施孟如
- 作品数：36 被引量：119H指数：6
- 供职机构：温州医科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金浙江省中医药管理局科研基金浙江省科技厅创新团队建设与人才培养项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学哲学宗教更多>>
- 肺癌性与结核性胸腔积液蛋白质组的差异被引量：2
- 2011年
- 目的:建立肺癌性胸腔积液与结核性胸腔积液的双向电泳图谱,分析二者蛋白质表达的差异和特点。方法:以固相pH梯度等电聚焦为第一向,垂直板SDS-PAGE为第二向分离胸水蛋白质,银染显色,扫描仪获取凝胶图像并对其进行软件分析。应用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)鉴定差异蛋白质。结果:双向电泳结果显示,肺癌性胸腔积液中表达增高2倍的差异蛋白点52个,降低50%的蛋白质点60个。有9个点仅在结核性胸腔积液表达,11个点仅在肺癌胸腔积液中表达,并通过肽指纹图分析成功鉴定了6个蛋白质。结论:肺癌性胸腔积液组与结核性胸腔积液组的双向电泳结果显示蛋白表达图谱有明显差异,这些差异蛋白可能是肺癌相关蛋白或肺癌特异性蛋白标志物。
- 林全施孟如王良兴金旭如
- 关键词：胸腔积液肺肿瘤蛋白质组学
- 低氧对大鼠肺动脉平滑肌细胞骨架微丝影响的激光共聚焦显微观察被引量：1
- 2011年
- 目的:观察低氧对大鼠肺动脉平滑肌细胞(pulmonary arterial smooth muscle cells,PASMCs)骨架微丝的影响。方法:采用胶原酶Ⅰ消化法原代培养PASMCs,免疫荧光法进行平滑肌α肌动蛋白(α-SM actin)鉴定。然后分别低氧(5%O2,5%CO2)培养2、6、12、24 h后,用鬼笔环肽标记细胞骨架F-actin,用激光共聚焦显微镜观察F-actin的变化。结果:免疫荧光鉴定结果表明培养细胞为PASMCs,低氧状态和常氧条件下培养的PASMCs形态上有明显区别,低氧组细胞骨架蛋白F-actin发生重排,微丝排列混乱,存在时间依赖性。结论:低氧能造成PASMCs形态的改变和细胞骨架微丝的重排。
- 郑易施孟如林全楼永良
- 关键词：低氧肺动脉平滑肌
- 温补肾阳药对丙基硫氧嘧啶引起肾阳虚大鼠肝线粒体蛋白质组的影响
- 目的:中医的肾在五脏中居主要地位,被喻为先天之本,生命之源,人体各脏器的调节中心。肾阳虚证是指由于肾阳虚衰,温煦失职,气化失权所表现的一类虚寒证候。许多学者认为肾阳虚与神经-内分泌紊乱有关,肾阳虚病人垂体-肾上腺皮质功能...
- 沃兴德卢德赵李毅唐利华沃立科施孟如杨贞
- 关键词：蛋白质组肾阳虚温补肾阳药线粒体
- 文献传递
- 红树植物秋茄ISSR条件的优化
- 2012年
- 目的:探讨红树植物秋茄简单序列重复区间扩增多态性分子标记(ISSR-PCR)分析的最优条件,以获得清晰、重复性好的简单序列重复区间扩增多态性(ISSR)扩增结果。方法:对ISSR-PCR多个条件中的单个条件包括DNA的提取、模板浓度、Taq酶的选择与用量、Mg2+和三磷酸脱氧核糖核苷酸(dNTP)浓度等进行了比较、优化。结果:从单条件中得出每个条件的最优条件,从而获得清晰、重复性高的电泳图谱。结论:秋茄ISSR-PCR分析最适宜的扩增条件为:25μL PCR反应体积中,0.75～1.0 U Taq DNA聚合酶,0.8μmol/L引物,0.2 mmol/L dNTP,2.0～2.5 mmol/L MgCl2,40 ng/μL模板DNA。
- 章宏琼杨娟周云宋佳楠朱忆思梦施孟如张洪勤
- 关键词：红树科秋茄
- 葛根素治疗肺动脉高压大鼠的26S蛋白酶体变化研究
- 2016年
- 目的观察葛根素用药后大鼠肺组织蛋白质组学的变化并探讨葛根素抑制肺动脉高压、肺血管重建的机制。方法制备各组模型大鼠后分别测定平均肺动脉压力(mPAP)、平均颈动脉压力(mCAP)、右心室重量比RV/(LV+S)%,制作光镜标本、测量肺血管重建指标(PAMT)及统计学分析,明确模型制备成功。对各组肺动脉组织提出的总蛋白质进行双向电泳,串联质谱鉴定有差异的蛋白质及NCBInr数据库检索。对鉴定的蛋白质进行分析。结果在葛根素组,26S蛋白酶体较肺动脉高压组表达显著下降,可能与其抑制肺动脉高压机制有关。结论葛根素可通过26s蛋白酶体抑制肺动脉高压、肺血管重建与右心室肥大。
- 吴军王金丹施孟如马可
- 关键词：葛根素肺动脉高压26S蛋白酶体
- 慢性低O_2高CO_2肺动脉高压大鼠右心室骨桥蛋白及其整合素β 3受体mRNA表达的变化
- 2006年
- 目的:观察慢性低O2高CO2肺动脉高压大鼠右心室心肌骨桥蛋白(OPN)及其整合素β3受体基因表达变化与右心室重塑的关系。方法:48只雄性SD大鼠随机分为四组:对照组(C组)、低O2高CO21w、低O2高CO22w和4w组(1HH、2HH和4HH)。除对照组吸入空气外,其他三组大鼠置于含9.0%～11.0%O2,5.5%～6.5%CO2的低O2高CO2氧舱内,每天8h,每周6d。测定平均肺动脉压(mPAP)和右心室肥厚指数;采用RT-PCR法测定不同低O2高CO2组大鼠右心室心肌骨桥蛋白(OPN)及其整合素β3受体mRNA的表达水平。结果:①低O2高CO2各组大鼠mPAP和RV/LV+S均明显高于C组(P<0.01),并且随着低O2高CO2时间的延长而增高。②C组大鼠右心室心肌OPN和整合素β3mRNA表达水平均很低,低O2高CO2各组大鼠心肌OPN和整合素β3mRNA表达水平增高,与C组比较差异均有显著性(P<0.01和P<0.05)。相关性分析显示,骨桥蛋白mRNA表达水平与大鼠右心室肥大程度呈显著正相关性(P<0.01)。结论:慢性低O2高CO2大鼠肺动脉高压及右室肥大形成过程中,右心室心肌OPN及其受体整合素β3基因表达增高,可能在右心室心肌重塑中起重要的作用。
- 林全王良兴施孟如黄晓颖陈少贤
- 关键词：骨桥蛋白肺动脉高压高碳酸血逆转录-聚合酶链反应
- 延伸因子2在肺动脉高压大鼠发病中的变化及葛根素的干预作用研究被引量：2
- 2015年
- 目的观察野百合碱葛根素联合用药后大鼠肺组织差异蛋白质组学的变化并探讨葛根素抑制肺动脉高压、肺血管重建的机制。方法随机将SD大鼠分为5组,正常组、溶剂组、2个时间模型组、实验组,每组10只。溶剂组,腹腔注射乙醇与0.9%氯化钠混合溶液(50 mg·kg-1体重)每晨1次,饲养3周。模型组,腹腔注射野百合碱(50 mg·kg-1体重)1次,分别饲养2,3周。实验组,注射野百合碱溶液后,每晨腹腔注射葛根素液(40 mg·kg-1体重)1次,饲养3周。制备模型并确定其制备成功,对各组肺组织的总蛋白质进行双向电泳,质谱鉴定差异蛋白质,并进行数据库检索与分析。结果葛根素可抑制野百合碱引起的肺动脉高压、肺血管重建与右心室肥大。延伸因子2在2周,3周野百合碱组中表达依次递增,与正常组有显著差异。在葛根素组呈下调趋势,与野百合碱组差别显著。结论延伸因子2可能与葛根素抑制肺动脉高压的机制相关。
- 吴军王良兴龚玉强施孟如王金丹
- 关键词：葛根素野百合碱肺动脉高压双向凝胶电泳
- 温度对相同引种地三个秋茄居群遗传多样性的影响被引量：2
- 2013年
- 秋茄是世界分布最北的红树植物,研究温度对其遗传多样性的影响有助于阐明其抗冻机制.文章同时应用RAPD和ISSR分子标记技术,对3个不同纬度地区秋茄居群的遗传多样性和遗传分化进行分析,根据RAPD和ISSR数据计算遗传距离并进行聚类分析.2种方法均显示3个居群分为2大支:西门岛和象山港两居群之间遗传距离最小,两者之间的遗传一致度最大,首先聚为一类;漳江口和象山港居群之间的遗传距离最大,两者之间的遗传一致度最小,因此单独为一支.由于温度的原因对引种的秋茄进行了筛选,导致遗传多样性减少.
- 杨娟马小伟章宏琼周云宋佳楠朱忆思梦张洪勤施孟如
- 关键词：秋茄RAPDISSR
- 优化大鼠肺动脉平滑肌细胞骨架F-actin图像的激光共聚焦显微技术被引量：1
- 2011年
- 目的:优化大鼠肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)骨架蛋白F-actin图像的激光共聚焦显微技术。方法:采用不同浓度梯度的荧光染料及不同孵育条件,应用激光共聚焦显微扫描技术对PASMCs细胞骨架F-actin进行形态学观察。结果:终浓度10 mg/mL FITC-鬼笔环肽及10 mg/mL PI,分别染色30 min,并经RNA酶37℃处理为最适实验条件,可见F-actin呈明亮细丝状绿色荧光,PI标记的胞核呈红色荧光,胞浆无明显PI染色。结论:通过对染色条件的最终优化,表现出激光共聚焦技术在平面及三维同时观察细胞骨架F-actin的优越性,为进一步实验提供良好的技术平台。
- 郑易施孟如林全
- 关键词：肺动脉平滑肌细胞F-ACTIN激光共聚焦显微镜
- 温补肾阳药对激素依赖性肾阳虚动物肝线粒体蛋白质组影响的研究被引量：14
- 2007年
- 目的利用双向凝胶内差异显示电泳技术,分析温补肾阳药对激素依赖性肾阳虚动物肝线粒体蛋白质组影响。方法正常大鼠、肾阳虚大鼠及温补肾阳药治疗大鼠肝线粒体蛋白质样品分别用荧光染料Cy2,Cy3,Cy5标记,经双向电泳后用不同波长光激发扫描后得到不同样品的蛋白质组图谱,经DeCyder软件分析,以肾阳虚动物与正常动物肝线粒体蛋白质相差1·2倍以上的蛋白作为差异蛋白,共获得16个差异蛋白质,经质谱测定和与蛋白质文库比对,其中11个蛋白质得到鉴定。结果肾阳虚动物由于肾上腺皮质功能受损,引起热休克蛋白60和70含量增加,可能起到调整处于应激状态的细胞存活、保护细胞免受损伤的作用;肾阳虚动物糖代谢和脂代谢功能降低,而蛋白质代谢和核酸代谢功能增强,表现为二氢硫辛酰胺脱氢酶和脂酰辅酶A脱氢酶活性降低,而肌氨酸脱氢酶、氨甲酰磷酸合成酶和亚硫酸氧化酶活性增加;肾阳虚动物由于三羧酸循环和脂肪酸β-氧化功能障碍,引起ATP合酶、醛脱氢酶和NADH脱氢酶活性代偿性增加,试图通过增加ATP的产量以缓解能量代谢的不足;但肾阳虚动物由于鸟氨酸氨基转移酶活性降低,导致储存能量的肌酸合成降低,使产生的ATP大部分通过热能形式消耗掉,从而导致肾阳虚的临床虚寒症状。应用温补肾阳药治疗后使热休克蛋白60更趋增加,可能加强对细胞的保护作用;温补肾阳药增加二氢硫辛酰胺脱氢酶的活性,可通过改善糖代谢和促进三羧酸循环功能使机体的能量代谢增强;温补肾阳药还可以通过增加ATP合酶和醛脱氢酶的含量,使ATP的产量增加,缓解能量代谢功能障碍。结论温补肾阳药可以通过调整线粒体内多种与能量代谢相关蛋白质表达而起到治疗肾阳虚的作用。
- 唐利华沃兴德卢德赵施孟如李毅沃立科
- 关键词：蛋白质组肾阳虚温补肾阳药线粒体能量代谢
