杜玮
- 作品数：14 被引量：11H指数：2
- 供职机构：天津医科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金天津市自然科学基金中国博士后科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>
- Aiolos通过抑制p66Shc促进肿瘤细胞的锚定非依赖性生长
- 目的：探讨淋巴细胞特异性转录因子Aiolos在促进实体肿瘤细胞实现远端转移过程中的作用，及其发挥作用的机制。方法：利用免疫组化实验研究临床肿瘤标本中Aiolos的表达水平并分析其与患者生存期间的相关性;利用Microar...
- 李西川徐昭杜玮姚智刘喆
- 关键词：小细胞肺癌淋巴细胞发育P66SHC
- 肿瘤转移抑制基因p66Shc在小细胞肺癌细胞中失活的机制研究
- 小细胞肺癌是肺癌中恶性程度最高的一种,转移快,存活率低。我们发现ShcA家族中的成员p66在小细胞肺癌细胞中表达缺失,将p66基因导入p66表达缺失的鼠肺癌细胞(LLC1)中并通过鼠尾静脉注射入小鼠体内,能够100%抑制...
- 李西川徐昭杜玮刘喆
- 关键词：小细胞肺癌P66SHC增强子
- 文献传递
- 转录因子CTCF抑制pro-B细胞中Igκ基因的重排
- 2013年
- 目的:研究CCCTC位点结合蛋白(CTCF)对Igκ基因重排的影响。方法:采用RNA干扰技术特异性地下调CTCF的表达,然后利用脂多糖(LPS)诱导祖B细胞(pro-B cell)38B9的分化。利用PCR来定量分析不同的Vκ基因hf24和Vκ21G的重排情况。结果:CTCF在38B9细胞中表达下调后hf24和Vκ21G的重排都有所上升。结论:在pro-B细胞中CTCF对Igκ基因的重排起抑制作用。
- 秦利涛李西川杜玮王豪刘喆
- 关键词：基因重排
- 在人类非小细胞肺癌细胞A549中沉默K-Ras降低自噬水平被引量：2
- 2013年
- 目的:在人的非小细胞肺癌细胞A549中通过降低K-Ras表达研究其在自噬中的作用。方法:磷酸钙方法转染K-Ras-shRNA,Western blot检测自噬标志物的变化。结果:在A549细胞中,通过K-Ras-shRNA慢病毒转染显著地降低了K-Ras的蛋白水平,同时自噬标志物LC3II水平降低,自噬调控分子Beclin-1水平降低。结论:K-Ras knockdown引起细胞自噬水平的降低。
- 郑志超李西川杜玮刘喆
- 关键词：突变体慢病毒自噬
- 肺癌细胞中PIK3AP1基因表达变化及其过表达对细胞增殖、侵袭、迁移的影响
- 2020年
- 目的观察肺癌细胞中PIK3AP1基因的表达情况,分析其表达与患者预后的关系,以及PIK3AP1基因过表达对肺癌细胞增殖、侵袭、迁移能力的影响。方法体外培养正常支气管上皮细胞系HBEC,非小细胞肺癌细胞系A549、HCC827、H358,小细胞肺癌细胞系H69、H526、H82。采用RT-PCR法检测上述细胞中PIK3AP1 mRNA的表达。利用Kaplan-Meier plotter在线生存分析数据库,对肺癌组织中PIK3AP1 mRNA表达与患者预后的相关性进行分析。取不表达PIK3AP1的肺癌细胞,将其分为观察组和对照组,以慢病毒转染技术分别转染PIK3AP1过表达载体和空载体,采用BrdU法观察细胞增殖能力,Transwell实验观察细胞侵袭能力,细胞划痕实验观察细胞迁移能力,Western blotting法检测AKT、p-AKT蛋白表达。结果PIK3AP1基因在小细胞肺癌细胞系H69、H526、H82中高表达,在非小细胞肺癌细胞系A549、HCC827、H358中低表达或不表达,在正常支气管上皮细胞中不表达。PIK3AP1基因高表达和低表达肺癌患者的中位生存期分别为60.73、92.63个月,PIK3AP1基因高表达者预后较差(P<0.05)。取不表达PIK3AP1的A549细胞进行转染,与对照组比较,观察组细胞增殖能力增高,侵袭能力增强(P均<0.01),迁移能力无明显变化(P>0.05);p-AKT蛋白表达增高(P<0.01),AKT蛋白表达无明显变化(P>0.05)。结论PIK3AP1在具有高转移能力的小细胞肺癌细胞中高表达,其高表达提示预后不良;PIK3AP1可能通过激活PI3K/AKT信号通路促进肺癌细胞的增殖和侵袭。
- 杜玮黄秋敏严飞
- 关键词：肺癌P-AKT细胞增殖细胞侵袭细胞迁移
- SpiB在肺癌发生发展中的功能及调控研究
- 目的:转录因子SpiB是ETS家族蛋白的成员之一,主要表达于淋巴细胞中,对B细胞的发育和成熟、T细胞的发育以及浆细胞样树突细胞的生存和发育起到了重要作用。SPIB基因敲除的小鼠不仅导致了T细胞依赖的抗原激活的缺陷,阻断了...
- 杜玮
- 关键词：肺癌
- 文献传递
- SIRT1-shRNA慢病毒表达载体转染对A549细胞生物学行为的影响被引量：2
- 2015年
- 目的探讨SIRT1-shRNA慢病毒表达载体转染对人非小细胞肺癌A549细胞SIRT1基因表达、黏附能力、迁移能力及E-cadherin、β-catenin mRNA和蛋白表达量的影响。方法构建SIRT1-shRNA慢病毒表达载体,并用其转染A549细胞。对照组转染277空载体,观察组转染277-i SIRT1。用RT-PCR法检测两组细胞SIRT1 mRNA表达,用细胞黏附实验检测两组细胞黏附能力,划痕实验检测细胞迁移能力,RT-PCR法检测细胞内E-cadherin、β-catenin mRNA表达,Western blot法检测细胞内E-cadherin、β-catenin蛋白表达。结果观察组、对照组A549细胞SIRT1 mRNA分别为0.48±0.26、1.00±0.00(P<0.05),黏附细胞数分别为(196.6±9.8)、(125.6±9.8)个(P<0.05),细胞相对迁移率分别为65%±2%、100%±0(P<0.05),E-cadherin蛋白表达量分别为1.27±0.16、1.00±0.00(P<0.05),β-catenin蛋白表达量分别为1.24±0.13、1.00±0.00(P<0.05)。结论 SIRT1-shRNA慢病毒表达载体可明显下调A549细胞SIRT1表达,提高其下游基因E-cadherin、β-catenin mRNA和蛋白表达量,增强细胞黏附能力,降低细胞迁移能力。
- 孙硕文朱之燕杜玮王豪刘喆
- 关键词：E-CADHERIN蛋白Β-CATENIN蛋白细胞黏附
- Ox-LDL受体CD36与糖尿病大鼠肾小管损伤的关系被引量：4
- 2016年
- 目的：本研究通过观察糖尿病大鼠肾组织氧化型低密度脂蛋白（ Ox-LDL）受体CD36的表达及Ox-LDL处理大鼠肾小管NRK-52E细胞后的CD36表达变化,探讨糖尿病肾病进展过程中CD36与肾小管损伤、肾纤维化的关系。方法高糖高脂联合小剂量链脲佐菌素诱导建立糖尿病合并高脂血症大鼠模型,切取肾脏用于CD36表达的免疫组化分析,同时对肾组织硬化及纤维化指标进行半定量评定。50 mg/L OxLDL分别处理NRK-52E细胞5、10、24和48 h或100和150 mg/L的OxLDL处理NRK-52E细胞2、3 d后后收集细胞,Western印迹法检测CD36蛋白水平。结果与对照组比较,糖尿病组大鼠肾组织中CD36表达明显升高,CD36主要表达在肾小管。糖尿病组肾小管损伤分数（STI）明显高于对照组（5.54±1.5 对0.65±0.15,P＆lt;0.05）。 OxLDL呈剂量时间依赖性地刺激肾小管NRK-52E细胞CD36的表达。结论 CD36在糖尿病大鼠肾小管的表达明显增高,并与STI一致,OxLDL增加肾小管NRK-52E细胞CD36的表达,提示Ox-LDL受体CD36表达可能与实验性糖尿病大鼠的肾小管损伤存在关联。
- 龙香菊孙亚楠刘喆闫铁昆赵伟贾俊亚吴晓明杜玮林珊张宏
- 关键词：肾小管氧化型低密度脂蛋白CD36
- 在A549细胞中靶向p66^(Shc)shRNA的沉默效应被引量：3
- 2012年
- 目的:在人非小细胞肺癌细胞A549细胞中探讨shRNA靶向慢病毒对信号衔接蛋白p66Shc的沉默效应,以更好地研究p66Shc的功能。方法:半定量RT-PCR和Western blot检测p66Shc下调后的变化情况,BrdU标记实验检测细胞的增殖变化情况。结果:在A549细胞中,运用p66Shc-shRNA干扰可以实现p66Shc在mRNA和蛋白水平的下调作用,同时发现A549细胞的增殖显著降低。结论:经过慢病毒载体介导的p66Shc-shRNA在人非小细胞肺癌A549中可获得高效转染效果,并能产生特异性的基因沉默效应,而且对细胞的增殖有显著的抑制作用,为进一步研究p66Shc功能提供了实验手段。
- 陈娜王晓洋杜玮孙亚楠李西川马振毅刘喆
- 关键词：P66SHCSHRNA基因沉默
- 衔接蛋白p66^(Shc) CH2结构域分泌表达载体的构建及其表达
- 2012年
- 目的:构建可以产生分泌p66ShcCH2结构域重组蛋白的质粒,期望进一步研究p66Shc的功能。方法:利用定点诱变的方法在pDisplay中去除HA和Myc表达序列,但保留小鼠Igκ信号肽和PDGFR跨膜结构域。在小鼠Igκ信号肽后是外源CH2结构域、凝血因子Xa识别位点和Flag序列,与PDGFR跨膜结构域形成融合基因。PCR扩增得到完整表达片段后用于慢病毒载体上的克隆,之后在包装细胞Fx293中产生重组慢病毒用于后续实验。结果:经测序证实所构建的质粒序列与预期序列一致,酶切和PCR验证质粒构建正确,体外感染细胞后产生重组蛋白。结论:成功构建体外可以产生p66ShcCH2结构域的慢病毒载体,为体外产生重组分泌的CH2多肽和体外鉴定与p66ShcCH2结构域结合的蛋白分子实验奠定基础。
- 薛珊珊杜玮孙亚楠李西川马振毅
- 关键词：P66SHC分泌蛋白
