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徐永强

作品数：9 被引量：26H指数：3
供职机构：军事医学科学院生物工程研究所更多>>
发文基金：国家高技术研究发展计划更多>>
相关领域：医药卫生生物学更多>>

合作作者

文献类型

  • 9篇中文期刊文章

领域

  • 8篇医药卫生
  • 2篇生物学

主题

  • 5篇痢疾
  • 5篇痢疾杆菌
  • 4篇志贺氏痢疾杆...
  • 3篇志贺氏菌
  • 3篇基因
  • 2篇同源
  • 2篇同源重组
  • 2篇免疫
  • 2篇免疫保护
  • 2篇免疫保护作用
  • 2篇克隆
  • 2篇基因表达
  • 2篇减毒株
  • 1篇单核
  • 1篇单核细胞
  • 1篇蛋白
  • 1篇多克隆
  • 1篇疫苗
  • 1篇直接注射
  • 1篇志贺氏菌属

机构

  • 9篇军事医学科学...
  • 1篇中国人民解放...
  • 1篇解放军第30...

作者

  • 9篇徐永强
  • 9篇苏国富
  • 7篇黄翠芬
  • 7篇芮贤良
  • 2篇叶棋浓
  • 2篇李丰生
  • 2篇黄培堂
  • 2篇刘英杰
  • 1篇王恒梁
  • 1篇隋拥君
  • 1篇张述
  • 1篇鲍云华
  • 1篇王红

传媒

  • 2篇生物工程学报
  • 1篇生物技术通讯
  • 1篇中国科学（C...
  • 1篇传染病信息
  • 1篇Journa...
  • 1篇中国生物化学...
  • 1篇武警医学
  • 1篇生物化学杂志

年份

  • 1篇1999
  • 1篇1998
  • 1篇1997
  • 1篇1996
  • 3篇1995
  • 1篇1993
  • 1篇1989
共 9 条 记 录，以下是 1-9
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排序方式：
稳定、无抗药的痢疾福氏2a和宋内双价菌苗候选株的构建被引量：10
1996年
通过体内外基因重组,将大肠杆菌粘附因子cs3基因定位整合到痢疾杆菌福氏2a疫苗株T32菌染色体的asd基因内,使asd基因灭活;将来内O抗原基因克隆至无抗药性表达载体pXL378,获得重组质粒pXL390,将其转化asd-的T32受体菌,构建成福氏2a和宋内双价苗苗株FS01。实验表明:重组质粒pXL390在不带任何抗菌素基因的情况下,在asd-的T32受体菌内是稳定的。FS01株遗传稳定,能表达两种痢疾菌的PLS-O抗原,无明显毒性作用。动物试验表明,以FS01株皮下免疫的小鼠对福氏2a和宋内有毒株的腹腔攻击有100％的保护。
芮贤良徐永强王红苏国富黄翠芬
关键词：志贺氏痢疾杆菌痢疾
以融合蛋白形式在大肠杆菌中表达人MCP－1被引量：2
1995年
将编码人单核细胞趋化蛋白－１（ＭＣＰ－１）的基因亚克隆到大肠杆菌表达载体ｐＥＸ３１Ａ中，在大肠杆菌中表达出ＭＳ２／ＭＣＰ－１融合蛋０白，该表达产物约占菌体总蛋白的１５％左右，Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ检测表明，表达产物可与ＭＣＰ－１抗体特异反应。采用琼脂糖平板法进行活性测定表明，表达产物具有明显的单核细胞趋化活性，说明Ｎ端融合一段细菌蛋白对ＭＣＰ－１有无趋化活性可能没有影响。
叶棋浓苏国富徐永强黄翠芬
关键词：单核细胞趋化蛋白-1融合蛋白基因表达
志贺氏毒素B亚单位基因的克隆与表达及其免疫保护作用的研究
1995年
本研究首次从野生的志贺氏Ⅰ型痢疾杆菌(简称志Ⅰ)克隆了志贺氏毒素基因,其表达量为野生株的16倍。经次级克隆获得无毒性而有保护作用的志贺氏毒素 B 亚单位在大肠杆菌的高效表达,B 亚单位被纯化至电泳纯,分别制备了 B 亚单位特异的多克隆和单克隆抗体,其研究深度达国际先进水平。对 B 亚单位作为口服苗的一系列条件进行深入研究,分别将 B 亚单表达在细胞周质、细胞表面、分泌至胞外和与 LacZ 融合,观察哪一种表达方式在小鼠内引起更好的免疫反应;采用了四种不同的启动子和二种克隆载体,探索了哪一类启动子和克隆载体适用于构建口服苗。结果表明,中等强度、不需诱导和体内诱导的启动子和
苏国富徐永强李丰生芮贤良黄培堂黄翠芬
关键词：克隆载体多克隆免疫保护作用痢疾杆菌表达量
志贺氏福氏5型菌外膜蛋白ipa BC基因的高效表达及其免疫保护作用的研究
1993年
芮贤良徐永强苏国富黄培堂李丰生罗素英黄翠芬
关键词：外膜蛋白免疫保护基因表达
利用宿主-载体平衡致死系统构建志贺氏菌3价疫苗候选株被引量：8
1997年
选择福氏2a志贺氏菌疫苗株T32为受体菌,通过基因同源重组交换技术,对其染色体asd基因进行定位突变,使之不能在LB培基上生长;同时利用链球菌asd基因构建Asd^+的无抗药性互补载体,两者组成1套T32宿主载体平衡致死系统.进一步应用该系统克隆和表达了具有重要免疫保护功能的宋内I相O抗原基因和志贺氏毒素B亚单位基因(stxB),构建成福氏2a-宋内-StxB3价菌苗候选株FSD0l.结果显示:该菌株遗传稳定,重组质粒不需用抗生素选择,能有效表达3价抗原和产生针对上述3种野生型毒株的免疫保护反应.
芮贤良徐永强吴旭东苏国富黄翠芬
关键词：志贺氏痢疾杆菌疫苗
福氏2a志贺氏菌△aroA突变减毒株的构建被引量：5
1998年
志贺氏菌芳香族氨基酸合成酶基因缺陷能够使菌体明显减毒，并有可能成为新一代痢疾疫苗．用ＰＣＲ技术从野生型福氏２ａ志贺氏菌２４５７Ｔ中克隆出ａｒｏＡ基因，在体外进行精确的缺失突变，并通过体内同源重组，构建成△ａｒｏＡ突变体ＲＳ４２６．实验结果表明，这种突变体仍保持了侵袭能力和保护性Ｏ抗原的表达，但其毒力已明显降低，不能产生豚鼠角结膜炎，小鼠半数致死量明显提高．免疫保护试验显示，ＲＳ４２６可在小鼠中产生对福氏２ａ野生菌１００％的保护作用．
刘英杰芮贤良徐永强赵海峰苏国富黄翠芬
关键词：志贺氏痢疾杆菌同源重组
克隆与志贺氏菌属侵袭力相关的基因被引量：1
1989年
本文以柯斯质粒pJB8作载体,经体外包装构建了志贺氏菌属弗氏5大质粒(140Md)基因文库,获得重组子4000多个。用已证实与侵袭力相关的17kb基因片段作探针,从基因文库中筛选出66个相应的重组子。对其中部分重组子进行分析,表明这些重组子均包含一个大的重组质粒,它们与17kb探针杂交呈阳性反应。当用EcoR 1酶解这些重组质粒时,均产生大小相当于17kb的DNA片段,它们与17 kb探针杂交,也呈阳性反应。表明这些重组子均含与侵袭相关的基因片段。这为以后构建预防痢疾的口服活菌苗打下了基础。
苏国富徐永强黄翠芬
关键词：克隆志贺氏菌属基因文库重组子
志贺氏菌芳香族氨基酸缺陷减毒株的构建被引量：1
1999年
目的构建一种新型痢疾疫苗，使其较完整地保留保护性抗原，又不致丧失其侵袭力。方法用PCR技术从野生型福氏2a志贺氏菌2457T中克隆出aroA基因，在体外进行精确的缺失突变，并通过体内同源重组，构建成ΔaroA突变体RS426。结果这种突变体仍保持了侵袭能力和保护性O抗原的表达，但其毒力已明显降低，不能产生豚鼠角结膜炎，小鼠半数致死量明显提高。结论免疫保护试验显示，RS426可在小鼠中产生对福氏2a野生菌100％的保护作用。
刘英杰芮贤良徐永强苏国富
关键词：志贺氏痢疾杆菌同源重组细菌性痢疾
rhGM-CSF cDNA直接注射小鼠骨骼肌的体内表达研究被引量：2
1995年
本实验将含有人粒-巨噬细胞集落刺激因子(hGM-CSF)基因cDNA的重组真核表达质粒直接注射小鼠骨骼肌,观察了hGM-CSF基因在小鼠体内的分泌表达情况。ELISA结果显示注射重组质粒DNA后,第15天左右小鼠血液hGM-CSF的表达量最高,约有97 ng/ml,第20天次之,第25天和第10天的表达量相近,约有49 ng/ml。生物学活性检测结果表明,实验组小鼠血液有维持TF-1依赖株细胞的生长作用。表明重组质粒DNA直接注射骨骼肌不仅能表达hGM-CSF,而且表达产物有生物学恬性。
张述苏国富鲍云华芮贤良叶棋浓隋拥君王恒梁徐永强
关键词：HGM-CSF骨骼肌
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