCmimics(对照组)共同转染293-AD细胞,收集细胞后通过双荧光素酶报告系统检测2组细胞的荧光素酶活性,从而对Nfic与miR-20a的靶向调节关系进行鉴定。将miR-20a mimics和NC mimics分别转染骨髓基质细胞系ST2,裂解细胞提取蛋白后采用Western blotting检测NFIC蛋白的表达水平。结果构建的重组荧光素酶报告质粒经酶切及测序鉴定正确。双荧光素酶报告基因检测显示,与对照组相比,miR-20a可以抑制Nfic 3′UTR报告基因载体的荧光素酶活性(P<0.05);Western blotting结果显示,与对照组相比,ST2细胞转染miR-20a mimics后NFIC蛋白表达水平明显下调。结论成功构建了Nfic基因3′UTR荧光素酶报告质粒,而miR-20a可以直接作用于Nfic基因3′UTR,抑制其荧光素酶活性。
- 王珊李晓霞周杰王宝利
- 关键词：微RNAS骨髓基质细胞系荧光素酶报告基因
