徐凛峰
- 作品数：17 被引量：92H指数：6
- 供职机构：南京医科大学第二附属医院更多>>
- 发文基金：江苏省中医药管理局科技项目江苏省高校自然科学研究项目南京医科大学校科研和教改项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 白虎二地汤改善2型糖尿病胰岛素抵抗大鼠糖脂代谢的实验研究被引量：5
- 2015年
- 目的研究白虎二地汤对实验性2型糖尿病(T2DM)胰岛素抵抗大鼠血糖、血脂的影响,并探讨其机制。方法采用高糖高脂饲料喂养联合低剂量链脲佐菌素腹腔注射建立T2DM胰岛素抵抗大鼠模型,将大鼠分为正常对照组、模型组、罗格列酮组、白虎二地汤高、低剂量组。治疗前后检测空腹血糖(FBG)、空腹胰岛素(FINS)、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)、血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、游离脂肪酸(FFA)。显微镜观察五组大鼠肝脏、骨骼肌、脂肪的病理变化。结果白虎二地汤可明显降低2型糖尿病大鼠FBG、FINS、HOMA-IR及血清TC、TG、LDL-C、FFA水平,升高血清HDL-C浓度,减少肝脏组织脂肪浸润,且以高剂量白虎二地汤组效果最佳。结论白虎二地汤可以改善STZ诱导的T2DM胰岛素抵抗大鼠糖、脂代谢异常,减轻胰岛素抵抗。其可能的机制是通过降低脂毒性,增强胰岛组织对胰岛素的敏感性,发挥其改善糖脂代谢紊乱和降糖降脂作用。
- 陈璇徐凛峰汪悦周方圆何晓瑾
- 关键词：糖尿病胰岛素抵抗血脂
- 体外siRNA靶向抑制PI3Kp85α基因对人胃癌AGS细胞株的作用
- 2014年
- 目的探讨小干扰RNA(siRNA)技术沉默PI3Kp85α基因表达对人胃癌细胞株AGS增殖、迁移及侵袭能力的影响。方法设计3条靶向抑制PI3Kp85α基因的siRNA片段(siRNA-1、siRNA-2、siRNA-3),分别转染人胃癌AGS细胞,并设阴性对照组及空白组。Western blotting检测siRNA序列对PI3Kp85α蛋白表达的影响。利用MTT实验、划痕迁移实验和Transwell侵袭实验检测下调PI3Kp85α水平对AGS细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响。结果转染siRNA-1、siRNA-2和siRNA-3的AGS细胞中PI3Kp85α蛋白水平均低于阴性对照组及空白组(P<0.05)。转染siRNA-3的AGS细胞PI3Kp85α蛋白表达降低最明显,抑制率达80%,故选择siRNA-3进行后续实验。转染24h后,PI3Kp85αsiRNA转染组细胞增殖能力明显低于对照组细胞(P<0.05)。24h体外划痕实验显示,PI3Kp85αsiRNA转染组的划痕愈合能力明显低于对照组(P<0.05)。Transwell实验显示,PI3Kp85αsiRNA转染组细胞的细胞穿膜数明显低于对照组(P<0.05)。结论通过siRNA能明显下调PI3Kp85α蛋白在胃癌细胞AGS中的表达,并抑制肿瘤细胞的增殖、迁移和侵袭。
- 陈璇汪悦徐凛峰
- 关键词：小干扰RNA增殖
- 电凝钩在困难的腹腔镜胆囊切除术中解剖胆囊三角的体会
- 随着胆囊炎、胆囊结石发病率的增高和LC手术数量的增加，深入探讨手术方法，进一步降低手术并发症具有重要的临床意义。本文对电凝钩在困难的腹腔镜胆囊切除术中解剖胆囊三角的体会进行了介绍。
- 张建平张熙容徐凛峰
- 关键词：胆囊切除微创手术腹腔镜技术
- 文献传递
- 人源抗EB病毒潜伏膜蛋白1特异性基因工程抗体Fab的筛选与特性被引量：1
- 2012年
- 目的:应用噬菌体展示技术制备抗EB病毒编码的潜伏膜蛋白1(latert membrare protern 1,LMP1)特异性、高亲和力的全人抗体Fab片段。方法:利用稳定转染表达LMP1的SUNE-1细胞及原核表达的LMP1胞外区蛋白作为抗原对大容量人源Fab抗体库进行差减筛选及固相筛选,经过5轮细胞筛选和3轮固相筛选,随机挑选30个克隆经酶联免疫吸附法鉴定,阳性克隆进行可溶性表达,用LMP1阳性表达的人鼻咽癌细胞株HNE2/LMP1鉴定抗LMP1抗体Fab的结合活性。结果:Western blot、免疫荧光结果显示,从大容量人源Fab抗体库中筛选出1株抗LMP1抗体Fab,细胞ELISA、荧光激活细胞分类术、免疫荧光分析、免疫组化检测结果显示Fab与人鼻咽癌细胞表面LMP1分子有较好的结合活性。结论:从人源Fab抗体库中筛选的Fab抗体能够与鼻咽癌细胞表面LMP1分子特异性结合,为研制用于EBV相关肿瘤如鼻咽癌生物治疗的靶向药物,提供了候选分子。
- 毛圆张大为曹清唐小军林红陈仁杰徐凛峰冯振卿
- 关键词：噬菌体抗体库EB病毒潜伏膜蛋白1靶向治疗
- 腹腔镜胆囊切除术后梗阻性黄疸被引量：3
- 2004年
- 目的探讨LC术后早期非损伤性梗阻性黄疸的病因、机制和处理。方法回顾总结2000年5月～2002年5月施行的LC术412例,其中4例术后早期发生非损伤性梗阻性黄疸;复习国内1997年10月～2001年10月部分1000例以上LC术的大宗报道,共计51 444例。结果LC术后非损伤性梗阻性黄疸43例(该组4例及文献报道39例),其中胆道残留结石36例,胆管炎2例,胆管癌1例,Oddi括约肌功能不良1例及原因不明3例。1例Oddi括约肌功能不良导致术后早期梗阻性黄疸属国内首例报道。结论非损伤性梗阻性黄疸是LC术的少见并发症,主要原因是胆道残留结石(占83.7%)。非结石性病因罕见却是临床诊断和治疗的难点。对此类并发证应首选ERCP明确诊断,同时在内镜下作必要的处理。
- 张建平何震宇徐凛峰范志林
- 关键词：LC术术后并发症
- 腹腔镜与开腹脾切除断流术的临床对比研究被引量：8
- 2008年
- 目的比较腹腔镜和开腹手术(open splenectomy,OS)治疗门脉高压症脾切除断流术的近期临床效果。方法回顾分析2003年1月～2007年12月腹腔镜脾切除术(laparoscopic splenectomy,LS)断流术14例和同期开腹脾切除断流术18例的临床资料。结果腹腔镜组的平均手术时间明显长于开腹组(205minvs.152min,P<0.05),而术中出血量(620mLvs.915mL)、术后腹腔总引流量(910mLvs.1445mL)、排气时间(77hvs.97h)、术后住院时间(12dvs.16d)均明显减少(P<0.05),术后肝功能、并发症发生率、住院总费用差异均无统计学意义(P>0.05)。结论腹腔镜脾切除断流术的近期效果明显优于传统开腹手术,且安全可行,具有微创的优越性。
- 许利剑汪宝林张建平赵庆宏徐凛峰
- 关键词：腹腔镜脾切除术断流术
- miR-335启动子活性鉴定及药物干预
- 2015年
- 目的：探讨miR-335上游片段是否具有转录活性以及罗格列酮和胰岛素对miR-335启动子区域转录活性的影响。方法：利用PCR技术克隆位于MEST内含子中miR-335上游区域的不同片段,采用双荧光素酶报告基因系统鉴定其转录活性。使用1μmol/L的罗格列酮及不同浓度的胰岛素进行干预并观察转录活性有无变化。结果：不同的miR-335启动子区域转录活性不同,在miR-335上游约600个碱基区域活性最高。未使用药物干预组细胞中,miR-335启动子区域活性的表达与基础值相比差异无统计学意义（P〉0.05）;使用1μmol/L罗格列酮干预后,miR-335启动子区域活性显著升高（P〈0.01）,使用10~12 mol/L的胰岛素干预时,启动子活性升高,但当胰岛素浓度上升后,启动子活性变化并没有统计学差异。结论：miR-335上游约600个碱基为启动子关键区域,同时,miR-335有可能通过自身的转录调控机制参与肥胖与胰岛素抵抗的发生发展。
- 陈璇朱璐徐凛峰汪悦
- 关键词：启动子罗格列酮胰岛素
- 全人源抗Met双价抗体的制备与特性分析
- 2008年
- 目的以抗HGF受体Met特异性的全人抗体Fab基因为模板,合成并表达双价抗体Diabody。方法以天然抗体库中筛选出的Fab基因为模板,分别扩增抗体的重链可变区与轻链可变区基因,经重叠拼接合成Diabody基因,克隆于原核表达载体pBAD/gⅢA中表达。在不同的培养条件下,阳性克隆经IPTG诱导表达,ELISA、SDS-PAGE、Western-blot和细胞免疫荧光分析。结果培养基成分和诱导剂的浓度对目的蛋白的表达未见有明显的影响,低温诱导能够促进可溶性蛋白的产生;但电泳与印迹分析表明,在29kD出现预期大小蛋白条带。双价抗体经表达、变性与复性和IMAC亲和纯化后,用细胞免疫荧光分析表明,Diabody能够与S114细胞表达Met的胞外区特异性结合。结论本研究制备的双价抗体能够与其抗原特异性结合,该抗体有望与其他抗体分子结合,制备双特异性抗体,为肿瘤临床诊断或治疗提供候选分子。
- 徐凛峰朱进唐奇张大为曹伯良管晓虹
- 关键词：抗肿瘤药原癌基因蛋白质C-MET抗体
- 白虎二地汤改善2型糖尿病大鼠胰岛素抵抗分子机制的研究被引量：20
- 2015年
- 目的研究白虎二地汤对实验性2型糖尿病(T2DM)胰岛素抵抗大鼠炎症信号通路的影响,并探讨其机制。方法采用高糖高脂饲料喂养联合低剂量链脲佐菌素(STZ)腹腔注射建立T2DM胰岛素抵抗大鼠模型,将大鼠分为正常对照组、模型组、罗格列酮组、白虎二地汤高、低剂量组。连续给药6周后,观察其空腹血糖(FBG)、空腹胰岛素(FINS)、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)、肿瘤坏死因子?α(TNF?α)、白介素-6(IL-6)的变化,采用Western blot法检测大鼠骨骼肌组织IRS-1、p-IRS-1和PI3Kp85蛋白的表达。结果白虎二地汤高剂量组可明显降低2型糖尿病大鼠FBG、FINS、HOMA-IR、TNF?α、IL-6(P<0.05),使骨骼肌组织IRS-1和p-IRS-1蛋白表达量降低,PI3Kp85蛋白的表达量升高。结论白虎二地汤可以改善STZ诱导的T2DM胰岛素抵抗大鼠炎症反应,减轻胰岛素抵抗。其可能的机制是通过炎症信号通路,减轻炎症反应,提高肌肉组织PI3K蛋白的表达,从而减弱外周胰岛素抵抗。
- 陈璇徐凛峰汪悦周方圆何晓瑾
- 关键词：胰岛素抵抗IRS-1PI3K
- 电凝钩在困难的腹腔镜胆囊切除术中解剖胆囊三角的体会被引量：10
- 2003年
- 张建平张熙容徐凛峰
- 关键词：电凝钩胆囊三角腹腔镜胆囊切除术
