孙冬
- 作品数：3 被引量：10H指数：1
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- 蜘蛛杀虫肽与Bt-toxin C肽融合蛋白(BGT)基因的原核表达与蛋白质纯化被引量：1
- 2007年
- 从质粒pCAMBIA2301-BGT中获得蜘蛛杀虫肽与Bt-toxin C肽融合蛋白(BGT)基因编码区全长,并构建了原核表达载体pET28a-BGT。将此质粒转入大肠杆菌BL21(DE3)中,获得有效表达,新蛋白的分子量约为51 kDa,主要以包涵体形式存在。在变性条件下以不同的咪唑和pH值洗脱方式进行比较,确定以咪唑为金属鳌合亲和柱层析的洗脱条件,获得了纯BGT蛋白。
- 孙冬詹亚光曾凡锁
- 关键词：BT原核表达蛋白纯化
- BGT杀虫基因的原核表达、抗体制备及在转基因白桦中表达的初步研究
- 近年来植物基因工程的研究进展十分迅速，人们利用植物基因工程技术，培育出抗病毒，抗虫害，抗除草剂及抗盐，抗旱等抗逆性植物。然而，转基因植物能否长期稳定的表现出某一特定的性状，以及外源基因在转基因植物中的表达特性等问题，都需...
- 孙冬
- 关键词：白桦融合蛋白基因原核表达抗体制备
- 文献传递
- 转基因白桦外源基因的多重PCR快速检测被引量：9
- 2006年
- 根据转化的载体序列上T-DNA中的目的基因bt,选择性筛选标记基因nptⅡ和报告基因gus设计三对特异性引物,PCR产物片断大小分别为247bp、449bp、668bp,应用多重PCR(muti-plex-PCR)的方法同步检测18株转基因白桦中三个基因的整合状况;用阳性对照为模板,对单重PCR(simplex-PCR)和多重PCR的各项指标进行比较。结果表明多重PCR检测多个外源基因在敏感性方面与单重PCR相比并没有减弱,而且略有提高;对18株样品的多重PCR同步检测无假阳性出现,结果准确,同时在操作中具有减少污染,缩短时间和节约成本等优点。因此,在对转基因白桦的外源基因的定期检测中,多重PCR是一种非常有效而便捷的方法,可以为转基因的拷贝数,T-DNA旁侧序列特征等转基因整合特性方面的研究提供数据。
- 詹亚光苏涛韩梅孙冬
- 关键词：白桦外源基因T-DNA多重PCR
