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1型糖尿病自身抗原胰岛素瘤相关蛋白2真核表达系统的构建和鉴定被引量：1: 2005年; 目的构建能高效表达自身抗原胰岛素瘤相关蛋白2(IA2)的真核表达载体作为预防发生1型糖尿病(T1DM)的基因疫苗。方法利用基因工程技术构建重组pEGFP/IA2真核表达系统,并且转染、筛选稳定高表达IA2的RIN5F胰岛细胞株,用免疫印迹法并在荧光显微镜下鉴定其表达,利用共培养体系检测IA2刺激淋巴细胞增殖率。结果双酶切结果表明成功构建了重组pEGFP/IA2真核表达系统,免疫印迹法证实可在RIN5F细胞内高表达IA2。并且该表达的IA2可显著促进NOD小鼠淋巴细胞增殖反应(P<0.05)。结论成功构建的IA2真核表达系统对于T1DM基因疫苗预防策略和对于IA2生理功能的研究都具有重要的意义。; 刘煜朱虎曾丽玲陈家伟杨金奎钟耀华王若宁陈小章; 关键词：1型糖尿病自身抗原真核表达系统 IA-2

胰岛素瘤相关蛋白-2高表达对胰岛细胞增殖的影响被引量：1: 2004年; 目的:探讨1型糖尿病自身抗原胰岛素瘤相关蛋白-2(IA鄄2)高表达对胰岛细胞系RIN5F细胞增殖、生长周期和细胞凋亡的影响。方法:利用分子克隆技术构建IA鄄2真核表达载体,转染RIN5F细胞后筛选稳定高表达IA鄄2的细胞系,采用3鄄(4,5鄄二甲基)鄄5鄄(3鄄羧甲基苯环)鄄2鄄(4鄄硫基苯)鄄2H鄄四唑盐复合物(MTS)检测法确定细胞增殖速率,运用流式细胞术检测细胞生长周期和细胞凋亡水平。结果:IA鄄2高表达细胞增殖速率显著低于载体对照组细胞(P<0.05)。IA鄄2高表达细胞的细胞凋亡数显著高于载体对照组细胞(P<0.01)。IA鄄2高表达细胞中位于S期的细胞比率显著增加,而G2/M期的细胞比率减少(P<0.05)。结论:IA鄄2在胰岛细胞内高表达可抑制胰岛细胞的增殖,促进细胞凋亡,在G2鄄M期细胞生长阻滞。; 刘煜Alice H朱虎曾丽玲陈家伟陈小章; 关键词：凋亡

精子发生相关蛋白激酶的功能研究: 为了鉴别精子发生相关基因,我们使用成人和胚胎睾丸探针杂交成人睾丸的cDNA微阵列。在所有成人睾丸高表达的基因中,有一个基因在成人睾丸的表达强度是胚胎睾丸的3.3倍,我们将其命名为NYD-SPK。NYD-SPK核苷酸长度为...; 朱虎沙家豪陈小章; 文献传递

转录因子CaRF在大鼠皮肤创面愈合中的作用被引量：2: 2007年; 目的探讨转录因子(calcium-responsivefactor,CaRF)在大鼠皮肤创面愈合中的作用。方法建立大鼠背部皮肤全层切割伤模型,随机将大鼠分为3组盐水对照组,CaRF过表达处理组,CaRFRNAi处理组,以脂质体转染的方式将CaRF和CaRFRNAi导入创面组织,观察3组大鼠背部皮肤伤口愈合状况。结果CaRF过表达组大鼠皮肤愈合快,愈合质量好,CaRFRNAi组大鼠皮肤愈合最慢,愈合质量差。结论CaRF促进大鼠皮肤创面愈合,为临床创面愈合提供了新的思路。; 谢江李廷玉朱虎曾丽玲钟耀华陈小章; 关键词：创伤愈合

体外诱导成年大鼠骨髓间充质干细胞分化为5-羟色胺敏感性神经元被引量：3: 2006年; 体外诱导成年大鼠骨髓间充质干细胞分化为具有神经元表型和部分功能的细胞。在对Woodbury化学诱导法作改良的基础上,加用全反式视黄酸对骨髓间充质干细胞作预诱导。诱导3h后,细胞开始表现神经元的形态特征,细胞折光性增强,形成收缩的双极或多极胞体和细长突起。细胞可以维持神经元样存活72h以上。诱导5h后,对免疫染色的细胞用DAPI进行复染,(92.4±6.9)%的细胞表达神经元特异性烯醇化酶。诱导24h后,(93.9±5.2)%的细胞表达成熟神经元的标志物神经丝M+H。在给予5-羟色胺刺激时可以产生与神经元相似的胞内钙离子峰,且免疫组化证实5-羟色胺1A受体在干细胞上表达微弱,但在分化后的神经元中表达较强。实验不仅从形态、细胞标志物而且从功能上证实诱导后的细胞为5-羟色胺敏感性神经元。; 舒畅李廷玉黄巧茵刘妙贞曾丽玲朱虎苟毓林钟耀华陈小章; 关键词：分化 5-羟色胺钙离子骨髓间充质干细胞神经元

葡萄糖及细胞因子对胰岛素瘤相关蛋白-2表达水平的影响: 2005年; 目的探讨葡萄糖、肿瘤坏死因子(TNF)-α、干扰素(IFN)-γ对胰岛细胞自身抗原胰岛素瘤相关蛋白(IA)-2表达水平及胰岛素分泌水平的影响。方法以不同浓度的葡萄糖(3、7、11、30mmol/L)、10ng/mlIFN-γ及100ng/mlTNF-α分别刺激胰岛细胞系RIN5F24h和48h,用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测各组RIN5F细胞中IA-2的mRNA表达水平,并用放射免疫法检测上清中胰岛素的浓度。结果RT-PCR结果显示以不同浓度葡萄糖(3、7、11、30mmol/L)分别刺激RIN5F细胞系后IA-2mRNA水平呈浓度依赖性和时间依赖性增加;TNF-α可抑制IA-2mRNA的水平,并且作用48h后IA-2表达水平显著降低(P<0.05);IFN-γ作用24h及48h均可显著抑制IA-2的表达(P<0.05)。TNF-α或IFN-γ刺激RIN5F细胞系后,上清中胰岛素水平均较基础值降低,并且作用48h后差异有统计学意义(P<0.05)。结论葡萄糖可使IA-2的mRNA水平呈剂量依赖性和时间依赖性增加,TNF-α、IFN-γ可抑制IA-2的mRNA表达和胰岛素分泌浓度。; 刘煜陈家伟刘超曾丽玲Alice Ho朱虎陈小章; 关键词：葡萄糖细胞因子类分泌水平细胞因子葡萄糖干扰素(IFN)-Γ 反转录聚合酶链反应

葡萄糖、促炎症因子和生长因子影响胰岛自身抗原的表达: 2005年; 目的:探讨葡萄糖、细胞因子TNF-α,IFN-γ和生长因子IGF-1,EGF,FGF对胰岛细胞自身抗原IA-2表达水平及胰岛功能的影响。方法:以不同浓度的葡萄糖(3,7,11和30mmol/L)、IFN-γ(10ng/ml)、TNF-α(100ng/ml)及IGF-1,EFG,FGF-10(10ng/ml),分别刺激胰岛细胞系RIN5F24h和48h,用RT-PCR方法检测各组RIN5F细胞中IA-2的mRNA表达水平,用放射免疫法检测上清中胰岛素的浓度,3-(4,5-二甲基)-5-(3-羧甲基苯环)-2-(4-硫基苯)-2H-四唑盐复合物(MTS)法检测细胞生长速率。结果:RT-PCR结果显示以不同浓度葡萄糖(3,7,11和30mmol/L)分别刺激RIN5F细胞系后,IA-2mRNA水平呈浓度依赖性和时间依赖性增加;TNF-α、IFN-γ可抑制IA-2mRNA的水平(P<0.05),IGF-1、FGF使IA2的表达增加(P<0.05)。TNF-α或IFN-γ刺激RIN5F细胞系后,上清中胰岛素水平均较基础值降低,并且作用48h后差异有显著性(P<0.05)。IGF-1,bFGF作用于RIN5F细胞系48h,上清中胰岛素较基础值显著增加(P<0.05)。MTS结果显示IGF-1使胰岛细胞增殖速率显著增加(P<0.01)。结论:葡萄糖、TNF-α、IFN-γ和一些生长因子可改变胰岛自身抗原的表达,参与1型糖尿病的发病。; 刘煜曾丽玲Alice H朱虎陈家伟陈小章; 关键词：葡萄糖细胞因子

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朱虎