张问
- 作品数：4 被引量：5H指数：2
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- 小麦甲基结合蛋白TaMBD1的体外表达及互作蛋白分析
- 为了探讨小麦甲基结合蛋白TaMBD1的生物学功能,本文构建了TaMBD1的原核表达载体,优化了重组蛋白的诱导条件,并利用亲和层析结合双向电泳技术分离了小麦叶片中TaMBD1的互作蛋白,主要研究结果如下:
1.在实验...
- 张问
- 关键词：小麦双向电泳
- 文献传递
- 小麦TaMBD2原核表达载体的构建和诱导表达被引量：3
- 2008年
- 构建了小麦甲基结合域蛋白基因TaMBD2的原核表达载体pGEX-TaMBD2,并在大肠杆菌BL21(DE3)工程菌株中优化了融合蛋白GST-TaMBD2的诱导表达条件。结果表明,用0.3、0.5和1.0mmol·L-1的IPTG诱导后,融合蛋白GST-TaMBD2均能有效表达,以1.0mmol·L-1 IPTG诱导的效果最好;从诱导表达的时间来看,3种浓度IPTG诱导1h后融合蛋白均开始表达,且表达量随着诱导时间的延长而逐渐增加,但在诱导6h后的表达量增加幅度不大,因此确定诱导融合蛋白GST-TaMBD2表达的最佳IPTG浓度为1.0mmol·L-1,诱导时间为6h。
- 孟凡荣司志飞刘昊英张问李永春尹钧
- 关键词：小麦原核表达
- 小麦甲基结合蛋白基因MBD3重组表达载体的构建和原核表达被引量：1
- 2008年
- DNA甲基化在基因表达调控过程中发挥重要作用,甲基结合蛋白(Methyl-Binding Domain Protein,MBD)是能特异识别甲基化位点的反式作用因子。开展植物MBD基因的功能研究对于探讨植物生长发育的表观遗传学调控机制具有重要意义。该研究构建了小麦甲基结合蛋白基因MBD3的原核表达载体pGEX-4T-MBD3,转化大肠杆菌BL21(DE3)工程菌株,在37℃,1mMIPTG浓度条件下,成功诱导表达了的GST-MBD3融合蛋白,大小为49.6kDа,这为进一步开展MBD3的蛋白纯化和功能分析奠定了基础。
- 孟凡荣司志飞刘昊英张问
- 关键词：原核表达
- 植物甲基结合蛋白(MBD)被引量：2
- 2009年
- DNA甲基化是生物体内普遍存在的一种基因修饰,甲基结合蛋白(MBD)是与甲基化DNA结合的反式作用因子,在植物生长发育过程中起调控作用。本文介绍了植物DNA甲基化和MBD蛋白在植物生长发育调控中的研究进展,并对其研究前景作了展望。
- 张问李永春张艳霞凌娜孟凡荣
- 关键词：DNA甲基化植物
