彭清忠 作品数:93 被引量:371 H指数:10 供职机构: 吉首大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 湖南省重点学科建设项目 湖南省教育厅优秀青年基金 更多>> 相关领域: 生物学 农业科学 医药卫生 轻工技术与工程 更多>>
E.coliBL21(DE3)磷酸转乙酰基酶缺陷变株的筛选及特性 被引量:1 2000年 目的 :利用大肠杆菌磷酸转乙酰基酶 (PTA)缺陷变株减少工程菌乙酸的产生 ,以利于工程菌高密度培养及外源蛋白表达。方法 :从E .coliBL2 1(DE3)出发筛选PTA变株 ,并对变株的特性进行研究。结果 :筛选得到 5株磷酸转乙酰基酶缺陷变株 ,变株的乙酸累积水平为亲株的 1/ 5左右 ,最大比生长速率为亲株的 2 / 3左右。各种有机酸 (乙酸、乳酸、丙酮酸和琥珀酸 )对BL2 1(DE3)及其变株生长影响的考察结果显示 ,有机酸对PTA变株的生长抑制曲线发生了一定变化 ,其中以乙酸影响的变化最为显著。低浓度乙酸对PTA变株的生长不但不具抑制作用反而具有刺激作用 ,而高浓度乙酸对变株生长的抑制作用也明显减弱。 张惟材 邓兵兵 朱厚础 彭清忠 黄培堂关键词:PTA 乙酰肝素酶信号肽对其活性功能的影响研究 被引量:1 2008年 目的:乙酰肝素酶在肿瘤转移过程中起关键作用,其信号肽在该酶翻译后处理过程中起重要作用。本研究旨在探索乙酰肝素酶在哺乳动物细胞中的表达特性及其信号肽对此酶功能活性的影响。方法:从人胎盘cDNA文库中扩增乙酰肝素酶全长编码基因,克隆入pGEM-T载体中,测序鉴定序列完全正确后,将此基因的全长和不含信号肽基因序列分别克隆入真核表达载体pcDNA4.1/Myc-His中构建pcDNA4.1/Myc-His full HPA和pcDNA4.1/Myc-His part HPA,转化COS-7细胞进行瞬时表达,分析这两种乙酰肝素酶蛋白的表达特性及功能活性。结果:在转染了乙酰肝素酶全基因的COS-7细胞裂解液中检测到该酶的功能活性及大小约53×103(Mr)的目的蛋白免疫印迹表达带,为切割激活后乙酰肝素酶羧基端大亚基与标签蛋白的融合体。在转染了敲除信号肽的乙酰肝素酶基因的COS-7细胞裂解液中测到未被切割激活的大小约65×103(Mr)的目的蛋白免疫印迹表达带,未能检测到该酶的功能活性。结论:在COS-7细胞中表达的完整的乙酰肝素酶蛋白和不含信号肽的乙酰肝素酶蛋白均位于细胞内,没有或很少被分泌到细胞外,提示该酶在正常状态下主要分布在细胞内。含信号肽的酶蛋白在翻译后处理过程中被细胞内的蛋白酶切割成2个亚基而被激活,具有功能活性。而不含信号肽的酶蛋白没有被切割而成为有活性的酶,提示乙酰肝素酶的信号肽对其翻译后加工、激活过程有重要的影响。 李燕杰 马远方 李吉学 汤国营 彭清忠 朱厚础关键词:乙酰肝素酶 信号肽 COS-7细胞 生物类专业人才培养示范基地建设的“五结合两转化模式” 被引量:3 2018年 基于十多年的合作,吉首大学与高望界、小溪保护区共建了生物类专业人才培养省级示范基地。在基地建设过程中,始终把培养学生的综合素质与实践能力作为基地建设的核心目标及中心任务,施行"五结合两转化"的基地实践教学模式。根据生物类专业的特点,充分利用保护区的资源优势及学校的人才优势,培养能吃苦耐劳,热爱大自然和自然保护工作,具有良好自我发展前景和能力的高素质专业人才;注重理论与实践的有机结合,以及双师型教学团队的联动建设,带动了一大批基地学生的成长;突出教学与科研的互动,努力实现科研资源转化为教学资源;既重视发挥基地关键师生的带头作用,又强调基地建设的统筹性、示范性和受益面。 刘志霄 张佑祥 刘世彪 张代贵 彭清忠关键词:高校 自然保护区 生物类专业 地方性高校生物工程专业实验教学体系的改革与实践 被引量:5 2016年 生物工程是一门实践性很强的学科,基于目前实验教学中存在的重视不够、工程学概念不强、教学模式单一、教学效果不佳等问题,提出了深化实验教学改革的思路,阐述构建思想重视、工程学理念突出、基础扎实、口径宽的柔性实验体系的方法,旨在进一步推进地方高校生物工程专业实验教学改革,全面提高教学质量。 易浪波 彭清忠 周强关键词:生物工程 实验教学 工程化 植物黄酮在抗新冠病大流行中的作用:人们对绿茶黄酮的使用 2023年 2020年笔者报道了植物黃烷3醇没食子酸酯(flavan-3-ol gallates,F3G)、二聚原花青素和富含这些化合物的绿茶在体外具有抑制新冠病毒(SARS-CoV-2)的主蛋白酶(main protease)活性.最近,笔者报道了F3G和其他黄酮化合物能抑制人类冠状病毒229E在细胞中繁殖.此外,许多研究也报道绿茶和植物黄酮对新冠病治疗的益处.自2020年12月以来,在美国和土耳其,笔者采用人口统计学和民族药学方法研究了新冠感染者利用绿茶帮助康复的情况.在美国,笔者统计了居家隔离的23名感染者用茶来康复的数据.其中5位感染者授权笔者分享他们用绿茶帮助康复的经验.在土耳其,笔者统计了100位不同年龄(20个月至96岁)和性别的新冠感染者恢复的详细资料,他们在没得到任何医疗帮助的情况下从新冠病中康复.在隔离期间,除了饮食,只饮用绿茶.根据他们每天的喝茶量和康复所用时间,完成了皮尔逊积矩相关系数的分析.结果表明,每天喝绿茶量和康复时间成负相关,喝绿茶越多,康复时间越短.同时,2020年笔者收集了208个国家人均喝茶量数据:土耳其人均喝茶量最多(3 kg);很多拉美国家如墨西哥,人们不喝茶.2021年收集了100个国家的人均喝茶量数据:土耳其人均喝茶量最多(3.4 kg);很多国家如墨西哥,人们不喝茶.同样,笔者收集了2020和2021年各国的新冠感染数和死亡数,计算出每个国家每年的平均死亡率,以及2年的平均死亡率.结果发现:到2020年11月30日和2021年12月31日止,土耳其的年均死亡率大约是0.96%和0.95%,而墨西哥的年均死亡率大约是10.56%和9.81%;截至2021年12月31日,土耳其的2年平均死亡率大约是0.87%,而墨西哥2年平均死亡率大约是7.54%.根据2020年的115和121个国家、2021年的93个国家的平均喝茶量和平均死亡率,笔者进行了皮尔逊积矩相关系数的分析,结果表明,人均喝茶量和死亡率成负相关,喝茶越多,死亡率越小. 谢德玉 赛伊特·尤祖克 朱越 彭清忠关键词:绿茶 牛奶 一株苯酚降解菌的分离与鉴定 被引量:5 2007年 目的:筛选能高效降解苯酚的微生物,并进行初步鉴定。方法:从某焦化厂排水沟采集污泥,通过逐步驯化筛选苯酚降解菌株;利用形态观察、生理生化检测、16S rDNA序列分析进行初步鉴定。结果:筛选获得1株苯酚降解菌JDM-2-1,该菌能够以苯酚为惟一碳源,耐酚能力高达2 200 mg/L,在30℃和pH7.0条件下,42h内能将800 mg/L的苯酚彻底降解;初步鉴定其为球形芽孢杆菌(Bacillus sphaericus)。结论:菌株JDM-2-1是一株高效降解苯酚的球形芽孢杆菌。 王永义 彭清忠 彭清静 陈义光 何倩 杨冬梅关键词:苯酚 降解 RDNA 球形芽孢杆菌 棉花miRNA表达量检测方法Stem-loop RT-PCR的建立 被引量:2 2017年 为建立一套鉴定棉花miRNA表达丰度的分子技术,优化了Stem-loop RT-PCR方法,并通过分析棉花3个miRNA的表达谱来评价分析该技术体系的特性。首先设计3条引物(茎环特异性反转录引物、正向引物和通用反向引物),通过cDNA和RNA梯度稀释,分析引物的扩增效率和检测灵敏度。结果表明,Stem-loop RT-PCR方法中设计的引物具有较高的扩增效率和检测灵敏度,miR156和miR159扩增效率分别为102.0%和103.6%;并对不同miRNA分析其总RNA检测灵敏度,miR156和miR159的总RNA检测灵敏度差异较大,分别为20 ng和2 pg。同时,应用建立的棉花Stem-loop RT-PCR方法,成功地分析了Gh-miR156、Gh-miR159和Gh-miR5658在根茎叶中的表达量。由此可见,棉花Stem-loop RT-PCR方法具有灵敏度高、特异性强、成本较低和适用于一般实验室等优点,为棉花等植物miRNA相关研究提供了技术保证,加快了miRNA及其调控基因功能的研究步伐。 胡广 王乐 张振楠 唐叶 周璐璐 周璐璐 彭清忠关键词:STEM-LOOP RT-PCR 棉花 MIRNA 传统土家腊肉加工过程中风味物质研究 被引量:9 2017年 以湘西土家族农家传统腊肉为研究对象,探讨其加工过程中挥发性风味物质的组成和变化规律,以期为传统土家腊肉的工艺改进及标准化生产提供理论依据。采用水蒸气蒸馏结合气相色谱-质谱联用(GC-MS)检测,分别对传统土家腊肉加工过程中4个阶段(腌制7 d、烟熏15 d、烟熏30 d、成熟贮藏阶段)样品中的挥发性风味成分进行分析。实验结果表明:4个工艺阶段共鉴定出主要挥发性物质98种,主要有醇类、醚类、酚类、酮类、醛类、酸类、酯类、碳氢化合物、其他类等。从腌制到烟熏过程中,醇类、酚类的种类和相对含量不断增加,而在成熟贮藏阶段种类和相对含量又减少。醚类、醛类、酮类、酸类、酯类和碳氢化合物的种数和相对含量没有明显变化。由分析可知,酚类、酯类、其他类物质为土家腊肉主要风味物质,醇类、醚类、酮类、醛类、碳氢化合物对土家腊肉风味有一定贡献。 粟桂蓉 彭钰媛 周璐璐 杨万根 彭清忠关键词:风味物质 气相色谱法测定工程菌发酵液中的乙酸 被引量:10 2000年 用气相色谱法对发酵液中的乙酸进行了分析。以丙酸为内标 ,样品用硫酸酸化后再用乙醚提取 ,在HP -FFAP毛细管分析柱上进行色谱分析 ,采用FID检测器检测。该方法样品制备过程简捷 ,精密度和回收率都很高。乙酸的回收率为 99.4 4 %~ 10 2 .4 1% ,变异系数 1.6 9%~ 6 .11%。 张惟材 邓兵兵 彭清忠 朱厚础关键词:气相色谱法 乙酸 生物法合成伤寒O-糖蛋白结合疫苗及其免疫原性评估 被引量:3 2015年 伤寒由伤寒沙门氏菌(Salmonella Typhi)引发,至今在发展中国家仍是备受关注的重要公共卫生问题。文章通过敲除伤寒菌脂多糖合成途径中O-抗原连接酶基因,转入含脑膜炎奈瑟球菌(Neisseria meningitidis)蛋白糖基化途径中糖基转移酶的表达载体,以及改构的重组铜绿假单胞菌(Pseudomonas Aeruginosa)外毒素A(r EPAN29)的表达载体,使细胞内能够诱导合成以伤寒O特异性多糖(O-specific polysaccharides,OPS)为目标抗原、以r EPAN29为载体蛋白的伤寒OPS-r EPAN29糖蛋白复合物,并对纯化所得复合物进行了免疫原性评价。ELISA测定血清抗体滴度表明,r EPAN29作为载体蛋白能有效增加糖链的免疫原性,糖蛋白比单独的多糖能诱导产生更好的免疫应答;3次免疫、间隔3周比间隔2周Ig G滴度稍有提高;而免疫过量的糖蛋白,抗O-多糖的血清抗体效价并无提升。文章为生物法制备多糖-蛋白结合疫苗提供了新思路,理论上也适用于其他革兰氏阴性菌的疫苗研发。 彭哲慧 潘超 孙鹏 冯尔玲 吴军 朱力 彭清忠 王恒樑关键词:结合疫苗 伤寒沙门氏菌 合成生物学