宋春丽
- 作品数：12 被引量：19H指数：3
- 供职机构：重庆医科大学检验医学院感染性疾病分子生物学教育部重点实验室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金重庆市自然科学基金国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- Sirtuin1(SIRT1)通过转录因子AP-1调节HBV的转录和复制
- 目的研究Sirtuin 1(SIRT1)在乙型肝炎病毒(HBV)复制中的作用,并探讨SIRT1在调节HBV复制过程中可能的机制。方法运用Real-time PCR、western-blot分析SIRT1在HBV复制细胞中...
- 任吉华陶颖宋春丽李宛蔚冉龙宽陈娟
- SIRT2沉默对肝癌细胞的迁移和侵袭能力的影响被引量：8
- 2013年
- 目的探讨慢病毒介导的沉默信息调节因子2(silent information regulator2,SIRT2)基因沉默对肝癌细胞的迁移和侵袭能力的影响。方法 Western blot分析SIRT2在多个肝癌细胞系和永生化肝细胞中的表达,通过慢病毒介导的shRNA干扰技术靶向沉默SIRT2的表达,并通过Real-time PCR和Western blot验证SIRT2基因的沉默效果。细胞迁移及侵袭实验检测SIRT2基因沉默对肝癌细胞迁移和侵袭能力的影响,Western blot检测上皮细胞间充质转化(epithelialmesenchymal transition,EMT)指标蛋白(E-cadherin、α-catenin、α-SMA、N-cadherin)的表达。结果 SIRT2在多个肝癌细胞系中蛋白表达水平明显上调;慢病毒介导的shRNA能显著抑制细胞SIRT2的表达水平(P<0.05)。SIRT2基因沉默能抑制肝癌细胞的迁移和侵袭能力(P<0.01),并使上皮属性蛋白E-cadherin、α-catenin表达水平升高,使间质属性蛋白α-SMA、N-cadherin表达水平降低。结论 SIRT2基因沉默可以通过抑制肝癌细胞上皮细胞间充质转化从而抑制肝癌细胞的迁移和侵袭能力。
- 宋春丽任吉华冉龙宽李宛蔚陈娟
- 关键词：肝癌迁移
- SIRT2基因沉默后对肝癌细胞增殖的影响被引量：5
- 2014年
- 目的探讨沉默信息调节因子2相关酶2(silent information regulator 2 related enzyme 2,SIRT2)基因沉默对肝癌细胞增殖的影响及分子机制。方法利用慢病毒介导的shRNA干扰技术,靶向沉默SIRT2基因的表达;Western blot检测SIRT2基因沉默效果及SIRT2沉默后β-catenin蛋白的表达变化;流式细胞计数检测SIRT2基因沉默后肝癌细胞周期的变化,CCK-8法检测SIRT2基因沉默对肝癌细胞增殖的影响,台盼蓝计数检测SIRT2基因沉默及过表达β-catenin后,SIRT2基因沉默对肝癌细胞增殖的影响;BrdU实验检测SIRT2基因沉默对肝癌细胞DNA合成的影响;平板集落实验检测SIRT2沉默对肝癌细胞克隆形成能力的影响。结果 SIRT2 shRNA靶向沉默显著抑制肝癌细胞SIRT2的表达水平,shRNA沉默组肝癌细胞PLC-5的增殖能力较对照组分别下降48.3%(shSIRT2-1)、55.6%(shSIRT2-2)(P<0.01);SIRT2基因沉默后,肝癌细胞出现G1期阻滞,β-catenin蛋白表达水平下降;过表达β-catenin后SIRT2基因沉默组较对照组肝癌细胞增殖分别升高了89%(shSIRT2-1)、75%(shSIRT2-2)(P<0.01)。结论 SIRT2沉默可能通过调节β-catenin信号通路来影响肝癌细胞增殖。
- 冉龙宽宋春丽李宛蔚任吉华陈祥陶娜娜陈娟
- 关键词：肝癌增殖
- SIRT3在HBV感染诱导的氧化应激反应中的作用及其对HBV复制的影响
- 目的研究Sirtuin 3(SIRT3)在HBV感染诱导的氧化应激反应中的作用及其对HBV复制的影响,并探讨SIRT3调控HBV复制的分子机制。方法运用细胞免疫荧光技术验证HBV感染对细胞氧化应激反应的影响;Real-t...
- 任吉华宋春丽李宛蔚冉龙宽陶娜娜陈祥黄爱龙陈娟
- 关键词：HBV氧化应激
- 文献传递
- SIRT3在肝细胞癌中的潮湿及机制研究
- 宋春丽
- SlRT3在HBV感染诱导的氧化应激反应中的作用及其对HBV复制的影响
- 目的 研究Sirtuin 3(SIRT3)在HBV感染诱导的氧化应激反应中的作用及其对HBV复制的影响,并探讨SIRT3调控HBV复制的分子机制.方法 运用细胞免疫荧光技术验证HBV感染对细胞氧化应激反应的影响;Real...
- 任吉华宋春丽李宛蔚冉龙宽陶娜娜陈祥黄爱龙陈娟
- 关键词：HBV
- SIRT1基因沉默诱导肝癌细胞老化及其机制被引量：5
- 2012年
- 目的探讨慢病毒介导的沉默信息调节因子1(silent information regulator1,SIRT1)基因沉默对肝癌细胞老化的影响及机制。方法通过慢病毒介导的shRNA干扰技术靶向沉默SIRT1的表达,并通过Real-time PCR和Westernblot验证SIRT1基因的沉默效果。BrdU标记实验检测细胞增殖情况,流式细胞仪检测细胞周期变化;β-半乳糖苷酶染色观察肝癌细胞有无老化;Western blot检测衰老相关基因p53和p21蛋白的变化。结果慢病毒介导的shRNA能显著抑制细胞SIRT1的mRNA及蛋白水平。SIRT1沉默能抑制肝癌细胞的增殖,抑制率达70%～80%;同时,SIRT1沉默能显著诱导G1期细胞周期阻滞:感染shCont的细胞处于G1期比例为(44.29±0.36)%,而感染shSIRT1-1的细胞处于G1期细胞为(69.20±1.24)%,感染shSIRT1-2的细胞处于G1期比例为(65.86±1.75)%。SIRT1沉默后肝癌细胞中衰老相关的β-半乳糖苷酶染色显著增高,阳性细胞占40%～50%(P<0.05),并伴随衰老相关基因p53和p21蛋白表达增加。结论 SIRT1基因沉默可能通过p53/p21途径促进细胞衰老。
- 宋春丽任吉华张祯祯陶颖陈娟
- 关键词：肿瘤细胞系细胞衰老
- 沉默信息调节因子6(SIRT6)在原发性肝细胞癌(HCC)中的作用机制研究
- 目的研究沉默信息调节因子2相关酶6(sirtuin6,SIRT6)对肝癌细胞生长的影响,并探索SIRT6调控肝癌细胞生长的分子机制。方法运用Real-time PCR、western blot、免疫组织化学分析SIRT6...
- 冉龙宽李宛蔚宋春丽任吉华陈祥陶娜娜黄爱龙陈娟
- 关键词：肝癌凋亡
- 文献传递
- 慢病毒介导的靶向沉默信息调节因子1（SIRT1）的RNA干扰对肝癌细胞生长及凋亡的影响
- 2012年
- 目的探讨慢病毒介导的靶向SIRTlshRNA对肝癌细胞生长和凋亡的影响。方法Western印迹分析SIRT1在多个肝癌细胞系中的表达；通过慢病毒介导的shRNA干扰技术靶向沉默SIRT1的表达，并通过Western印迹验证SIRTl基因的沉默效果。台盼蓝排斥实验分析SIRT1基因沉默对肝癌细胞生长的影响；流式细胞术和Western印迹检测PARP蛋白的剪切物观察细胞凋亡状态。结果SIRT1在多个肝癌细胞系中表达水平明显上调；慢病毒介导的shRNA能显著抑制细胞中SIRT1的表达。流式细胞术及Western印迹结果均显示SIRT1表达沉默显著诱导了肝癌细胞的凋亡。结论慢病毒介导的靶向SIRT1shRNA显著地抑制SIRT1的表达；SIRT1基因沉默抑制肝癌细胞生长并促进了细胞凋亡。
- 任吉华宋春丽陶颖陈娟
- 关键词：SIRT1凋亡
- SIRT1基因shRNA慢病毒载体的构建及其对乳腺癌细胞增殖的影响被引量：1
- 2013年
- 目的:探讨慢病毒介导沉默信息调节因子1(silent information regulator 1,SIRT1)基因的shRNA对乳腺癌细胞MCF-7增殖和凋亡的影响。方法:设计、合成2对针对SIRT1基因shRNA的寡核苷酸序列,与pLentilox3.7-GFP载体连接产生重组慢病毒质粒pshSIRT1-1、pshSIRT1-2,同时构建不针对任何基因的shRNA阴性对照pshCont。将表达shRNA的载体plentilox3.7与pLP1、pLP2和pLP/VSVG 3种质粒共转染293FT细胞,包装产生慢病毒并测定病毒滴度。将慢病毒感染人乳腺癌细胞MCF-7,行real time-PCR和Western blot验证SIRT1基因的沉默效果,台盼蓝排斥实验和流式细胞仪分别检测其对MCF-7细胞增殖和凋亡的影响。结果:成功构建靶向SIRT1基因shRNA慢病毒载体并获得了相应的慢病毒。2个靶向SIRT1的shRNA均能有效抑制SIRT1基因的表达(P=0.000 2),并使MCF-7细胞增殖明显减慢,凋亡明显增加(P=0.006 0)。结论:靶向SIRT1基因RNA干扰能显著抑制MCF-7细胞的生长并促进其凋亡。
- 陶颖陈可宋春丽任吉华陈娟
- 关键词：慢病毒乳腺癌细胞RNA干扰
