朱海沫
- 作品数：8 被引量：9H指数：2
- 供职机构：第二军医大学附属长海医院更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 人非小细胞肺癌血管内皮细胞的分离培养及鉴定被引量：2
- 2008年
- 目的:建立人非小细胞肺癌血管内皮细胞体外分离培养体系,研究其体外生长特性。方法:利用酶消化法分离出肺癌组织微血管片段,采用植块培养法培养原代内皮细胞,先后以局部消化法和差速黏附法进行纯化;应用光镜、免疫细胞化学及免疫荧光技术对所获得的人肺癌血管内皮细胞进行鉴定。结果:所获人非小细胞肺癌血管内皮细胞呈FⅧ-RAg、CD34阳性;电镜下生长状态良好、可传代培养。结论:本研究摸索并建立了人非小细胞肺癌血管内皮细胞的分离培养方法,所获人非小细胞肺癌血管内皮细胞对肿瘤血管生成及抗肿瘤药物的研究具有重要价值。
- 周俊平楼国良李敏玉朱海沫张辅贤
- 关键词：非小细胞肺癌血管内皮细胞组织块法
- 吲哚胺2，3-二氧化酶基因修饰的DCs对小鼠移植物抗宿主病的抑制作用被引量：2
- 2007年
- 目的：探讨小鼠树突状细胞（dendritic cells，DCs）转染吲哚胺2，3-二氧化酶（indolamine2，3-dioxygenase，IDO）基因后对移植物抗宿主病（graft versus host disease，GVHD）的抑制作用。方法：用携带IDO基因的重组腺病毒感染BALB／c小鼠来源的树突状细胞，后者与C57BL／6小鼠骨髓移植物共培养，将经过处理的骨髓移植给BALB／c小鼠（C57BL／6→BALB／c小鼠GVHD模型，H-2^b→H-2^d），观察、比较各组GVHD表现（包括GVHD评分、生存期、病理学改变），并行嵌合体检测及观察混合淋巴细胞反应（mixed lymphocyte reaction，MLR）。结果：致死剂量照射的受体小鼠接受经IDO处理的骨髓移植（bone marrow transplantation，BMT）后，未出现明显的GVHD反应，生存期显著延长，3个月时生存率大于80％；对照组均在移植后2周左右出现明显的GVHD表现，生存期未超过1个月。IDO—DC治疗组未出现明显的组织病理学损害；3个月时IDO-DC治疗组仍然保持比较高的嵌合；IDO-DC组的T细胞对C57BL／6、BALB／c淋巴细胞的反应性与对C3H淋巴细胞反应性相比显著降低（P〈0．05）。结论：经IDO基因修饰的DCs可以选择性去除骨髓移植物中异基因反应性T细胞，从而特异性地抑制GVHD并能及早地免疫重建。
- 史平楼国良周俊平张文颖朱海沫王梁华焦炳华
- 关键词：吲哚胺2,3-二氧化酶树突状细胞恶性血液病同种异基因造血干细胞移植移植物抗宿主病
- ATPase F1α在人结直肠癌组织和细胞株中的表达及其意义
- 2009年
- 目的:观察人结直肠癌组织和细胞株中ATPaseF1α的表达,并探讨其意义。方法:应用免疫组化EnVision法测定收集自长海医院2007年8月至12月的44例结直肠癌组织及癌旁组织手术切除标本中ATPaseF1α的表达;半定量RT-PCR方法检测8例结直肠癌及癌旁组织中ATPaseF1αmRNA的表达水平。采用免疫荧光法检测ATPaseF1α在人结肠癌Lo-Vo细胞株胞膜的表达;采用CCK-8活细胞计数法检测抗ATPaseF1α抗体对LoVo细胞增殖的抑制作用。结果:44例结直肠癌组织中ATPaseF1α的表达显著高于癌旁组织(P<0.01);44例结直肠癌组织中ATPaseF1α的中高度表达有35例(79.5%),癌旁配对组织的中高度表达为15例(34.1%)。8例结直肠癌组织中ATPaseF1αmRNA的表达明显高于癌旁组织(P<0.01)。ATPaseF1α在结直肠癌组织中的阳性表达率高于患者术前血浆CEA阳性率(P<0.01),而与患者年龄、性别、肿瘤的临床分期、淋巴结转移、远处转移、肿瘤的部位、分化程度等均无关(P>0.05)。结肠癌LoVo细胞株胞膜上可见颗粒状分布的ATPaseF1α,ATPaseF1α抗体对LoVo细胞的增殖活性有明显的抑制作用(P<0.01)。结论:人结直肠癌组织和细胞株均高表达ATPaseF1α,其作为肿瘤抗原,有可能成为结直肠癌靶向治疗的新靶点。
- 李敏玉朱海沫周俊平楼国良
- 关键词：ATP合成酶CCK-8
- 异位F1F0 ATP合酶及其与肿瘤血管生成的关系被引量：2
- 2007年
- 异位F1F0 ATP合酶作为一个细胞表面受体,它可表达在血管内皮细胞表面黏合血管抑素(angiostatin,又称血管生成抑制素),调节细胞表面ATP水平,进而影响血管内皮细胞的增殖和分化。血管抑素在低pH值时可以黏合并阻滞细胞表面的F1F0ATP合酶,继而干扰其活动;籍此发挥强大的内皮细胞杀伤效应,在抑制肿瘤血管生成中起着重要作用。
- 朱海沫楼国良
- 关键词：ATP合酶血管生成内皮细胞
- 抗ATPase F1α抗体MAb3D5AB1对荷A549肺腺癌小鼠的抑制作用
- 2009年
- 目的:探讨一种新型抗ATPaseF1α抗体,人血管抑制和肿瘤转移相关蛋白(human angiostatin interacting and tumor metastasis involving protein,HAI-TMIP)抗体MAb3D5AB1(简称GX)对A549肺腺癌小鼠移植瘤的抑制作用。方法:在C57BL/6小鼠右前腋窝接种A549肺腺癌细胞,制备小鼠荷瘤模型,32只荷瘤小鼠随机分为对照组(无任何处理)及A、B、C治疗组(分别腹腔注射125、250、500ng/mlGX)。观察各组移植瘤小鼠肿瘤体积、生长延迟时间(tumor growth delay,TGD)及小鼠生存期。免疫组织化学法检测瘤组织内微血管密度。TUNEL法检测肿瘤细胞凋亡。结果:成功建立了荷A549肺癌小鼠模型,治疗组小鼠移植瘤的体积明显减小(P<0.05)、TGD随GX剂量增加而显著延长(P<0.01)、瘤组织内微血管密度明显减少(P<0.05),TUNEL法检测发现各治疗组瘤细胞凋亡率均显著高于对照组(均P<0.01)。结论:GX可以抑制肿瘤新生血管生成,促进肿瘤细胞调亡,使A549肺腺癌小鼠移植瘤生长减慢,并延长小鼠生存期。
- 周俊平楼国良李敏玉朱海沫胡宗涛芦东徽
- 关键词：肺腺癌微血管密度凋亡
- 人非小细胞肺癌F_1ATPase-α的表达及临床意义被引量：2
- 2007年
- 目的:研究人类非小细胞肺癌(NSCLC)组织中ATP合酶F1ATPase-α的表达,并探讨其临床意义。方法:(1)以EnVision免疫组织化学方法检测38例NSCLC配对标本、7例肺良性肿瘤与肺炎性病变标本的F1ATPase-α表达情况。(2)应用RT-PCR方法检测12例NSCLC组织、癌旁肺组织中F1ATPase-α的mRNA表达。(3)用免疫荧光法检测F1ATPase-α在正常支气管上皮细胞与A549细胞胞膜中的表达。结果:(1)F1ATPase-α在肺癌组织呈中高度表达者36例(36/38),低度表达2例;癌旁正常配对组织成呈中高度表达11例(11/38),低度表达27例;7例肺良性病变组织全部低度表达。肺腺癌F1ATPase-α的高表达显著高于肺鳞癌(11/16vs5/20,P<0.05)。F1ATPase-α高表达率在肿瘤不同部位、分化程度、大小、淋巴结转移及临床分期之间差异无统计学意义。(2)12例肺癌组织中F1ATPase-αmRNA相对表达量为0.54±0.19,显著高于配对的癌旁肺组织(0.31±0.12,P<0.01)。(3)肺癌A549细胞胞膜上有颗粒状分布的F1ATPase-α,正常支气管上皮细胞未检测到。结论:(1)F1ATPase-α在NSCLC中有相对较高的表达水平。(2)F1ATPase-α表达于非小细胞肺癌A549细胞株的细胞膜上,提示有作为靶向药物治疗分子靶点的潜力。
- 朱海沫李敏玉史平周俊平楼国良
- 关键词：免疫组织化学
- ATPaseF1α在人类非小细胞肺癌中的表达及其生物学新功能的初步研究
- 本文对ATPaseF1α在人类非小细胞肺癌中的表达及其生物学新功能进行了探讨。本研究采用EnVision法、RT-PCR法检测ATPaseF1α的表达。采用免疫细胞化学法及免疫荧光法观测ATPaseF1α在A549细胞上...
- 朱海沫
- 关键词：肺脏肿瘤基因表达细胞抗原
- 文献传递
- 抗ATPase F1α抗体对人非小细胞肺癌血管内皮细胞的抑制作用被引量：2
- 2008年
- 目的:探讨一种新的抗ATPase F1α抗体,人血管抑制和肿瘤转移相关蛋白(human angiostatin interacting and tumor metastasis involving protein,HAI-TMIP)抗体((MAb3D5AB1,简称GX)对人非小细胞肺癌血管内皮细胞(non-small cell lung cancer-derived vascular endothelial cell,NSCLC-VEC)的抑制作用。方法:从非小细胞肺癌患者手术切除标本分离和原代培养NSCLC-VECs;采用免疫荧光法检测NSCLC-VECs膜上ATPase F1α的表达,RT-PCR分析细胞ATPase FlαmRNA的表达水平;CCK-8法检测GX对NSCLC-VECs增殖的抑制效应,划痕损伤实验检测GX对NSCLC-VECs迁移的抑制作用,FACS检测GX对NSCLC-VECs凋亡的影响。结果:倒置荧光显微镜检测显示,NSCLC-VECs胞膜上有ATPase F1α的显著表达;RT-PCR的结果表明,分别来源于肺腺癌、肺鳞癌的血管内皮细胞中ATPase F1αⅡ肽段基因片段大小为668 bp。CCK-8结果表明,经GX处理,NSCLC-VECs的增殖活力显著低于对照组(P<0.01);划痕损伤实验结果显示,经GX处理的NSCLC-VECs的迁移速度显著低于对照组(P<0.01);FACS结果显示,GX处理后NSCLC-VECs的凋亡率高于对照组(P<0.01)。结论:ATPaseF1α在NSCLC-VECs膜上有较高的表达,GX通过靶向作用于ATPaseF1α抑制NSCLC-VECs的增殖、迁移,并诱导细胞凋亡。
- 周俊平楼国良朱海沫李敏玉张辅贤
- 关键词：非小细胞肺癌血管内皮细胞ATP合酶抗体靶向治疗
