孙强玲
- 作品数：9 被引量：28H指数：3
- 供职机构：上海市胸科医院更多>>
- 发文基金：上海市市级医院新兴前沿技术联合攻关项目上海市自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 耐紫杉醇肺癌细胞BNX动物模型的建立被引量：5
- 2011年
- 目的建立一种耐药性稳定的人肺癌BNX小鼠皮下移植瘤模型,为研究体内肿瘤耐药机制和逆转药物的筛选奠定实验基础。方法将体外培养的对数生长期的肺癌耐药细胞株A549-Taxol,接种在免疫缺陷小鼠的皮下,形成肿瘤,采用肿瘤组织块或肿瘤组织原代培养的细胞,分别于动物皮下接种致瘤;体内外交叉进行致瘤,提高耐药细胞株A549-Taxol的致瘤率和缩短致瘤时间。通过免疫组化鉴定该耐药细胞的特性。用MTT法检测细胞的耐药指数。结果耐药细胞接种于SCID小鼠4个月后在皮下形成肿瘤灶。用该肿瘤组织块或细胞悬液移植于SCID小鼠,通过反复3次后,细胞生长速度变快,2个月后皮下即可形成肿瘤。将该细胞移植于BNX小鼠,以同样的方法将瘤组织体内外交叉进行致瘤,最终BNX小鼠种植成功率达到80%。致瘤时间为3周。耐药细胞和组织块P-gp170、GST-π和MMP-7均高表达。A549-Taxol细胞的紫杉醇半数抑制浓度(IC50)是亲代A549细胞的520倍。结论初步建立了人肺腺癌耐药细胞(A549-Taxol)的动物模型,为肺癌临床个体化治疗及耐药逆转研究等提供了良好的实验动物平台。
- 沙慧芳孙强玲杨晓华
- 关键词：肿瘤抗药性紫杉醇动物模型
- 蛋白质指纹图谱技术在肺癌分子标志物研究中的应用被引量：1
- 2009年
- 目的分析肺癌与肺部良性疾病及正常人血浆蛋白质指纹图谱的变化,建立肺癌血浆标志物诊断模型。方法应用蛋白质指纹图谱(SELDI-TOF-Ms)技术检测108例肺癌患者、40例肺部良性疾病患者和22例正常人血浆标本,采用层次聚类分析和主成分分析建立决策树模型,应用该模型盲筛21例肺部良性疾病和47例Ⅰ期肺癌。结果筛选到23个差异蛋白峰(P<0.001)。盲筛分析显示决策树模型诊断敏感性和特异性分别为72.34%和71.43%,阳性预测值和阴性预测值分别为85.0%和78.95%,诊断正确性为72.06%。结论应用SELDI-TOF-Ms技术初步建立的蛋白质模型为肺癌的早期诊断提供了新的技术平台。
- 沙慧芳叶剑定孙强玲杨晓华包国良冯久贤龚乐罗
- 关键词：蛋白质指纹图谱血浆肺癌蛋白质芯片分子标志物
- 应用差异凝胶电泳及质谱技术筛选肺癌患者血浆差异蛋白被引量：3
- 2010年
- 目的建立健康者、肺部炎症患者和肺癌患者的血浆蛋白表达谱,寻找与肺癌早期发生相关的差异蛋白。方法应用差异凝胶电泳(DIGE)和基质辅助激光解吸飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)对健康者、肺部炎症患者和Ⅰ期肺癌患者血浆进行蛋白质组学比较研究,寻找肺癌相关差异蛋白。结果应用DIGE进行分离后,成功获得了蛋白质组分辨率高、重复性好的双向凝胶电泳图谱;DeCyder 6.5软件分析获得差异大于2倍的蛋白质点共有72个;质谱鉴定去冗余后确定了12种蛋白质,其中7种与肿瘤相关,分别为酰基辅酶A合成酶家族成员3、抗血小板膜糖蛋白Ⅰb特异性抗体、γ-纤维蛋白原、4型血清淀粉样蛋白A、补体因子H、钙结合微丝蛋白、载脂蛋白Ⅰ。结论应用DIGE及MALDI-TOF-MS分离并初步鉴定了12种蛋白质,筛选出7种在肺癌患者血浆中高表达的肿瘤相关蛋白。
- 沙慧芳孙强玲杨晓华储天晴谢银银鲁静包国良冯久贤龚乐罗
- 关键词：蛋白组学血浆肺癌
- 人肺腺癌紫杉醇耐药细胞株的建立及其特性研究被引量：10
- 2009年
- 目的建立耐紫杉醇的人肺腺癌A549(A549/Taxol)细胞株,并初步研究其生物学特性。方法应用抗肿瘤药紫杉醇以体外浓度递增和短时作用法筛选A549细胞株。用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测细胞的耐药指数及对多种抗癌药物的敏感性;免疫细胞化学法检测P-糖蛋白(P170)、β-tubulin等耐药相关蛋白的表达情况。结果A549/Taxol细胞的紫杉醇半数抑制浓度(IC50)是亲代A549细胞的512.8倍,群体倍增时间是亲代细胞的1.28倍,对紫杉醇、丝裂霉素、长春新碱、诺维本的耐药指数依次为512.8、66.48、4.88和2.06;而对顺铂、健择无交叉耐药。A549/Taxol细胞高表达P170,β-tubulin表达水平高于其亲代细胞系。结论成功建立了一株耐紫杉醇的A549/Taxol,并呈多药耐药特性。
- 杨晓华沙慧芳冯久贤孙强玲储天晴高志强
- 关键词：肺腺癌细胞A549多药耐药紫杉醇细胞株
- 非小细胞肺癌紫杉醇化疗耐药前后血清CK18水平的变化
- 2010年
- 目的研究血清细胞角蛋白18(CK18)水平与非小细胞肺癌患者紫杉醇化疗耐药的关系。方法以紫杉醇联合卡铂方案化疗(2～6个周期)第1个周期结束时点RECIST疗效评价为病情稳定或以上的30例非小细胞肺癌患者作为研究对象,采集第1个治疗周期结束时点及出现病情进展(耐药)时点的外周血样本。ELISA双抗体夹心法检测耐药前后患者血清CK18水平。结果患者耐药前后血清CK18水平分别为(0.356±0.199)ng/mL和(0.566±0.189)ng/mL,差异有统计学意义(P=0.002);其中4例患者血清CK18水平略有下降(<20%),均为化疗第2个周期结束时点疗效评价为病情进展(即耐药)的患者;其余26例患者血清CK18水平表现为升高,且均为接受至少3个周期化疗后发生病情进展的患者;其中20例增高大于20%,最高达947.17%。结论血清CK18水平与非小细胞肺癌患者紫杉醇化疗耐药有关。血清CK18水平检测可为晚期非小细胞肺癌患者的个性化治疗提供参考依据。
- 储天晴孙强玲沙慧芳韩宝惠
- 关键词：非小细胞肺癌紫杉醇化疗细胞角蛋白18
- 微创胸腔镜手术与开胸手术治疗纵膈肿瘤的临床比较被引量：4
- 2017年
- 目的 比较微创胸腔镜手术与传统开胸手术治疗纵膈肿瘤的临床疗效. 方法 将86例纵膈肿瘤患者按照手术方式分为观察组（n=44）与对照组（n=42）,观察组患者实行微创胸腔镜手术,对照组患者实行传统开胸手术,比较两组手术时间、切口长度、术后引流量、术后住院时间,比较两组的临床疗效及并发症发生情况.结果 研究组手术时间、切口长度、术后引流量、住院时间均显著少于对照组（P〈0.01）.观察组总有效率为93.2%,对照组为76.2%,观察组显著高于对照组（P〈0.05）.观察组并发症发生率为9.1%,对照组为38.1%,观察组显著低于对照组（P〈0.01）.结论 微创胸腔镜术治疗纵膈肿瘤效果显著,具有创伤小、耗时短、患者恢复快等特点,且并发症少,优于传统开胸手术,值得临床推广应用.
- 王学中孙强玲
- 关键词：开胸手术纵膈肿瘤并发症
- LINC 01296/miR-1255 b-5 p促进非小细胞肺癌进展的研究被引量：3
- 2021年
- 目的探究下调LINC 01296的表达对非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)进展的影响,以及LINC 01296调控miR-1255 b-5 p在NSCLC发生发展中的分子机制。方法培养6种NSCLC细胞系;实时荧光定量聚合酶链反应法检测LINC 01296在NSCLC细胞系以及在48例患者样本中表达水平的高低;细胞计数试剂盒-8法检测稳转细胞株的细胞增殖情况;克隆形成实验检测细胞的生长以及增殖状况;划痕实验检测细胞的迁移情况;FITC-Annexin-V法检测细胞凋亡;动物实验,包括裸鼠尾静脉和皮下瘤注射,观察癌细胞的转移以及成瘤情况;双荧光素酶报告基因实验验证LINC 01296与miR-1255 b-5 p之间存在靶向结合关系。结果LINC 01296在NSCLC中高表达;LINC 01296基因敲低抑制NSCLC细胞生长、迁移;LINC 01296敲低抑制体内瘤体的生长和转移;LINC 01296与miR-1255 b-5 p的之间存在海绵吸附作用;LINC 01296与miR-1255 b-5 p的表达呈负相关。结论LINC 01296作为NSCLC的促癌分子,通过抑制miR-1255 b-5 p的表达水平,促进了NSCLC的发展。
- 夏道韫许琳枫柴彬淑郭静孙强玲李艳利
- 关键词：非小细胞肺癌细胞增殖和凋亡
- 紫杉醇耐药细胞与敏感细胞分泌蛋白差异凝胶电泳分析被引量：2
- 2009年
- 背景与目的紫杉醇是用于肺癌临床一线治疗的作用于微管蛋白的化疗药物,而耐药是影响其疗效的关键因素。本研究应用蛋白组学技术整体比较紫杉醇耐药细胞与敏感细胞分泌蛋白表达谱,以期发现肺癌紫杉醇耐药相关分泌蛋白标志物,为临床选择有针对性的化疗药物提供依据。方法收集A549亲代及耐药细胞培养液中的蛋白,应用差异凝胶电泳(DIGE)进行分离,Decyder 6.5软件分析后获得的差异蛋白点通过基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)进行鉴定。结果应用DIGE进行分离后,成功获得了蛋白质组分辨率高、重复性好的双向凝胶电泳图谱,Decyder 6.5软件分析获得差异>2倍以上的蛋白质点共有76个,经质谱鉴定了19种蛋白,鉴定的蛋白涉及代谢酶类、细胞外基质降解酶类、粘附分子、细胞因子和信号转导相关蛋白质。结论本研究首次应用双向电泳技术整体展示了紫杉醇耐药细胞株及敏感细胞株的分泌蛋白表达谱,并分析、鉴定、筛选出与紫杉醇耐药相关的差异分泌蛋白。该研究为非小细胞肺癌血清耐药标志物的筛选提供了新的方法和候选分子。
- 孙强玲杨晓华鲁静谢银银储天晴沙慧芳
- 关键词：蛋白组学分泌蛋白紫杉醇肺肿瘤
- 紫杉醇耐药与敏感细胞的差异表达蛋白分析被引量：3
- 2009年
- 目的比较人肺腺癌细胞系A549与肺腺癌紫杉醇耐药细胞系A549-Taxol的差异表达蛋白。方法提取A549和A549-Taxol总蛋白,应用双向凝胶电泳技术(2-DE)分离,ImageMaster 5.0软件分析并筛选出两者间差异表达的蛋白点,质谱分析加以鉴定。结果获得分辨率高且重复性好的肺腺癌耐紫杉醇细胞系及亲代细胞系2-DE图谱。ImageMaster软件分析差异大于2倍的蛋白质点共有80个,其中33个在耐药细胞系中上调,47个下调。质谱分析鉴定出19种差异表达蛋白,其中A549-Taxol中上调蛋白11种,涉及细胞骨架蛋白、代谢酶类、分子伴侣和信号转导相关蛋白质。结论应用2-DE技术整体展示了紫杉醇耐药细胞系及敏感细胞系的蛋白表达谱,质谱法鉴定的差异蛋白为进一步从多因素角度研究紫杉醇耐药机制提供了新线索。
- 孙强玲杨晓华储天晴谢银银鲁静包国良冯久贤龚乐罗沙慧芳
- 关键词：双向凝胶电泳蛋白质组学肺癌紫杉醇耐药
