李莲瑞
- 作品数：163 被引量：303H指数：9
- 供职机构：塔里木大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金塔里木大学校长基金国际科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生轻工技术与工程更多>>
- 普通PCR与TD-PCR扩增叶尔羌高原鳅抗菌肽Hepcidin基因的比较被引量：1
- 2011年
- 为了比较普通PCR和降落PCR(TD-PCR)扩增Hepcidin基因的效果,通过Trizol法提取叶尔羌高原鳅肝胰脏总RNA并合成cDNA,分别利用普通PCR和降落PCR扩增Hepcidin基因片段。结果显示,降落PCR能有效扩增叶尔羌高原鳅Hepci-din。测序结果显示:叶尔羌高原鳅抗菌肽Hepcidin基因与普通鱼类基因同源性达90%,而普通PCR则不能扩出明显目的条带。本研究结果表明在相同反应体系中,降落PCR在不影响PCR特异性的条件下,能提高扩增效率,可用于扩增普通PCR难以扩增的基因片段。
- 刘书东王娟娟陈根元李莲瑞
- 关键词：降落PCR叶尔羌高原鳅HEPCIDIN基因
- 中国卡拉库尔羊注射双胎苗效果试验被引量：3
- 1996年
- 对农一师十三团的 750只中国卡拉库尔母羊注射双胎苗 ,双胎率达到2 5.73% ,而对照羊双胎率仅 2 .8% ,每只注射双胎苗的母羊可以净增加收入 2 8.54元。同时证明 ,初产母羊双胎率低 ,仅 1 2 .36 % ,双羔死亡率达 2 7.2 7% ;6岁以上老母羊双胎率虽不低 ,但双羔死亡率高达 32 .1 4% ;3～ 5岁母羊的双胎率均接近 30 % ,双胎死亡率却在 1 0 %以下 ,效果最好。
- 刘大同崔玉珍胡正明邱宣成郭新怀杨建军孙国君李莲瑞瞿胜张贵川包超义
- 关键词：双胎苗双羔率
- 利用CRISPR/Csa9技术构建溶酶体运输调节因子基因缺陷C57BL/6小鼠
- 2018年
- 目的获得自然杀伤(NK)细胞缺陷的小鼠动物模型,并研究溶酶体运输调节因子(Lyst)基因的功能。方法采用CRISPR/Cas9技术敲除C57BL/6小鼠的Lyst基因:针对小鼠Lyst基因编码区第50个外显子,设计CRISPR/Cas9靶点引物(sgRNA),并重组构建pUC57-Lyst-sg RNA载体。将重组质粒体与Cas9质粒分别利用T7 RNA聚合酶体外转录为mRNA,并按比例显微注射入小鼠受精卵,将受精卵移植到受体动物。获得子代小鼠后,利用PCR扩增和测序方法筛选Lyst基因发生改变的动物个体。结果显微注射移植后获得7只F0代基因敲除小鼠,且毛色均发生了明显的变化。结论利用CRISPR/Cas9技术可以构建Lyst基因缺陷小鼠,外观表型与已有的文献报道一致。
- 艾东旭钟德刚孙菲李钰李崇秦佟童高梦樵董施施孙兆增李莲瑞
- 关键词：基因敲除
- 用血清酸滴定法对3个品种绵羊进行早期妊娠诊断的研究被引量：5
- 2011年
- [目的]为了建立一种快速简易的绵羊早期妊娠诊断方法,提高母羊的繁殖效率,降低繁殖成本。[方法]选择1 317只母羊,为新疆地方品种多浪羊、策勒羊和卡拉库尔羊。于人工授精配种后16～30 d,采用血清酸滴定法进行了早期妊娠诊断。[结果]在试验绵羊中,共检出妊娠母羊1 128只,未妊娠羊189只。与实际妊娠结果相比,妊娠符合率为89.88%(1 013/1 128),未孕符合率为96.83%(183/189),总符合率为90.81%(1 196/1 317)。经卡方检验,这些指标在3个品种母羊或2个品种母羊间差异均不显著。[结论]血清酸滴定法诊断时间早、方法简便、结果准确,可以用于绵羊的早孕诊断,极具实用性和推广价值。
- 郑毛亮李广陶大勇吐尔逊.库尔班李莲瑞
- 关键词：早期妊娠诊断绵羊
- 新疆多浪羊白细胞介素8 cDNA的克隆测序及其变异SNP的分析被引量：1
- 2011年
- 采集多浪羊的血液,分离白细胞,提取总RNA,用白细胞介素8(IL-8)的引物进行两步法的RT-PCR扩增、克隆与酶切鉴定,测序后进行序列比对,与NM_001009401.1同源性高达99%,初步判定为多浪羊的IL-8编码全长cDNA。通过序列比对,发现多浪羊IL-8的基因起始密码子上游第七个碱基发生突变,在NM_001009401.1中是T,而在测序的多浪羊的IL-8中是C。对该测序序列进行数据库搜索和序列比对,发现该碱基变异很独特,并对该变异可能对mRNA蛋白翻译的影响进行了初步的分析。
- 杨威华左文斌潘辉贺艳艳刘书东徐丽君王娟娟李莲瑞
- 关键词：多浪羊白细胞介素8SNPMRNA二级结构
- 高致病性蓝耳病毒与低致病性蓝耳病毒RT-PCR检测方法被引量：7
- 2011年
- 将高致病性蓝耳病和低致病性蓝耳病病毒接种于Marc145细胞培养并观察细胞病变情况,将有细胞病变的病毒进行连续传代培养。根据高致病性蓝耳病与低致病性蓝耳病在NSP2基因上有87 bp连续缺失,从NCBI上下载7对高致病性蓝耳病保守序列设计一对引物。通过RT-PCR方法进行检测证明实验室所保存的这两株毒株分别为高致病性蓝耳病和低致病性蓝耳病,并且建立了高致病性蓝耳病与低致病性蓝耳病的检测方法。
- 顾海洋左文斌贺艳艳潘辉刘书东李莲瑞
- 关键词：蓝耳病NSP2基因RT-PCR
- 鲤鱼外周血白细胞蛋白酶体激活因子PA28全长cDNA的克隆与差异表达分析被引量：2
- 2006年
- 对DD-RTPCR获得的差异显示片段C15进行地高辛标记后作为探针,对有丝分裂原刺激的鲤鱼外周血白细胞cDNA文库进行核酸杂交筛选,从0.8×104个重组噬菌体中,经过2轮筛选获得阳性克隆DM7。测序分析表明,该阳性克隆长1 097 bp,具有完整的开放阅读框架,为编码鲤鱼蛋白酶体激活因子PA28的全长cDNA,编码249个氨基酸,含有PA28的α和β亚单位功能结构域,与已报道的斑马鱼的蛋白酶体激活因子PA28的同源性达93%。分离鲤鱼外周血白细胞,经有丝分裂原在不同条件下刺激后,利用Trizol提取总RNA,根据得到的PA28全长cDNA序列和鲤鱼β-actin的序列,设计引物,采用半定量反转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法测定白细胞中PA28基因mRNA表达量的变化。结果表明,白细胞经LPS、ConA刺激后,PA28基因的mRNA表达量有所增加,但并不随时间的延长而持续增加。
- 李莲瑞卢强付宝权谭业平邓洪宽崔国祯夏慧卿刘明远韩文瑜
- 关键词：鲤鱼CDNA克隆
- 一种预防溶血性羊链球菌病的中药制剂
- 本发明公开了一种预防溶血性羊链球菌病的中药制剂，包括以下重量份数配比的原料：甘草：5～20份、茯苓：15～25份、五味子：8～16份、板蓝根：6～18份、穿心莲：12～22份、败酱草：8～18份、石榴皮：20～35份，配...
- 李莲瑞阿迪莱·卡哈曼陈荟旭张秋林孙鹏亮孙世浩王岚
- 新疆多浪羊IL-1β基因地高辛探针的标记和敏感性检测
- 2015年
- 【目的】IL-1β是一种多效的促炎因子,在细胞因子炎性反应中为重要介质,处于介导炎性反应的重要因子,在造血和免疫活性中都发挥重要的作用。该实验结果为进一步研究绵羊分子免疫学,从多浪羊外周血淋巴细胞c DNA文库的筛选基因,寻找与IL-1β相关的新基因奠定基础。【方法】将构建好的多浪羊的p MD-18T-IL-1β质粒[1]进行PCR扩增,经过切胶回收,目的基因的浓缩后,采用罗氏地高辛标记和检测试剂盒标记IL-1β基因,获得IL-1β地高辛探针,进行敏感性检测,在Hybond N+膜上显影,计算探针浓度。【结果】计算出标记后的探针浓度为17.1 g/m L。【结论】通过southern杂交可以得知,Hybond N+膜上有IL-1β基因的双链DNA,标准杂交液中为DIG标记的IL-1β基因单链DNA,通过避光显色,在Hybond N+膜有深紫色的杂交条带,证明探针的浓度达到标准浓度。
- 曾国航徐宏伟潘伊微贾山岭曹玉华李莲瑞
- 关键词：地高辛
- 鸡源阪崎克罗诺杆菌的分离鉴定和生物学特性分析
- 2024年
- 为确定新疆阿克苏地区某鸡场鸡只精神不振、采食量减少和死亡的原因,本试验对采集自该鸡场病死鸡的肝脏等器官进行病原的分离鉴定、形态学观察、生化鉴定和16S rRNA基因PCR鉴定,通过PCR检测毒力基因的携带情况,并进行动物回归试验和药物敏感性试验以分析其致病力和耐药性。结果显示,从病死鸡内脏器官中分离到1株革兰阴性短杆菌,鉴定该分离菌株为阪崎克罗诺杆菌(Cronobacter sakazakii);该分离菌株携带sip和ompX两种毒力基因;在3~7 h处于对数生长期;可感染雏鸡,并引起雏鸡严重脱毛和死亡,死亡雏鸡以肝脏肿大出血和肺脏有出血点为主要病理变化,与自然发病鸡症状一致;对替加环素、阿米卡星和多黏菌素B表现为敏感,对多西环素、链霉素和新霉素表现为中介,对其他18种抗生素表现为耐药。结果表明,分离菌株对动物具有潜在的致病性。本试验首次在病死鸡中分离出阪崎克罗诺杆菌,扩大了鸡体内致病微生物的种类,并对该菌的生物学特性进行了初步探究,以期对动物源阪崎克罗诺杆菌感染的临床用药和防控提供参考。
- 候梦哲张家浩刘祥杰邢潇月李虎李莲瑞
- 关键词：鸡源耐药性分析毒力基因
