李文娟
- 作品数：17 被引量：21H指数：2
- 供职机构：中南大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金湖南省自然科学基金湖南省科技计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学交通运输工程化学工程更多>>
- 一种手动对准的三自由度微动角位台
- 一种手动对准的三自由度微动角位台，包括底座、台面、固定台、连接台、分厘卡、角度倾斜板和铰接钢片，所述底座包括Z向底座和XY向底座；所述固定台包括Z向固定台和XY向固定台，所述Z向固定台安装在Z向底座上，所述XY向固定台安...
- 郑煜李继攀段吉安王丽军吕文李文娟
- 文献传递
- 聚酰胺6摩擦学行为研究
- 聚酰胺6(PA6)具有耐磨、自润滑、力学性能优良等特点，在摩擦材料领域显示出广阔的应用前景，但目前关于PA6的研究主要集中在力学性能的提高，其中对其摩擦学行为的研究大多局限于纳米改性方面。
本论文选用聚四氟乙烯(P...
- 李文娟
- 关键词：聚酰胺6固体润滑剂摩擦学行为
- 稳定转染NOR1抑制5-8F细胞片状伪足形成和Wnt信号通路被引量：2
- 2012年
- 细胞骨架是真核细胞中的蛋白纤维网络结构,不仅与保持细胞形态结构有关,而且影响细胞黏附和细胞运动.NOR1是从鼻咽癌中克隆得到的新基因,在鼻咽癌组织和细胞系中表达下调.本研究建立了NOR1稳定表达的鼻咽癌5-8F细胞系.过表达NOR1引起高转移性鼻咽癌5-8F细胞形态改变,抑制片状伪足形成、细胞表面积缩小、细胞聚集性增强.扫描电镜检测发现,NOR1抑制了5-8F细胞膜微绒毛的数量,引起细胞膜表面改变.细胞骨架染色发现,NOR1过表达导致5-8F细胞actin骨架连续性破坏,应力纤维增加.Realtime RT-PCR检测发现,NOR1引起5-8F细胞Wnt/β-catenin信号通路分子Wnt5A受体FZD5、FZD7表达下调,抑制了β-catenin蛋白入核.提示NOR1抑制Wnt/β-catenin信号通路激活,破坏细胞骨架连续性,抑制细胞膜微绒毛与伪足形成.
- 向波王卫李文娟唐珂曾朝阳李小玲李桂源
- 关键词：鼻咽癌WNT信号通路
- 电加热装置及系统
- 本发明揭示了一种电加热装置及系统，其中该装置包括发热体、两个电极和陶瓷壳体，其中：两个电极连接在发热体两端；陶瓷壳体内部形成有空腔，发热体放置在该空腔中；陶瓷壳体的顶部形成贯穿陶瓷壳体厚度方向并与空腔连通的凹口，发热体为...
- 郑煜李文娟段吉安周剑英吕文王丽军李继攀
- 文献传递
- 一种手动对准的三自由度微动角位台
- 一种手动对准的三自由度微动角位台，包括底座、台面、固定台、连接台、分厘卡、角度倾斜板和铰接钢片，所述底座包括Z向底座和XY向底座；所述固定台包括Z向固定台和XY向固定台，所述Z向固定台安装在Z向底座上，所述XY向固定台安...
- 郑煜李继攀段吉安王丽军吕文李文娟
- 文献传递
- DNA甲基化对NOR1基因启动子活性和基因表达的影响被引量：2
- 2012年
- 目的:研究DNA甲基化对NOR1基因启动子活性和表达的影响。方法:采用SssI甲基转移酶处理NOR1基因启动子报告载体,经重亚硫酸钠修饰后测序检测报告载体甲基化水平。未经SssI处理和经SssI处理的NOR1基因启动子报告载体分别转染细胞,检测荧光素酶活性或GFP表达。采用去甲基化药物5-氮杂-2'-脱氧胞苷处理白血病细胞系HL60细胞,抽提RNA,Real-time RT-PCR检测NOR1 mRNA表达水平。结果:重亚硫酸钠测序表明SssI甲基转移酶体外处理导致NOR1启动子CpG岛CG位点完全甲基化。体外甲基化的NOR1启动子活性完全丧失。去甲基化药物5-氮杂-2'-脱氧胞苷连续处理3 d后,白血病细胞系HL60细胞中内源性NOR1 mRNA表达水平显著增加。结论:SssI甲基转移酶可用于体外甲基化修饰NOR1基因启动子报告载体。甲基化修饰导致NOR1启动子活性丧失。去甲基化药物5-氮杂-2'-脱氧胞苷处理恢复NOR1 mRNA表达。
- 向波李文娟易梅王卫李小玲李桂源
- 关键词：表观遗传学甲基化启动子
- 鼻咽癌抑瘤基因NOR1第2外显子选择性剪切异构体在组织和细胞中的分布规律(英文)被引量：1
- 2011年
- 目的:研究NOR1基因全长及第2外显子选择性剪切异构体在人细胞系和组织中的分布规律以及NOR1蛋白全长及剪切异构体的亚细胞定位模式。方法:以人胎脑cDNA文库质粒为模板,PCR扩增NOR1基因开放阅读框(open reading frame,ORF),酶切后连接pCMV/myc载体。以pCMV/myc-NOR1(isoform 1)质粒为标准品,采用Real-time RT-PCR方法检测NOR1 mRNA在人胚胎组织和成人睾丸组织中的表达。用RT-PCR方法扩增NOR1基因第2外显子两侧序列片段,测序分析NOR1 isoform 1和isoform 2 mRNA在细胞和组织中的分布;PCR方法扩增细胞系NOR1第2外显子基因组序列,测序检测第2外显子gDNA序列。将pCMV/myc-NOR1(isoform 1)和pCMV/myc-NOR1(isoform 2)质粒转染细胞,采用免疫荧光方法观察两种异构体在细胞内定位模式。结果:从人胎脑cDNA文库克隆得到NOR1基因全长ORF(isoform 1)和遗漏第2外显子的剪切异构体(isoform 2)。Real-time RT-PCR检测发现成人睾丸组织NOR1 mRNA表达水平最高,胚胎鼻咽、气管、脑、肾组织有中等水平表达,其他组织表达较低。RT-PCR结合测序检测发现表明睾丸、鼻咽、气管、肾等16种组织仅表达isoform 2;而脑组织同时检测到NOR1 isoform 1和isoform 2 mRNA,以isoform 2为主。NP69,HNE1等细胞系仅表达遗漏第2外显子的isoform 2,所有检测的细胞系基因组DNA无第2外显子缺失。免疫荧光检测发现NOR1 isoform 1和isoform 2编码蛋白在细胞内定位模式相似。结论:克隆得到NOR1基因全长和遗漏第2外显子的剪切本。Isoform 2是NOR1基因在组织和细胞系中的主要表达形式,NOR1 iso-form 1仅表达于脑组织。第2外显子对NOR1蛋白的细胞内定位模式没有影响。
- 向波王卫易梅李文娟周鸣李小玲李桂源
- 关键词：鼻咽癌选择性剪切亚细胞定位
- 抗癌蛋白NOR1基因工程重组蛋白表达条件的优化和纯化被引量：2
- 2011年
- 目的:构建NOR1基因原核表达载体,并在大肠杆菌中原核表达NOR1重组蛋白,对其诱导条件进行优化,并纯化NOR1蛋白。方法:PCR扩增人NOR1基因全长开放阅读框,克隆入原核表达载体pET28b。重组质粒转化大肠杆菌,采用不同温度、不同抗生素浓度、不同IPTG浓度诱导NOR1蛋白表达。选择最佳条件大量诱导NOR1蛋白表达,采用Ni-IDE树脂纯化NOR1重组蛋白,并通过SDS-PAGE凝胶电泳检测重组蛋白的纯度。结果:成功构建了pET28b-NOR1基因原核表达载体,并转化E.coli Rosettablue(DE3)。利用IPTG诱导His-NOR1蛋白表达,结果发现IPTG浓度、温度、抗生素浓度均可影响NOR1重组蛋白的表达效率。0.25mmol/L IPTG即可诱导NOR1融合蛋白的表达,分子质量为43 kD;随着IPTG浓度提高,重组蛋白表达量增加。温度对NOR1蛋白原核表达有重要影响,低温条件(30℃)无法诱导NOR1蛋白表达。提高卡那霉素筛选浓度可以提高NOR1蛋白表达量。原核表达的NOR1重组蛋白绝大部分形成包涵体,采用6 mol/L盐酸胍溶解包涵体,通过Ni-IDE树脂纯化得到高纯度的His-NOR1重组蛋白。结论:构建了pET28b-NOR1原核表达载体。研究发现在37℃条件下,采用1 mmol/L IPTG,200μg/mL卡那霉素可以高效诱导NOR1蛋白表达。纯化得到高纯度的NOR1重组蛋白。
- 向波王理王卫李文娟易梅李小玲曾朝阳李桂源
- 关键词：鼻咽癌原核表达重组蛋白纯化
- 土质路堑高边坡稳定性分析和加固措施研究
- 李文娟
- 关键词：稳定性分析数值模拟有限元强度折减法
- NOR1是调节肿瘤细胞自噬/凋亡分子开关的氧化应激反应性蛋白
- NOR1是本实验室自主克隆的鼻咽癌易感基因，在鼻咽癌组织中显著下调，但其下调机制和转录调控规律尚未阐明。NOR1蛋白定位于线粒体和胞浆中，与OSCP蛋白存在直接交互作用;NOR1表达抑制鼻咽癌细胞的生长与增殖，并促进缺氧...
- 李文娟
- 关键词：鼻咽肿瘤基因表达病理细胞学
