徐朝伟
- 作品数：3 被引量：9H指数：2
- 供职机构：温州医学院附属第一医院更多>>
- 发文基金：浙江省科技厅基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 骨髓间充质干细胞对实验性自身免疫性重症肌无力大鼠的治疗作用
- 目的探讨骨髓间充质干细胞(BMSCs)对实验性自身免疫性重症肌无力(EAMG)大鼠模型的治疗作用及其可能机制。方法全骨髓贴壁筛选法分离培养Lewis大鼠BMSCs,流式细胞仪检测其表面分子CD34、CD44的表达,将Le...
- 付裕滕银燕徐朝伟张旭
- 文献传递
- 骨髓间充质干细胞对实验性自身免疫性重症肌无力大鼠的治疗作用被引量：6
- 2012年
- 目的探讨骨髓间充质干细胞对实验性自身免疫性重症肌无力大鼠模型的治疗作用及其可能机制。方法全骨髓贴壁筛选法分离培养Lewis大鼠骨髓间充质干细胞,流式细胞术检测其表面分子CD34、CD44的表达。经Lewis大鼠尾静脉注射经体外培养至第3代的骨髓间充质干细胞,7d后腹腔注射抗乙酰胆碱受体单克隆抗体(mAb35)建立实验性自身免疫性重症肌无力动物模型,按照Lennon评分标准进行临床症状评分、Western blotting法检测肌肉组织中乙酰胆碱受体蛋白表达、流式细胞术检测外周血CD4+CD25+T细胞比率、酶联免疫吸附试验检测血清转化生长因子-β、干扰素-γ和IL-4表达变化。结果与生理盐水对照组相比,注射骨髓间充质干细胞的实验性自身免疫性重症肌无力大鼠模型临床评分降低(t=8.062,P=0.000),乙酰胆碱受体α蛋白表达水平升高(t=8.092,P=0.000);同时血清转化生长因子-β表达水平升高(t=9.859,P=0.000),干扰素-γ(t=9.040,P=0.000)和IL-4(t=3.320,P=0.004)表达水平降低,两组之间差异均有统计学意义(P<0.05)。结论骨髓间充质干细胞能够显著减轻实验性自身免疫性重症肌无力大鼠模型临床症状,减少乙酰胆碱受体缺失。其作用机制可能与分泌免疫抑制性细胞因子转化生长因子-β上调CD4+CD25+调节性T细胞表达水平,以及抑制炎性促进因子干扰素-γ和IL-4的分泌有关。
- 付裕滕银燕徐朝伟张旭
- 关键词：间质干细胞移植骨髓移植
- 胰酶限时消化在嗅鞘细胞培养中的运用被引量：3
- 2011年
- 目的探索出一套高效、实用的大鼠嗅球嗅鞘细胞(OECs)的培养和纯化方案。方法分离SD大鼠嗅球的外两层组织,剪切消化成细胞悬液进行接种。采用3种方法进行OECs的培养和纯化:(1)A组分别经6h、24h两次差速贴壁去除杂质细胞,培养至12d左右消化重悬细胞进行爬片分析。(2)B组分别经6h、24h两次差速贴壁去除杂质细胞,培养至12d左右经胰酶限时消化,留成纤维细胞于瓶壁,重悬的细胞进行爬片分析。(3)C组采用经典的Nash法(分别经18h、36h两次差速贴壁去除杂质细胞),培养至11d左右消化重悬细胞进行爬片分析。采用NGFRP75与碘化丙啶(PI)双染的方法进行OECs的鉴定和纯度分析。结果在共聚焦显微镜下呈双染阳性的细胞为OECs,OECs多数突起细长,呈双极或三极,少量呈单极或多极。A、B、C组所纯化的OECs纯度分别为(67.3±6.2)%、(83.7±7.7)%和(74.6±9.5)%,3组间比较有统计学差异(F=13.633,P<0.01),B组所得OECs纯度均较另两组高(P<0.05)。结论经6h、24h两次差速贴壁+胰酶限时消化可以获得较高纯度的OECs,能够满足动物实验的需要。
- 徐朝伟李佳付裕周瑞瑞张旭
- 关键词：嗅鞘细胞细胞培养技术差速贴壁
