张跃灵
- 作品数:10 被引量:42H指数:4
- 供职机构:中国科学院微生物研究所更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金河南省科技攻关计划国家科技攻关计划更多>>
- 相关领域:生物学环境科学与工程农业科学更多>>
- 改进重叠延伸PCR技术构建定点双突变被引量:6
- 2010年
- 目的:DNA片段中快速构建位点不同的定点双突变体。方法:借鉴DNA shuffling技术中DNA小片段延伸扩增获得全长DNA片段的工作原理,与常规基因定点突变技术相结合,改进重叠延伸PCR技术构建定点双突变。结果:对嗜酸热脂肪杆菌(Alicyclobacillus acidocaldarius)Tc-12-31的甘露聚糖酶基因AamanA中两个可能的活性位点E151和E231进行双点突变,先后经过无引物和有引物两步PCR,扩增获得全长DNA,测序结果表明得到预期的定点双突变体;酶活性检测和薄层层析结果表明双点突变体丧失了酶的活性。结论:改良的重叠PCR技术,能经济、简便、高效地获得双点定点突变体,在酶的催化机理的阐述、蛋白质结构改造等分子生物学领域中具有较高的应用价值。
- 徐书景张跃灵张妍赵宝华鞠建松马延和
- 关键词:重叠延伸PCR甘露聚糖酶
- 土壤中五氯酚的测定及其生物降解研究被引量:15
- 2003年
- 探索了土壤中五氯酚的测定方法。在藏红T分光光度法的基础上 ,用蒸馏法直接提取土壤中的五氯酚进行测定 ,效果较好 ,克服了常用的超声提取及萃取方法测定结果不稳定的弊端。当土壤中五氯酚浓度为 5 0~ 1 0 0mg/kg时 ,采用上述方法测定回收率为 85 .5 0 %~95 .38% ,灵敏度为 0 .0 1mg/kg。此外在利用黄孢原毛平革菌对灭菌土壤中五氯酚的降解试验中 ,应用上述方法成功地进行了土壤中五氯酚的测定。当土壤中五氯酚污染水平为 5 0~2 0 0mg/kg时 ,黄孢原毛平革菌对五氯酚具有较强的降解作用。
- 吴坤徐淑霞陈红歌张跃灵
- 关键词:土壤五氯酚生物降解灵敏度
- Alicyclobacillus acidocaldarius Tc-12-31甘露聚糖酶的研究
- 本文对嗜酸热细菌Alicyclobacillus acidocaldarius Tc-12-31产生的甘露聚糖酶进行了研究。论文取得的主要结果有:
(1)从云南腾冲酸性热泉样品中筛选到9株产甘露聚糖酶的嗜酸热细菌菌...
- 张跃灵
- 关键词:菌株筛选甘露聚糖酶基因克隆纯化鉴定
- 黄孢原毛平革菌对印染废水脱色条件研究被引量:5
- 2005年
- 根据黄孢原毛平革菌的生长和代谢特点,设计了不同废水浓度、不同菌龄、不同温度、不同转速和不同pH值条件,研究黄孢原毛平革菌对工业印染废水的脱色效果。研究表明,印染废水最佳稀释倍数为8倍,脱色用菌丝球最佳接种菌龄为3d,脱色适宜温度为38℃,摇床转速为150~180r/min,脱色初始pH值为3.4~4.6。
- 张世敏徐淑霞张跃灵宋安东吴坤
- 关键词:环境工程黄孢原毛平革菌菌丝球印染废水脱色
- 酵母海藻糖合成酶基因植物表达载体的构建与转化被引量:1
- 2003年
- 以从原核表达载体中酶切得到的tps1基因为模板,设计适当的引物,利用PCR技术,克隆出大约1.5 kb的片段.PCR产物经回收后,与PCAMBIA1303连接并转化大肠杆菌DH5α,阳性重组子经PCR鉴定,表明已获得海藻糖磷酸合成酶基因的植物表达载体.用基因枪转化小麦幼胚,经组织培养得到了含有海藻糖合成酶基因的小麦植株.
- 樊剑鸣张跃灵李莉陈红歌贾新成
- 关键词:海藻糖海藻糖合成酶基因植物表达载体转基因抗逆性
- β-甘露聚糖酶及基因和制备方法以及载体和宿主细胞
- 本发明提供了一种β-甘露聚糖酶,该β-甘露聚糖酶具有SEQ ID:NO.2所示的氨基酸序列,SEQ ID:NO.4所示的氨基酸序列,SEQ ID:NO.6所示的氨基酸序列,SEQ ID:NO.8所示的氨基酸序列,或者对S...
- 马延和张跃灵薛燕芬
- 文献传递
- 黄孢原毛平革菌过氧化物酶的分离、纯化和酶学特性研究被引量:14
- 2007年
- 从木质素降解菌Phanerochaetechrysosporium中纯化出两种木质素降解酶:木质素过氧化物酶(LiP)和锰依赖过氧化物酶(MnP)。经测定LiP和MnP的分子量分别为37kD和40kD,最适作用温度均是37℃;保温2h,LiP的半失活温度为40℃,MnP为45℃;LiP最适作用pH2.8,稳定pH2.2~5.2;MnP最适作用pH4.6,稳定pH4.0~7.0。Fe2+对LiP和MnP均表现出促进作用,Na+、K+、Ca2+、Mg2+、Zn2+、Fe3+、Ag+、Co2+、NH4+对LiP有促进作用,对MnP则表现出抑制作用。与此相反,Mn2+对MnP酶活的高效促进作用,对LiP表现出了轻度的抑制作用,这也体现出了MnP对Mn2+的依赖性。Cu2+对LiP活性无影响,而对MnP有强烈的抑制作用。Fe3+对两者活性的抑制都达到了90%。
- 徐淑霞张跃灵张世敏王学东吴坤
- 关键词:木质素过氧化物酶黄孢原毛平革菌酶学特性
- 黄孢原毛平革菌及其过氧化物酶对印染废水的脱色研究
- 对黄孢原毛平革菌产木质素过氧化物酶(Lip)和锰依赖过氧化物酶(MnP)的发酵条件的研究表明:采用限氮培养基,37℃,150rpm摇瓶培养6天LiP达到最大值,7天MnP达到最大值;如果在6天时,将培养物转为静置培养有助...
- 张跃灵
- 关键词:黄孢原毛平革菌木质素过氧化物酶酶学性质脱色印染废水
- 文献传递
- β-甘露聚糖酶及基因和制备方法以及载体和宿主细胞
- 本发明提供了一种β-甘露聚糖酶,该β-甘露聚糖酶具有SEQ ID:NO.2所示的氨基酸序列,SEQ ID:NO.4所示的氨基酸序列,SEQ ID:NO.6所示的氨基酸序列,SEQ ID:NO.8所示的氨基酸序列,或者对S...
- 马延和张跃灵薛燕芬
- 文献传递
- 生物技术对环境微生物的构建及行为控制
- 2007年
- 微生物代谢方式的多样性使其具有降解环境污染物的能力,生物技术则为优化这一能力提供了强有力的工具。运用生物技术可以进化出微生物新的代谢能力,甚至可以将不同微生物的代谢片段组装起来,建立全新的代谢途径。生物技术还为加强生物防护提供了有效保障。本文回顾了近年来生物技术在改造环境微生物及对环境微生物行为控制方面的进展及应用。
- 徐淑霞田建军张跃灵吴坤
- 关键词:代谢途径基因重组降解特性生物防护