朴庆林
- 作品数：60 被引量：107H指数：5
- 供职机构：吉林省农业科学院更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划转基因生物新品种培育专项国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学环境科学与工程交通运输工程更多>>
- 鸡胚胎干细胞的分离培养与鉴定
- 2020年
- 利用胰蛋白酶消化法从X期鸡胚中分离胚胎干细胞(embryonic stem cells,ESCs),以鸡胚成纤维细胞为滋养层,进行体外培养,采用形态法和标志分子检测对获得的干细胞进行鉴定。结果显示,获得典型的呈巢状或岛状的鸡胚胎干细胞(chicken embryonic stem cells,cESCs)克隆,细胞碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,AKP)染色呈蓝紫色,表明具有较高的内源性AKP活性;胚胎阶段特异性表面抗原SSEA-1(stage specific embryonic antigen 1,SSEA-1)鉴定结果呈阳性,显示cESCs克隆具有多能性。本试验成功分离出cESCs,可体外培养并保持未分化状态及多能性。
- 李欣于永生吕阳柳俭强金海国朴庆林赵中利
- 关键词：胚胎干细胞体外培养碱性磷酸酶
- 转K2.9基因绒山羊体细胞核移植技术体系的优化研究被引量：1
- 2012年
- 【目的】利用体细胞核移植技术制备转毛角蛋白Ⅱ型中间丝K2.9基因的高绒质绒山羊胚胎,为绒山羊优良品种的培育提供一种全新的技术材料。【方法】以含有Neor基因标记的K2.9毛囊特异表达载体pcDNA3.1-K转染绒山羊胎儿成纤维细胞,经G418筛选获得转K2.9基因细胞,将获得的转基因阳性细胞与体外成熟的绒山羊卵母细胞进行核移植,并对生产的重构胚进行了体外培养。本文分别进行了激活方法、供体细胞和卵母细胞来源的筛选,且对获得的囊胚进行了PCR鉴定。【结果】(1)Iono+6-D对成年羊卵母细胞的孤雌激活效果好于A23187+6-D,显著提高了胚胎的卵裂率。(2)羔羊孤雌胚的卵裂率显著低于成年羊,但囊胚率差异不显著。(3)来自2只绒山羊胎儿的转基因成纤维细胞对核移植胚的发育没有显著影响,但2号羊的转基因细胞显著提高了融合率。(4)以羔羊卵进行核移植,显著降低了核移植胚的发育率。(5)对获得的囊胚进行PCR鉴定,成功扩增到目的基因。【结论】将K2.9毛囊特异表达载体pcDNA3.1-K转染的绒山羊胎儿成纤维细胞作为供体细胞,核移植到成年羊卵母细胞中,以Iono+6-D进行激活,首次成功、高效地获得携带K2.9基因的绒山羊囊胚。
- 潘晓燕于永生刘晓辉王正朝王晓阳朴庆林张立春金海国
- 关键词：绒山羊胎儿成纤维细胞转基因体细胞核移植
- 种植紫花苜蓿治理黑土地水土流失的建议被引量：1
- 2005年
- 本文简述了东北黑土地水土流失的现状及其原因,提出调整种植业结构,扩大人工草地面积等防止黑土地水土流失的重要措施。分析了苜蓿的生态功能、饲用价值、经济效益与市场前景。最后提出了吉林省发展苜蓿的优势与建议。
- 朴庆林陈自胜
- 关键词：紫花苜蓿水土流失黑土地
- 要加强对我省“三化”草原生态的治理
- 2001年
- 朴庆林
- 关键词：草原生态草原退化环境治理
- 绵羊VEGF-C基因可变剪切体克隆与序列分析被引量：5
- 2018年
- 为克隆不同品种绵羊血管内皮生长因子C(VEGF-C)基因,探寻该基因与绵羊毛囊发育及毛用性状形成的内在关系,本实验利用RT-PCR方法从小尾寒羊与新吉细毛羊皮肤组织克隆出VEGF-C基因mRNA并进行生物信息学分析。以皮肤组织cDNA为模板,RT-PCR扩增显示存在多个扩增条带,克隆测序结果发现所有条带均为VEGF-C基因序列。除最长片段为全长VEGF-C基因外,其他均为VEGF-C异构体,片段长度依次为1 318、1 298、1 197、890、732、604 bp。所有异构体均表现为序列中间部位的缺失,分析显示各异构体由不同类型的可变剪切方式组合加工产生。氨基酸分析发现大部分异构体造成移码突变,编码类VEGF-C蛋白小肽,推测可能参与VEGF-C蛋白成熟或功能调节。本研究首次证明VEGF-C基因在绵羊皮肤组织存在复杂的转录后加工过程,为进一步研究VEGF家族在绵羊皮肤组织中的功能奠定基础。
- 张立春李梦姝曹阳孙福亮朴庆林金海国张明新
- 关键词：血管内皮生长因子C新吉细毛羊小尾寒羊
- 辽宁绒山羊绒直径相关基因的筛选
- 受遗传因素决定的山羊绒直径是绒山羊重要的经济性状。为了确定参加绒直径调节的基因,采用solexa转录组测序技术对具有不同绒直径的辽宁绒山羊皮肤进行了全基因表达谱研究,发现了62个差异表达基因,其中上调基因33个,下调基因...
- 于永生曹阳朴庆林罗晓彤金海国
- 关键词：辽宁绒山羊
- 文献传递
- 不同遗传背景猪群体黏病毒耐药蛋白1基因多态性分析被引量：2
- 2017年
- 为探讨不同遗传背景猪黏病毒耐药蛋白1(myxovirus resistance,Mx1)基因的遗传多态性,本试验采用RT-PCR方法扩增克隆出猪Mx1基因并进行生物信息学分析,采用高分辨率熔解曲线法(HRM)对民猪、长白山野猪与民猪杂交猪(简称野杂猪)和大白猪3个群体Mx1基因外显子2区多态性进行分析。结果显示,从民猪及野杂猪中成功克隆出4条Mx1基因mRNA序列。该序列含有1个1 992bp的完整开放阅读框(ORF),编码663个氨基酸。比较发现4条Mx1基因序列中共含有30个SNPs位点,其中17个SNPs位点引起了氨基酸序列的变异。功能结构域分析发现,大部分氨基酸突变位点位于Mx1基因功能结构域两侧。HRM多态性分析显示,Mx1基因外显子2区DD基因型作为优势基因型在3个群体中具有最高的基因型频率,其中大白猪中DD基因型频率为100%,野杂猪为62.5%,民猪为56.2%。基因多态性分析还发现该区域存在更多的核苷酸及氨基酸突变位点,表明民猪和野杂猪Mx1基因存在更丰富的基因多态性。
- 张立春李兆华李梦姝孙福亮曹阳朴庆林金海国张树敏
- 关键词：民猪大白猪
- 一组绵羊毛用性状相关SNP的筛选及应用
- 一组绵羊毛用性状相关SNP的筛选及应用属家畜分子标记辅助选择育种技术领域，本发明利用单核苷酸多态性标记分析预测绵羊毛用性状，用SEQ ID NO:2和3或SEQ ID NO:4和5所示引物，对不同绵羊个体总DNA进行PC...
- 张立春孙福亮张明新金海国朴庆林曹阳于永生
- 文献传递
- 山羊乳腺特异性表达慢病毒载体的构建与验证被引量：1
- 2009年
- [目的]构建山羊乳腺特异性表达尿激酶原突变体的重组慢病毒载体,证明其表达的有效性。[方法]将劳氏肉瘤病毒增强子/启动子、复制缺陷型艾滋病病毒(HIV-1)的5’端长重复序列(LTR)、HIV-1Ψ包装信号、HIV Rev反应元件、山羊β-casein调控序列、pro-UKM13、ΔU3/3’LTR依次连接,构建乳腺特异性表达的慢病毒载体;通过体外转染人乳腺癌细胞系(MCF-7)、仓鼠卵巢细胞(CHO)和泌乳山羊乳腺注射证明其表达有效性。[结果]构建的山羊乳腺特异性表达载体酶切鉴定是正确的;利用该载体转染细胞,采用溶圈法和Western blot检测证实了其表达的有效性;慢病毒载体注射到泌乳山羊的乳腺,在乳汁中也检测到了尿激酶原的表达。[结论]为在转基因动物的乳腺中表达尿激酶原突变体奠定了基础。
- 朴庆林于永生罗晓彤金海国
- 关键词：慢病毒载体
- 法国挽马品种资源考察
- 2019年
- 法国特色的9种挽马品种,构成了该国挽马业在世界上独一无二的遗产。贝尔修伦马被认为是法国马育种的历史旗舰,20世纪70年代以来,世界机械化进程使法国挽马业同样面临着物种灭绝的威胁,法国政府和私人积极拯救地方挽马品种,使挽马品种资源在法国得到了很好的保护和发展。2016年在法国国家注册登记的9个挽马品种基础母马共计7403匹,这些挽马被用于休闲驾驶和农业工作(伐木、葡萄园等),也用于肉用和产奶。
- 李信涛刘海燕刘晓辉张鹏举王伟霞谭成成朴庆林
- 关键词：挽马
