- 抑癌基因NDRG2对人结肠癌细胞系Caco-2增殖的影响被引量：2
- 2013年
- 目的:采用重组慢病毒系统,在过表达和抑制NDRG2(N-myc downstream regulated gene 2)基因后,检测人结肠癌细胞系Caco-2的增殖情况。方法:分别采用NDRG2过表达慢病毒载体pLenti6-NDRG2和NDRG2干涉慢病毒载体pLKO.1-shNDRG2制备病毒并感染Caco-2细胞,经14天耐药的筛选,获得稳定感染的细胞株;采用Real time RT-PCR和Western blot方法明确NDRG2在稳转细胞株中的表达情况,同时采用MTT方法检测细胞的增殖能力,通过流式细胞仪检测细胞周期变化情况。结果:Real time RT-PCR和Western blot结果表明,在慢病毒pLenti6-NDRG2稳定感染的Caco-2细胞中,NDRG2表达上调;pLKO.1-shNDRG2稳定感染的Caco-2细胞中,NDRG2的表达下调。MTT实验结果表明,NDRG2过表达细胞株中细胞的增殖能力下降,而pLKO.1-shNDRG2慢病毒感染Caco-2后细胞的增殖能力明显增加;流式细胞术结果显示,过表达NDRG2使Caco-2细胞在G0/G1期细胞增多而S期的细胞减少,抑制细胞内源性NDRG2后G0/G1期细胞减少而S期细胞增多。结论:通过过表达和抑制NDRG2基因,验证了NDRG2作为抑癌候选基因能够有效抑制结肠癌细胞Caco-2的增殖。
- 李剑英吴琳徐欣元张健沈岚
- 关键词：NDRG2慢病毒增殖
- 肿瘤代谢重编程中的癌基因与抑癌基因被引量：3
- 2016年
- 目前对肿瘤特有的代谢模式的认识日益广泛深入,尤其是肿瘤细胞代谢重编程的过程和机制受到关注。癌基因与抑癌基因在影响肿瘤发生发展的过程中也不断改变着肿瘤的物质代谢途径和流量,使之适应肿瘤生长需求。本文讨论c-MYC、TP53、HIF-1α等癌基因或抑癌基因及其相关通路在肿瘤代谢重编程中的作用。
- 徐欣元沈岚药立波
- 关键词：肿瘤癌基因抑癌基因
- 抑癌基因NDRG2对人结肠癌细胞系DLD-1丙酮酸脱氢酶(PDH)的表达和有氧氧化代谢的调节被引量：1
- 2015年
- 目的:采用重组慢病毒系统,通过过表达和RNA干涉的方法分别增加和降低NDRG2(N-Myc downstream regulated gene 2)基因后,检测人结肠癌细胞系DLD-1中丙酮酸脱氢酶(PDH)的表达水平及氧消耗率(OCR)。方法:分别采用表达NDRG2慢病毒载体p Lenti6-NDRG2和NDRG2 shRNA慢病毒载体p LKO.1-sh NDRG2制备病毒载体并感染DLD-1细胞,经两周耐药筛选,获得稳定感染的细胞株。采用Real-time PCR和Western blot的方法明确NDRG2在稳定感染细胞株中的表达情况,再使用上述方法检测稳定感染细胞株中PDH的表达水平,最后,通过Seahorse能量呼吸代谢仪,检测稳定感染细胞株中的OCR。结果:Realtime PCR和Western blot结果表明,在慢病毒p Lenti6-NDRG2稳定感染的DLD-1细胞中,NDRG2表达上调,PDH表达上调;p LKO.1-sh NDRG2稳定感染的DLD-1细胞中,NDRG2的表达下调,PDH表达下调。Seahorse结果表明,NDRG2过表达细胞株中细胞的OCR上升,而NDRG2 RNA干涉细胞株中细胞的OCR明显下降。结论:通过过表达和抑制NDRG2基因,证实了NDRG2作为抑癌候选基因能够有效促进结肠癌细胞系DLD-1中丙酮酸脱氢酶PDH的表达,并促进有氧氧化。
- 徐欣元雷世雄沈岚
- 关键词：NDRG2PDHOCR
