孙薇薇
- 作品数:8 被引量:14H指数:2
- 供职机构:西北农林科技大学动物科技学院更多>>
- 发文基金:国家科技重大专项更多>>
- 相关领域:农业科学生物学医药卫生理学更多>>
- 培氟沙星人工抗原的合成与鉴定被引量:1
- 2011年
- 【目的】制备培氟沙星(Pefloxacin,PEF)完全抗原,并对其免疫学特性进行鉴定。【方法】以培氟沙星与牛血清白蛋白(BSA)为材料,用碳二亚胺(EDC)法制备培氟沙星-牛血清白蛋白完全抗原(PEF-BSA),变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)及紫外扫描(UV)检测其免疫学特性;利用PEF-BSA免疫BALB/c小鼠,无菌条件下收集血清,用间接ELISA测定多抗血清(pAb)效价。并用同样的方法制备和鉴定培氟沙星-鸡卵清白蛋白完全抗原(PEF-OVA)。【结果】培氟沙星与牛血清白蛋白及鸡卵清白蛋白偶联成功,PEF-BSA偶联比为8∶1,PEF-OVA偶联比为6∶1。间接ELISA测得多抗血清效价均达到4 000以上,得到了较好的免疫效果。【结论】成功得到了培氟沙星完全抗原,该抗原具有较强的特异性及良好的敏感性。
- 孙薇薇上官陶俞亚玲张冠世李引乾李麟
- 关键词:培氟沙星人工抗原ELISA检测
- 抗培氟沙星单克隆抗体杂交瘤细胞株的制备及免疫学鉴定
- 本试验旨在制备分泌培氟沙星抗体的杂交瘤细胞,并对其免疫学特性进行鉴定,为培氟沙星药物残留检测奠定基础。结果如下: 1.完全抗原的制备及鉴定通过EDC法将培氟沙星与牛血清白蛋白与鸡卵清白蛋白偶联,并通过SDS-PAGE及紫...
- 孙薇薇
- 关键词:培氟沙星ELISA检测抗体杂交瘤细胞
- SD大鼠玉米赤霉烯酮中毒病理模型的复制
- [目的]玉米赤霉烯酮(zearalenone,ZEA),义称F-2毒素,是由镰刀菌产生的一种雌激素类真菌毒素.通过污染玉米,小麦等作物进入动物体内,引起动物繁殖障碍,给畜牧业造成损失,同时危害人类健康.本试验以大鼠为实验...
- 俞亚玲周宏超李引乾孙薇薇张冠世贾辰
- 关键词:玉米赤霉烯酮SD大鼠中毒
- 文献传递
- 氟苯尼考纳米乳的制备及品质评价被引量:9
- 2011年
- 为了制备出高效低毒稳定的氟苯尼考纳米乳,采用单因素筛选,通过相图优化制备工艺制备纳米乳,并对氟苯尼考纳米乳的稳定性、形态和粒径分布、含量等指标进行考察。结果显示,以吐温-80、甘油、乙酸乙酯和氟苯尼考为原料制备的氟苯尼考纳米乳品质较好,其最佳质量比为6:3:1,粒径为5~70nm,经高速离心、留样观察,外观和含量未发生明显变化,但对光不稳定。
- 刘安刚李引乾孙娇孙薇薇赵建乐俞亚玲王成龙姬双双
- 关键词:氟苯尼考纳米乳
- 玉米赤霉烯酮中毒大鼠卵巢组织Bax和Bcl-2的表达
- [目的]Bcl-2是一个多基冈家族,至少有15个家族成员,它们形成同源或异源二聚体,调控蛋白酶和核酸酶活性,双向调控细胞凋亡.Bcl-2抑制细胞凋亡.Bax (Bcl-2 associdted X protein)是一个...
- 俞亚玲周宏超李引乾孙薇薇张冠世贾辰
- 关键词:玉米赤霉烯酮卵巢组织颗粒细胞BAX
- 文献传递
- 溶葡萄球菌素的原核表达及多克隆抗体的制备
- 2011年
- 【目的】制备溶葡萄球菌素(lys)的多克隆抗体,为检测其在转基因细胞、胚胎及转基因动物中的表达奠定基础。【方法】以含有lys基因成熟肽序列的PEPB质粒为模板,经PCR扩增,构建pET28a-Ly原核表达载体,并以其转化大肠杆菌BL21(DE3)菌株,经IPTG诱导表达并纯化蛋白后,常规免疫家兔,制备多克隆抗体;用ELISA方法检测抗体效价,Western blot检测抗体的特异性。【结果】构建的原核表达载体pET28a-Ly经IPTG诱导6h后即可高效表达lys蛋白,蛋白经纯化后,其质量浓度可达到3.05mg/mL;抗体经ELISA检测,效价为1∶27 000,West-ern blot检测结果表明,抗体的特异性较好。【结论】成功构建了lys原核表达载体,所制备的lys多克隆抗体具有较高的效价和良好的特异性。
- 张勃伟孙薇薇上官陶黄欣张涌
- 关键词:多克隆抗体原核表达
- 溶葡萄球菌素基因乳腺特异表达载体的构建与检测及转基因核供体细胞的制备
- 2011年
- 本研究旨在构建溶葡萄球菌素基因牛乳腺特异表达载体(pEPB),转染牛胎儿成纤维细胞,为制备溶葡萄球菌素基因的转基因克隆牛提供核供体细胞。本研究以pEGFP-C1为载体骨架,通过PCR扩增牛2.6kb的β-酪蛋白5′调控区及0.6kb的3′侧翼区(poly A)序列作为调控序列,制备成含有绿色荧光和新霉素筛选标记的牛乳腺特异表达载体,经PCR和酶切鉴定正确后,用转染试剂FuGene HD反复转染牛pEPB乳腺上皮细胞3~5次,用催乳素诱导后,经免疫荧光分析,检测目的蛋白的表达。然后,用电转染法转染牛胎儿成纤维细胞,经G418筛选得到阳性细胞后,把阳性细胞扩大培养并提取其基因组,因为溶葡萄球菌素基因是外源基因,经PCR及Southern blot检测来确定目的基因是否已经整合到细胞的基因组上。结果表明,溶葡萄球菌素基因在牛乳腺细胞中得到了表达,并整合到牛胎儿成纤维细胞的基因组中,得到了转溶葡萄球菌素基因的核供体细胞。结果显示,本研究所获得的转基因牛胎儿成纤维细胞可作为体细胞核移植的供体细胞进行转基因克隆牛研究。
- 上官陶张勃伟孙薇薇黄欣张涌
- 关键词:牛乳腺上皮细胞牛胎儿成纤维细胞
- 玉米赤霉烯酮中毒大鼠卵巢组织Bax和Bcl-2的表达被引量:4
- 2012年
- 10周龄SD大鼠单剂量腹腔注射5mg/kg玉米赤霉烯酮玉米油溶液,分别于3、6、12、24、48h时剖杀取卵巢组织,检测不同时间卵巢组织Bax和Bcl-2的表达。结果显示,病理组织学观察发现卵巢组织出现不同程度损伤,卵泡颗粒细胞发生凋亡。免疫组化SP法试验组与对照组卵巢组织中均有Bax和Bcl-2的表达,并且随着时间的推进呈现动态变化。Bax在3、6、12h时表达量上调,表达量与对照组比较差异显著(P<0.05),24、48h时表达量下降,与对照组比较差异不显著(P>0.05)。3~48h卵巢组织中Bcl-2表达量与对照组比较差异不显著(P>0.05)。结果表明,大鼠玉米赤霉烯酮中毒可引起卵巢组织的病变及颗粒细胞凋亡,且Bax在玉米赤霉烯酮中毒大鼠卵巢颗粒细胞凋亡中起着重要作用,Bcl-2的作用不明显。
- 俞亚玲周宏超孙薇薇张冠世贾辰李引乾
- 关键词:玉米赤霉烯酮卵巢组织颗粒细胞BAX