徐桂月
- 作品数：12 被引量：38H指数：4
- 供职机构：吉林大学白求恩医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金吉林省杰出青年科学基金吉林省科技厅资助项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- ActRⅡA在小鼠巨噬细胞中的表达被引量：3
- 2003年
- 目的 克隆、表达重组融合蛋白ActRⅡA的C末端肽 ,制备抗ActRⅡAC末端抗体 ,并检测其在小鼠巨噬细胞中的表达。方法 构建GST ActRⅡAC末端蛋白表达质粒 ,经SDS PAGE分析表达蛋白。以GST ActRⅡAC末端蛋白为抗原免疫家兔制备抗ActRⅡAC抗体 ,采用免疫细胞化学染色技术观察ActRⅡA在巨噬细胞的分布。结果 克隆得到的ActRⅡAC末端cDNA ,经DNA测序证实所克隆的cDNA与GenBank收录的ActRⅡAC末端基因序列完全相符。SDS PAGE分析表达的GST ActRⅡAC蛋白相对分子质量约为 3 70 0 0。采用亲和层析纯化的抗ActRⅡAC末端抗体进行免疫细胞化学染色显示 ,ActRⅡA在小鼠巨噬细胞中高水平表达。结论 已成功地构建了ActRⅡAC末端表达质粒 ,制备了抗ActRⅡAC末端抗体并证实小鼠巨噬细胞表面存在ActRⅡA。
- 劳凤学柳忠辉张学军于春雷徐桂月李一
- 关键词：基因表达重组融合蛋白
- 重组人FS315C末端蛋白表达及其抗体制备被引量：2
- 2005年
- 构建FS315C末端肽原核表达载体pGEX-FS315C,表达重组人卵泡抑素315(FS315)C末端肽,制备抗FS315C末端抗体。实验结果显示,重组pGEX-FS315C表达质粒在E.coli BL21中高表达GST-FS315C融合蛋白,采用亲和层析与电泳纯化GST-FS315C免疫家兔,获得抗FS315C末端抗体,Western blot检测显示该抗体只与FS315结合,而与FS288无交叉反应。ELISA检测显示抗FS315C末端抗体与FS315特异结合,而与FS288、inhibin及activin A等蛋白均无交叉反应。利用该抗体进行的免疫组化染色显示巨噬细胞FS表达阳性,与以往报道一致。实验采用重组GST-FS315C免疫家兔,成功地制备了抗FS315C末端特异抗体。
- 杨煜劳凤学高振平徐桂月张鹏宇柳忠辉
- 关键词：GST融合蛋白抗体抗体制备蛋白表达原核表达载体E.COLI
- 重组Lin-7蛋白的表达
- 2002年
- 目的 :表达具有 PDZ功能区的 Lin- 7蛋白 ,并制备抗 Lin- 7蛋白的特异性抗体。方法 :采用质粒构建表达重组 GST- Lin- 7蛋白 ,SDS- PAGE分析表达蛋白 ;以 GST- Lin- 7蛋白为抗原免疫家兔 ,制备抗 Lin- 7多克隆抗体 ,ELISA法检测抗体特异性。结果 :重组 GST- Lin- 7蛋白呈分泌型表达于胞浆内 ;制备的抗 Lin- 7抗体与 GST、ARIPs等蛋白无交叉反应。结论 :成功地构建了 Lin- 7蛋白表达质粒 ,并制备了抗 Lin- 7的特异性抗体。
- 杨煜董辉董辉劳凤学徐桂月张学军
- 关键词：基因表达抗体
- 激活素受体相互作用蛋白3的基因克隆及其免疫学特性研究被引量：8
- 2006年
- 目的:研究新克隆的激活素受体相互作用蛋白3(ActR IP3)的免疫学特性和其介导Ser/Thr激酶型受体胞内信号传导的作用。方法:以酵母双杂交法发现的ActR IP基因片段作为探针,从小鼠脑cDNA文库中克隆ActR IP3基因。EIA法分析其与激活素ⅡA型受体(ActRⅡA)结合能力,W estern b lot杂交检测成熟蛋白在组织中的表达,免疫组化染色分析其在脑组织中的分布,采用pcDNA-ActR IP3与CAGA-lux报告基因质粒共转染HEK293细胞分析信号传导作用。结果:克隆的Ac-tR IP3基因全长1 197 bp,编码101个氨基酸残基,EIA分析显示ActR IP3与ActRⅡA具有特异性结合作用,这种作用与Ac-tR IP3的N末端氨基酸序列有关。W estern b lot杂交显示天然ActR IP3相对分子质量约为14 000,在多种组织表达,免疫组化染色显示其在脑组织中的分布以海马及下丘脑为主。通过表达ActR IP3可促进激活素诱导的特异性基因转录活性。结论:ActR IP3属于ActR IP家族新成员,具有特异结合ActRⅡA的能力,并具有促进激活素信号传导的作用。
- 徐桂月张鹏宇王奭骥台桂香劳凤学杨煜崔雪玲柳忠辉
- 关键词：受体相互作用蛋白信号传导免疫组化
- 激活素A对RAW264.7巨噬细胞活性的调节作用被引量：15
- 2006年
- 目的探讨激活素A对参与炎症反应的小鼠巨噬细胞活性调节作用。方法以LPS刺激活化的小鼠巨噬细胞系RAW264.7细胞作为阳性参照,ELISA法检测激活素A及LPS刺激的小鼠腹腔巨噬细胞系RAW264.7细胞IL-1β分泌水平,还原酶法分析NO分泌水平,RT-PCR检测IL-1β和iNOS mRNA的表达,瑞氏染色检测RAW264.7细胞吞噬活性。结果在激活素A刺激下RAW264.7细胞IL-1β和NO分泌水平均明显升高,IL-1β和iNOS mRNA表达亦增加,巨噬细胞吞噬活性增强;激活素A和LPS共刺激RAW264.7细胞时,激活素A明显抑制LPS刺激的RAW264.7细胞IL-1β和NO产生水平,以及IL-1β和iNOSmRNA表达,巨噬细胞吞噬活性也明显低于LPS单独刺激组。结论激活素对巨噬细胞的活性调节具有双重作用,这种作用与巨噬细胞的激活状态有关。
- 张鹏宇王世瑶霍德胜徐桂月张学军柳忠辉
- 关键词：RAW264.7激活素ALPSIL-1Β一氧化氮
- 激活素受体相互作用蛋白3的基因克隆及其特性研究
- 激活素（Activin）属于转化生长因子-β（TGF-β）超家族成员的多功能生长和分化因子，分布广泛，从胚胎形成到机体成熟的整个生命过程均发挥重要的作用。最新的研究揭示，激活素与其Ⅱ型受体结合后，并非直接激活下游信号传导...
- 徐桂月
- 关键词：激活素受体相互作用蛋白基因克隆BLOT免疫沉淀NORTHERN
- 文献传递
- 新的激活素受体相互作用蛋白3的基因克隆及其特性研究
- 柳忠辉台桂香崔雪玲杨煜徐桂月王奭骥张红军杨清王世瑶方琳
- 为了研究激活素受体和胞浆蛋白的相互作用，该项目从小鼠脑cDNA文库中克隆了一个新的激活素受体相互作用蛋白3（ActRIP3）基因，并对其功能区及免疫学特性进行研究，探讨其在细胞中的信号传导作用。结论显示：ActRIP3属...
- 关键词：
- 关键词：激活素受体相互作用蛋白基因克隆
- 激活素A对小鼠巨噬细胞分泌IL-1β的影响被引量：6
- 2005年
- 目的:探讨激活素A对小鼠腹腔巨噬细胞活性的调节作用及其机制。方法:免疫组化观察激活素ⅡA型受体(ActRⅡA)在巨噬细胞上的表达,ELISA法检测小鼠腹腔巨噬细胞培养上清中IL-1β分泌水平,采用RT-PCR检测小鼠腹腔巨噬细胞IL-1βmRNA、ActRⅡAmRNA及激活素受体相互作用蛋白2(ActRIP2)mRNA的表达。结果:激活素A可以促进原代培养小鼠腹腔巨噬细胞分泌IL-1β及IL-1βmRNA表达,并呈剂量依赖关系;激活素A对LPS活化的小鼠原代培养腹腔巨噬细胞分泌IL-1β及IL-1βmRNA的表达具有抑制作用,并呈剂量依赖关系。免疫组化染色证实ActRⅡA在巨噬细胞中高表达,激活素A对巨噬细胞表达ActRⅡAmRNA具有促进作用,采用抗ActRⅡA抗体可以阻断激活素A促进IL-1βmRNA表达作用,进一步检测表明激活素作用后ActRIP2mRNA表达亦增加。结论:激活素与LPS比较可能是IL-1分泌的弱激动剂,激活素单独应用显示刺激IL-1分泌作用,而与LPS共同作用,则呈现抑制LPS强刺激作用;激活素可能通过ActRIIA-ActRIP2受体信号传导途径,调控巨噬细胞IL-1β分泌与合成。
- 张学军崔雪玲劳凤学徐桂月王奭骥杨煜台桂香柳忠辉
- 关键词：激活素A巨噬细胞RT-PCRIL-1Β
- 卵泡抑素分泌调控机制及其酶联免疫测
- 柳忠辉杨煜汪丽李一台桂香徐桂月王奭骥王东辉于春雷崔雪玲
- Follistatin(FS，卵泡抑素/卵泡休止素)具有抑制垂体促性腺激素(FSH)分泌、特异结合激活素(Activin)等作用，在体内主要以FS315和FS288二种形式存在。为了探讨FS的生理和病理学意义，该研究通过...
- 关键词：
- 关键词：卵泡抑素酶联免疫检测特异性单克隆抗体生殖生理
- 激活素受体相互作用蛋白在海马神经细胞中的表达及其作用被引量：1
- 2005年
- 目的 在发现和克隆新的激活素受体相互作用蛋白 3(ActRIP3)基因的基础上 ,探讨ActRIP3在海马神经细胞介导激活素信号传导的作用。方法 利用GST- ActRIP3融合蛋白免疫家兔制备抗ActRIP3抗体 ,采用RT -PCR及免疫组化染色分析ActRIP3在脑组织中的表达与分布 ,采用pcDNA-ActRIP3与CAGA -lux质粒共转染海马神经细胞 ,分析信号传导作用。结果RT- PCR及免疫组化染色显示ActRIP3在海马神经细胞中高表达 ,构建的pcDNA- ActRIP3表达载体在体外培养海马神经细胞中可有效表达ActRIP3蛋白 ,过表达ActRIP3可促进激活素诱导的海马神经细胞特异信号传导。结论 ActRIP3具有促进激活素信号传导作用 ,是介导激活素作用于海马神经细胞的关键性信号传导蛋白。
- 台桂香徐桂月张鹏宇劳凤学王奭骥崔雪玲杨煜土田邦博柳忠辉
- 关键词：海马神经细胞激活素信号传导相互作用蛋白免疫组化染色融合蛋白
