岳筠
- 作品数：136 被引量：288H指数：9
- 供职机构：贵州省动物疫病预防控制中心更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金教育部科学技术研究重点项目贵州省科技计划项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生自动化与计算机技术更多>>
- 山羊痘病毒P32蛋白在毕赤酵母中的表达与鉴定
- 2011年
- 为了获得具有生物安全性高的体外表达蛋白,以含山羊痘病毒贵州LD株P32基因的质粒pMD18-T-P32/LD为模板,应用PCR方法扩增P32基因不同片段,将基因片段克隆至毕赤酵母菌表达载体pPICZαA中,构建了重组表达载体,转化感受态毕赤酵母菌X-33中并诱导表达。SDS-PAGE分析结果显示,有分子量约为64 ku的融合蛋白获得表达,与预期结果相符;Western-blot证实该表达蛋白具有免疫学活性。
- 程振涛岳筠周碧君许乐仁王开功文明李永明朱时杰
- 关键词：山羊痘病毒P32基因毕赤酵母
- 猪繁殖障碍疫病的三重PCR法鉴别诊断被引量：1
- 2007年
- 为建立一种简便、快速检测猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪细小病毒(PPV)和猪伪狂犬病病毒(PRV)3种病原的多重PCR方法,针对PRRSV N基因、PPV VP 2基因及PRV gp50基因分别合成了1对特异性引物,通过PCR均扩增出分子长377bp、445bp和217bp的DNA条带,与预期扩增片段相符。以3对引物同时对PRRSV、PPV和PRV疫苗株进行多重PCR扩增及反应条件的优化,同时扩增出3条特异性条带。利用所建立的多重PCR方法,对贵州省11个养猪场的40份疑似病料进行检测,结果显示,PRRSV、PPV和PRV的阳性检出率分别为62.5%、17.5%和0%。
- 周思旋周碧君岳筠徐春志鲍娟罗阿东史开志陈琼乖
- 关键词：猪蓝耳病细小病毒病伪狂犬病三重PCR
- 一种基于Mo Hsp70蛋白的间接ELISA试剂盒及使用方法
- 本发明公开了一种基于Mo Hsp70 蛋白的间接ELISA试剂盒及使用方法。基于Mo Hsp70蛋白的间接ELISA试剂盒原料及配方为：包被Mo Hsp70 蛋白的酶标板、Mo标准阳性和标准阴性血清、酶标二抗、50×PB...
- 程振涛王慧王开功周碧君文明岳筠
- 文献传递
- 贵州省种猪场5种传染病的血清学调查分析被引量：6
- 2009年
- 张双翔文明方英陈军义周碧君王开功程振涛岳筠
- 关键词：病毒性传染病种猪场血清学调查呼吸道症状母猪繁殖障碍猪细小病毒病
- 绵羊肺炎支原体P113蛋白和丝状支原体山羊亚种LppA蛋白共表达质粒对小鼠免疫应答的研究被引量：2
- 2022年
- 为研究绵羊肺炎支原体(Mo)P113基因和丝状支原体山羊亚种(Mmc)LppA基因的共表达质粒免疫小鼠后对其免疫系统的影响,本研究构建了真核重组质粒pVAX1-P113-LppA,并经PCR、双酶切及测序鉴定正确后转染MDBK细胞,利用PCR及间接免疫荧光试验(IFA)分别检测P113蛋白和LppA蛋白的表达,结果显示,正确构建了含Mo P113基因及Mmc LppA基因的重组质粒pVAX1-P113-LppA;且该重组质粒在MDBK细胞中能有效转录并表达目的蛋白。分别在0、7 d、14 d时以100μg/只pVAX1-P113-LppA腿部肌肉注射免疫BABL/c小鼠,并设Elution Buffer对照组和空载体pVAX1(100μg)对照组,通过MTT法检测小鼠脾细胞增殖情况,并在初次免疫后28 d利用流式细胞术分析各组小鼠脾细胞中CD4^(+)T淋巴细胞和CD8^(+)T淋巴细胞所占总淋巴细胞数的变化,同时采用的ELISA方法检测小鼠免疫后血清特异性抗体和细胞因子(IL-2、IL-4和IFN-γ)的分泌情况。结果显示,重组质粒组小鼠脾淋巴细胞增殖能力极显著高于对照组和空载体组(P<0.01),且该组小鼠脾CD4^(+)、CD8^(+)T淋巴细胞在免疫28 d时较Elution Buffer对照组和空载体pVAX1(100μg)对照组均极显著上升(P<0.01);该组小鼠免疫后7 d的血清特异性抗体水平极显著升高(P<0.01),在初次免疫后第49 d特异性抗体仍为阳性;血清中IL-2、IL-4和IFN-γ的分泌水平较Elution Buffer对照组和空载体pVAX1(100μg)对照组均呈显著上升趋势(P<0.05),且在首次免疫后28 d时分泌量最高,而后缓慢下降。攻毒试验结果显示,重组质粒pVAX1-P113-LppA对小鼠具有一定的免疫保护能力,小鼠肺部病理损伤明显减轻,发病数量减少。本实验首次表明重组质粒pVAX1-P113-LppA能诱导小鼠产生体液免疫和细胞免疫应答,Mo P113基因和Mmc LppA基因可以作为羊支原体肺炎(MPSG)DNA疫苗的候选基因,该结果为MPSG核酸疫苗的研究与应用提供实验基础。
- 杨鹏吴燕岳筠陈静李梅王慧张双翔文明程振涛
- 关键词：绵羊肺炎支原体丝状支原体山羊亚种共表达免疫应答
- 山羊痘病毒TaqMan-MGB荧光定量PCR检测方法的建立与应用被引量：13
- 2009年
- 利用DNAStar分析了GenBank中所有8株羊痘病毒全基因序列,选取位于山羊痘病毒(AY077835)基因组gp064区域约64bp的基因片段,设计并合成了一对PCR引物和一条TaqMan-MGB探针,建立了FQ-PCR和标准曲线,并利用该方法对山羊痘临床皮肤痘疹材料和人工感染动物材料进行GPV核酸检测。结果表明,构建的FQ-PCR具有良好的敏感性、特异性、稳定性和临床应用性。该方法的建立为山羊痘临床快速高效地诊断和山羊痘病毒感染羊只的发生、发展及转归研究提供了一种有效的手段。
- 程振涛岳筠李永明许乐仁王开功周碧君陈军义李俊江楠
- 关键词：山羊痘病毒荧光定量PCR
- 猪繁殖与呼吸综合征的血清学调查与病原核酸检测
- 为了解贵州省猪群中猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)的流行情况，并对临床发生的疑似PRRS疫情作出确定性诊断，本试验采用PRRS酶联免疫诊断试剂盒对非免疫猪群和免疫猪群的1254头份血清样本进行抗体检测，采用RT-PCR方法...
- 岳筠周碧君程振涛徐春志周思旋史开志李永明韦忠梅
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征血清学调查
- 文献传递
- 一种新型可灭菌动物饲养箱
- 本实用新型涉及饲喂箱技术领域，且公开了一种新型可灭菌动物饲养箱，包括空心结构的箱体，所述箱体的前侧面贯穿开设有观察窗口且观察窗口的内部平行铺设有透明玻璃板，透明玻璃板可拆卸安装在观察窗口的内部，所述箱体的前侧面靠近下侧位...
- 尹德晶程振涛王开功岳筠杨鹏陈静宋春
- 文献传递
- 斗鸡新城疫病毒DQ株融合蛋白基因序列分析
- 2007年
- 从越南斗鸡暴发的病例中分离出1株新城疫病毒（NDV），命名为贵州分离株（DQ）。采用RT—PCR方法扩增分离株（DQ）的整个F基因片段，并将其克隆到pMD-18T载体中。序列分析结果表明，DQ株F基因分子长为1662bp，编码553个氨基酸。该毒株与国内2株分离株（CH2000、TW2000）之间的亲缘关系较近，其核苷酸和氨基酸序列同源性分别为95．7％-96．6％和96．6％-96．8％；但与LaSota、B1及1748E9等常见毒株的核苷酸和氨基酸同源性仅为84．0％-86．5％和87．2％-89．9％。DQ分离株在F蛋白裂解住点的氨基酸顺序为^112R—R—Q—K—R—F^117，与NDV强毒株特征相符，且具有101处的K（赖氨酸）和121处V（缬氨酸）2个特征性氨基酸，与NDV基因Ⅶ型的特性完全相符。利用MegAlign软件绘制NDV的系统发育进化树表明该分离株为基因Ⅶd亚型。
- 伍祥龙伍明山何骞岳筠文明
- 关键词：斗鸡新城疫病毒
- 一例鸡大肠杆菌病的病原分离鉴定
- 2020年
- 为确诊某养鸡场发病的原因,采集临床病死鸡的肝脏、脾脏进行细菌分离培养,并通过细菌形态学观察、生化试验、分子生物学鉴定和药物敏感性试验.结果:分离细菌为革兰氏阴性杆菌,菌落形态和生化鉴定特征与大肠杆菌相符;16S rDNA PCR扩增及基因同源性分析确定为大肠杆菌;菌株对安普霉素、泰妙菌素、多西环素、硫酸粘菌素较敏感,对替米考星、泰万菌素、磺胺间甲氧嘧啶、泰乐菌素、阿莫西林存在耐药性.
- 李乔斌谢晓东陈静尹德晶杨鹏程振涛程振涛
- 关键词：大肠杆菌病PCR扩增基因序列分析药敏试验
