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血管内皮祖细胞移植治疗脊髓损伤的实验研究被引量：1: 2008年; 目的观察人的血管内皮祖细胞移植，对大鼠脊髓损伤的神经功能恢复的影响及移植细胞的存活和分化。方法取由上海市发育生物学重点实验室提供的人血管内皮祖细胞，收集细胞悬液。将40只SD大鼠制备脊髓全横断模型，将存活的30只大鼠随机分为三组：假手术组（A组），10只，未做任何处理；手术／细胞组（B组），10只，于距损伤区域1cm椎管内注射7．5出，细胞总数为6×10^6个；手术／DMEM组（C组），10只，按B组方法注射等量DMEM。术后1、2、4、6和8周采用BBB后肢功能评分观察大鼠脊髓神经功能恢复情况，取出损伤的脊髓行免疫组织化学和原位杂交检测移植细胞在宿主脊髓内的存活和分化情况，再用SAS．1．3统计软件，分析行为学的变化，用秩和的Kruskal—Wallis Test和Nemenyi法检验，P〈0．05为差异具有统计学意义。结果BBB后肢功能评分显示术后各时间点A组与B、C组比较，差异均有统计学意义（P〈0．05），B组与C组比较，在2、4、6和8周显示B组明显优于C组，但明显低于A组，上述差异均有统计学意义（P〈0．05）。原位杂交和免疫组化检测显示移植的内皮祖细胞不仅能在宿主体内存活而且一些移植的细胞嵌合到宿主脊髓并分化为血管。结论人内皮祖细胞移植后，能够在脊髓内存活、并分化为血管内皮细胞并能促进损伤脊髓功能的恢复。; 杨建华刘睁李长德李东平; 关键词：脊髓损伤细胞移植

骨髓单个核细胞移植治疗急性脊髓损伤被引量：2: 2008年; 目的：研究已证实，各种干细胞移植治疗损伤脊髓，都可以一定程度的恢复脊髓中枢神经的功能。但对骨髓单个核细胞移植治疗损伤脊髓以及长期效果的研究少见。利用大鼠抽取新鲜分离的骨髓单个核细胞，将其移植入脊髓损伤大鼠模型，评价脊髓功能恢复情况、神经再生和新生血管形成及长期预后效果。方法：实验于2005—10／2006-04在上海第二医科大学发育生物学研究中心实验室完成。实验室级别：生物安全一级。①实验材料：8周龄SD雌性大鼠，体质量200～220g，清洁级，由中国科学院实验动物中心提供，实验过程中对动物处置符合动物伦理学标准。②实验方法：从大鼠胫骨及股骨采集骨髓细胞，密度梯度离心法分离骨髓单个核细胞备用。制作大鼠脊髓损伤动物模型，将造模成功22只大鼠随机分成2组：模型＋细胞组（n=11）：脊髓完全横断T9-10后，椎管内注射骨髓单个核细胞：模型＋DMEM组（n=11）：脊髓完全横断T9-10后在损伤邻近区注射DMEM。假手术组（n=9）：仅剪除T9-10棘突和椎板后，不损伤脊髓，逐层缝合。③实验评估：采用原位杂交和免疫组织化学技术检测移植细胞在宿主脊髓内的存活情况，BBB评分评估大鼠脊髓神经功能恢复情况。结果：①假手术组在术后各时间点观察中评分无明显差异，属评分正常。模型＋DMEM组评分为0分，其脊髓功能无明显恢复。模型＋细胞组在2，4，6，8周脊髓功能处于逐渐恢复的过程。与模型＋DMEM组及假手术组比较，差异有显著性意义（P〈0．01）。②原位杂交和免疫组织化学检测显示，移植的细胞能在宿主体内存活，并嵌合到宿主脊髓组织表达血管标志。结论：骨髓单个核细胞移植后8周，不仅能够在损伤脊髓内存活，而且还能分化新生血管，促进脊髓功能的恢复。; 李长德杨建华刘铮李东平; 关键词：急性脊髓损伤骨髓单个核细胞细胞移植

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李东平

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