李立伟
- 作品数：52 被引量：166H指数：9
- 供职机构：浙江大学医学院基础医学系更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金福建省自然科学基金浙江省教育厅科研计划更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学生物学文化科学更多>>
- 花鲈逆转指环虫病病理学研究被引量：5
- 2002年
- 对花鲈的逆转指环虫病进行了病理学研究 .结果表明 ,逆转指环虫寄生于花鲈的初级鳃丝 ,轻度感染导致鳃丝组织完整性的破坏 ;中度感染引起鳃丝组织增生、肿胀和融合 ;重度感染引起鳃丝组织坏死、崩解以及粘液细胞数量的极剧减少 ,并有粘液物质的排空 .研究还表明 。
- 李立伟杨文川
- 关键词：病理学寄生虫病致病机理寄生部位
- 泡状棘球蚴病病原生物学研究进展被引量：2
- 2004年
- 泡状棘球蚴病 (alveolarechinococcosis,AE)是一种重要的人兽共患寄生虫病。本文综述了其病原泡状棘球蚴的地理分布、宿主类别、传播情况及其发育生物学方面的研究情况 ,指出研究病原生物学的现实意义和今后仍需努力的方向。
- 卢明科李立伟
- 关键词：泡状棘球蚴病病原生物学发育生物学寄生虫病
- 蔷薇科植物果核油性提取物体内外抗呼吸道病毒效果的观察被引量：3
- 2006年
- 目的观察蔷薇科植物果核油性提取物体内外抗呼吸道病毒的效果。方法分别采用红细胞吸附抑制试验和细胞病变作用(CPE)检查,观察不同浓度油性提取物体外抗流感病毒A3株、冠状病毒OC43株和呼吸道合胞病毒E6株的作用。采用小鼠感染模型,观察不同浓度油性提取物滴鼻预防后,抵抗流感病毒A3株和冠状病毒OC43株致死性感染的效果。结果0.5%油性提取物作用1min、0.12%作用5min、0.06%作用10min均可完全抑制流感病毒A3株引起的鸡红细胞吸附现象;0.25%油性提取物作用1min、0.06%作用5min、0.03%作用10min均可完全抑制冠状病毒OC43株引起的小鼠红细胞吸附现象。1.0%油性提取物作用1min、0.25%作用5min、0.12%作用10min均可完全抑制呼吸道合胞病毒E6株引起的CPE。0.12%、0.25%和0.5%油性提取物滴鼻预防后,流感病毒A3株攻击小鼠的存活率分别为30%、90%和100%。0.06%、0.12%和0.25%油性提取物滴鼻预防后,冠状病毒OC43株攻击小鼠的存活率分别为30%、80%和100%。结论较低浓度的蔷薇科植物果核油性提取物即可显示出较强的体内外抗常见呼吸道病毒作用,但体内抗病毒作用有明显的有效剂量阈值。
- 罗冬娇李立伟蔡玲斐俞利萍严杰
- 关键词：呼吸道病毒抗病毒作用
- 梅氏新贝尼登虫钩毛蚴及成虫活力(单殖吸虫目:多室科)被引量：5
- 2002年
- 对梅氏新贝尼登虫 (Neobenedeniamelleni)的钩毛蚴和成虫的存活时间进行了研究 .结果表明 ,钩毛蚴在新鲜过滤海水中 4℃时可存活 6～ 98h ,2 5℃时可存活 1.5～ 2 5 .5h ,30℃时可存活 0 .5～ 14h ;将离体成虫置于新鲜过滤海水中 ,2 8℃时最长存活时间为 2 1h .在 2 5℃～ 2 8℃的水温条件下 ,该虫感染宿主后 ,16d后产卵 ,成虫虫体寿命约为
- 李立伟杨文川
- 关键词：寄生虫病
- 问号钩端螺旋体鞭毛蛋白相关蛋白FliH／I／Y／N基因原核表达和膜定位被引量：1
- 2008年
- 目的克隆问号钩端螺旋体（简称钩体）鞭毛相关蛋白编码基因fliH、fliI、fliY和fliN并构建其原核表达系统，制备表达产物抗血清并了解其蛋白的定位。方法以苯酚-氯仿法提取的问号钩体黄疸出血群赖型赖株基因组DNA为模板，用PCR扩增全长fliH、fliI、fliY和fliN基因片段，T-A克隆后测序，继而构建上述目的基因克隆的原核表达系统。采用SDS-PAGE和BioRad凝胶图像分析系统检查重组蛋白rFliH、rFliI、rFliY和rFliN的表达情况，Ni-NTA亲和层析法提纯目的表达产物。皮下免疫家兔获得4种目的重组蛋白抗血清，用ELISA和Western blot分别检测抗血清效价并了解抗血清与相应抗原结合的能力。采用免疫电镜技术对fliH、fliI、fliY和fliN进行定位。结果PCR扩增获得大小分别为924、1365、1065和318 bp的全长fliH、fliI、fliY和fliN基因片段，与报道的序列比较，其核苷酸和氨基酸序列相似性均为100％。所构建的原核表达系统均能有效地表达目的重组蛋白，其产量均约为20％。rFliH、rFliI、rFliY和rFliN蛋白免疫家兔后能产生抗体，其兔抗血清ELISA效价达到1：100000以上，并分别识别钩体相应重组蛋白和膜蛋白提取物而出现明显的Western杂交条带。fliH、fliI、fliY和fliN蛋白分布于问号钩体内膜、外膜或内外膜之间。结论本研究成功地构建了能高效表达问号钩体鞭毛相关蛋白fliH、fliI、fliY和fliN的原核表达系统，并获得了能有效识别上述蛋白抗原的高效价抗血清。鞭毛相关蛋白fliH、fliI、fliY和fliN是问号钩体内膜或外膜蛋白成分。
- 徐韩飞阮萍廖苏梅杨平毛亚飞李立伟严杰
- 关键词：问号钩端螺旋体原核表达
- 空肠弯曲菌mcp1／2／3基因原核表达及其产物与细菌趋化作用的相关性被引量：4
- 2009年
- 目的克隆空肠弯曲菌（Campy1obacter jejuni）接受甲基趋化蛋白（MCP）编码基因mcp1、mcp2和mcp3并构建其原核表达系统，建立空肠弯曲菌体外趋化模型并确定趋化诱导物质，了解MCPs与趋化诱导物之间的关系。方法PCR扩增mcp1、mcp2和mcp3基因片段，T-A克隆后测序。构建上述目的基因原核表达系统，SDS—PAGE和Bio-Rad凝胶成像分析系统检查目的重组蛋白rMCP1、rMCP2和rMCP3的表达情况，Ni—NTA亲和层析法提纯rMCPs。rMCPs免疫家兔获得抗血清，免疫扩散法测其效价。用饱和硫酸铵盐析法和DEAE-32离子交换法提纯IgG，经胃蛋白酶酶解和Sephadex G-100层析制备IgG F（ab′）2。建立HAP（hard—agar plus）法空肠弯曲菌体外趋化模型并检测8种物质的趋化诱导作用。采用基于IgG F（ab′）2封闭的趋化阻断试验，确定不同MCPs的功能及其差异。结果PCR扩增获得预期大小的mcp1、mcp2和mcp3基因片段，其核苷酸和氨基酸序列与文献报道完全相同。所构建的原核表达系统能有效地表达各rMCPs，其产量均约为细菌总蛋白的10％。rMCP1、rMCP2和rMCP3免疫家兔后能产生特异性抗体，其免疫扩散效价均为1：4。牛胆汁和脱氧胆酸钠（DOC）对空肠弯曲菌趋化有浓度依赖性诱导作用（P〈0．05）。MCP1和MCP2被其IgG F（ab′）2封闭后，空肠弯曲菌对DOC的趋化能力明显减弱（P〈0．05），MCP3被封闭后对空肠弯曲菌趋化能力无影响（P〉0．05）。结论本研究成功地表达了空肠弯曲菌MCPs蛋白。牛胆汁和DOC是诱导空肠弯曲菌趋化的信号物质，MCP1和MCP2可能参与该菌对DOC的趋化过程。
- 李志锋赵金方楼宏强毛亚飞李立伟林旭瑷严杰
- 关键词：空肠弯曲菌趋化
- 厦门海水养殖鱼类两种单殖吸虫感染新记录及流行情况被引量：4
- 2001年
- 近几年 ,在福建厦门西海域网箱养殖的高体鱼师鱼鳃部大量发现自然感染的日本轭联虫 (Zeuxaptajaponica) ,鱼群自然感染率达 40 .32 % ( 2 5/6 2 ) ,病鱼死亡率 1 0 %～ 2 0 % ,此病还有进一步扩散的趋势 .同一渔区的其它养殖鱼种未见自然感染本虫 .在同安渔区的养殖石斑鱼发现自然感染另一种单殖吸虫 ,经鉴定为石斑拟合片虫(Pseudorhabdosynochusepinepheli) ,鱼群自然感染率达 1 0 0 % ( 1 0 /1 0 ) 。
- 杨文川石磊李立伟
- 关键词：海水养殖鱼类
- 花鲈的菇茎指环虫病病理学研究被引量：6
- 2001年
- 对花鲈的菇茎指环虫病进行了病理学研究 ,结果表明菇茎指环虫寄生于花鲈的次级鳃丝 ,主要病理损害为机械性损伤 .轻度感染时 ,引起鳃丝上皮局部缺损 ;中度感染时 ,导致鳃丝细胞变性、鳃丝肿胀和融合 ;重度感染时 ,导致全鳃缺血 ,鳃丝结构疏松 .
- 李立伟杨文川
- 关键词：海水养殖病理学
- 问号钩端螺旋体属特异性外膜蛋白OmpL1和LipL21抗原表位预测及鉴定被引量：2
- 2008年
- 目的筛选问号钩端螺旋体（简称钩体）属特异性外膜蛋白OmpL1和LipL21有效T和B细胞联合抗原表位，为研制多抗原肽（multiple antigenic peptide，MAP）疫苗提供基础。方法采用生物信息学方法预测OmpL1和LipL21分子中T和B细胞联合抗原表位。采用PCR扩增候选联合抗原表位片段并分别构建其噬菌体展示系统。分别以rOmpL1或rLipL21、黄疸出血群赖株、钩体患者抗血清为一抗，采用Western blot检测各抗血清与目的表位的免疫反应性及其强度。结果通过抗原表位预测，选择了高分值的4个OmpL1和2个LipL21联合表位。经扩增获得了预期的各抗原表位片段，各目的表位序列均准确插入噬菌体PⅢ蛋白N端并有效表达。各抗血清均能识别上述6个联合表位。其中LipL21的97-112和176-184表位对任-抗血清均显示相似强度的杂交条带。综合4个OmpL1表位对3种抗血清的不同Western blot结果及其实际意义，杂交信号从强到弱依次为173-191、87-98、297-320和59-78表位。结论所研究的6个联合表位均分别为LipL21和OmpL1的有效抗原表位，其中LipL21的97-112、176-184和OmpL1的87-98、173-191表位可应用于钩体MAP疫苗研制。
- 林旭瑷潘建平罗依惠毛亚飞李立伟严杰
- 问号钩端螺旋体毒力相关蛋白InvA转录和表达特征的研究被引量：2
- 2009年
- 目的确定我国不同基因种问号钩端螺旋体（简称钩体）参考标准株携带毒力相关基因invA的情况，了解问号钩体赖株感染细胞前后invA基因转录和表达水平的变化。方法采用PCR检测4个不同基因种问号钩体株及双曲钩体PatocI株invA基因。克隆问号钩体全长irwA基因并测序，构建问号钩体黄疸出血群赖型赖株invA基因原核表达系统。Ni-NTA亲和层析法提纯目的重组蛋白rInvA后免疫家兔获得抗血清，免疫双扩散法检测其效价。建立问号钩体赖株感染人胚肾上皮细胞HEK293模型，采用荧光定量RT—PCR和Westernblot分别检测问号钩体赖株感染HEK293细胞前后invA基因的转录和表达水平的变化。结果4个不同基因种的问号钩体株均含有invA基因，双曲钩体PatocI株则否。4株不同基因种的问号钩体irwA基因核苷酸和氨基酸序列相似性分别为99．33％～100％和98．66％～100％。所构建的原核表达系统能有效地表达rInvA。rInvA兔抗血清免疫双扩效价为1：16。问号钩体赖株感染HEK293细胞30min以后可大量黏附于细胞表面。问号钩体赖株感染HEK293细胞30min时，invA基因mRNA水平明显上调，45min时达到峰值，然后逐渐下降。问号钩体赖株感染HEK293细胞后45min和60min时可检出InvA蛋白，感染前及感染90min以后检测结果均为阴性。结论invA基因是致病性问号钩体所特有的基因。invA基因具有宿主细胞接触式表达及瞬时表达的特点，与问号钩体侵人宿主细胞密切相关。
- 罗依惠陈铭李立伟钱景严杰
- 关键词：问号钩端螺旋体
