杨斌
- 作品数：16 被引量：130H指数：7
- 供职机构：南昌大学第四附属医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金江西省自然科学基金江西省卫生厅中医药科研基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 双密达莫抑制流感病毒A(H_1N_1)核蛋白基因作用的实验研究被引量：2
- 2012年
- 目的探讨双密达莫抑制流感病毒A(H1N1)核蛋白基因(NPG)的作用。方法采用荧光定量RT-PCR法检测药物抑制流感病毒NPG效应。结果药物对MDCK细胞的毒性范围:1∶64稀释为无毒界限。病毒半数细胞感染量(TCID50)为6.5.25μL-1。直线相关性分析结果显示:阈值循环数与不同浓度的定量模板的对数呈负相关(r=-0.999,P<0.05)。病毒对照组RNA水平明显高于实验组[(5.50±1.82)×109拷贝数.μL-1 vs(8.59±2.17)×107拷贝数.μL-1,P<0.01)]。结论双密达莫能阻断流感病毒核蛋白的合成,为防治流感提供了分子实验依据。
- 杨慧杨斌孙坚王农荣何士勤周南进熊跃斌李剑琦俞红冷红文
- 关键词：双密达莫核蛋白基因
- 双黄连抑制甲1型流感病毒诱导细胞凋亡的机制研究被引量：15
- 2007年
- 目的:研究双黄连抑制甲1型流感病毒诱导细胞凋亡的机制。方法:将宫颈癌(Hela)细胞分成4组:病毒对照组、实验组、细胞对照组、药物对照组,采用流式细胞术计算细胞凋亡的百分率。结果:实验组细胞凋亡的百分率与病毒对照组比较有非常显著性差异(P<0.01)。结论:双黄连可抑制甲1型流感病毒诱导Hela细胞凋亡。
- 孙坚王农荣杨斌何士勤刘晓静
- 关键词：流感病毒凋亡流式细胞术宫颈癌细胞双黄连
- 连翘苷对甲型流感病毒核蛋白基因表达的影响研究被引量：53
- 2012年
- 目的探讨连翘苷对甲型流感病毒核蛋白(NP)基因转染后表达的影响。方法将甲型流感病毒NP基因转染Hela细胞,用甲型流感病毒胶体金法检测连翘苷对转染后细胞内和上清核蛋白表达情况,用实时定量反转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测Hela细胞内NP基因的拷贝数。结果 NP重组质粒组甲型流感病毒核蛋白含量高。空质粒组、脂质体组、Hela细胞组基本不含甲型流感病毒核蛋白。连翘苷组上清无或可能含有微量核蛋白。连翘苷组胞内甲型流感病毒含量不高。RT-PCR校正曲线相关性为0.998,效率为97.4%。重复4次转染后48 h连翘苷组NP基因表达量为(2.1±0.3)×105拷贝数/μl,NP重组质粒组NP基因表达量为(61.5±15.0)×105拷贝数/μl,连翘苷组NP基因表达量低于NP重组质粒组,差异有统计学意义(t=7.672,P<0.05)。结论连翘苷可以抑制甲型流感病毒NP基因转染后表达。
- 段林建张清王农荣杨斌何士勤孙坚
- 关键词：连翘苷甲型流感病毒NP基因
- 不同连翘制剂对甲型流感病毒NP基因转染后表达的影响被引量：12
- 2015年
- 目的:观察连翘苷、连翘醇提液、连翘水煎剂等3种连翘制剂对甲型流感病毒甲1型流感病毒核蛋白(nucleoprotein,NP)基因转染后表达的影响。方法:将甲型流感病毒NP基因转染Hela细胞,用甲型流感病毒胶体金检测3种连翘制剂对转染后细胞内和上清核蛋白表达情况,用RT-PCR检测转染后Hela细胞内NP基因的拷贝数。结果:NP重组质粒组上清胶体金检测为阳性,连翘苷组上清为阴性、细胞内为弱阳性;连翘水煎剂及连翘醇提物组上清均为弱阳性。连翘苷组NP基因表达量较NP重组质粒组减少(P<0.05)。结论:连翘苷抑制甲型流感病毒NP基因转染后表达作用最强。
- 段林建胡伶清张清杨斌何士勤孙坚
- 关键词：连翘苷甲型流感病毒NP基因
- 双黄连抑制流感病毒甲_1型基因的研究被引量：3
- 2009年
- 目的建立实时荧光定量RT-PCR检测流感病毒甲1型多聚酶蛋白(PA)基因,了解双黄连作用病毒的效应。方法采用实时荧光定量RT-PCR法标准曲线测药物抑制甲1型PA病毒基因效应。结果以实时荧光RT-PCR法,重复测7次取平均值,对照组病毒基因为3.62×106±0.90拷贝数/mg,试验组病毒基因为4.57×105±1.23拷贝数/mg。发现病毒对照组基因明显高于试验组(P<0.001)。结论提示双黄连可抑制流感病毒甲1型基因。
- 孙坚王农荣杨斌何士勤
- 关键词：双黄连流感病毒RT-PCR
- 鱼腥草对甲1型流感病毒核蛋白基因作用的实验研究被引量：15
- 2008年
- 目的探讨鱼腥草对甲1型流感病毒核蛋白基因的作用。方法在甲1型流感病毒核蛋白基因保守区设计引物,对其进行筛选,同时对荧光定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)条件和反应体系进行优化。设病毒对照组、药物对照组、细胞对照组和实验组,采用荧光定量RT-PCR法测定鱼腥草对甲1型流感病毒基因的效应。结果病毒对照组细胞出现细胞病变(CPE),血凝滴度为阳性,其他组无CPE,血凝滴度均为阴性。以荧光定量RT-PCR法重复5次取平均值,实验组RNA测定结果为(2.6±0.8)×106拷贝数/μgRNA,对照组为(2.9±1.2)×109拷贝数/μg RNA,两组比较差异有统计学意义(P<0.01)。结论鱼腥草可抑制甲1型流感病毒核蛋白基因的表达。
- 孙坚王农荣杨斌何士勤
- 关键词：正粘病毒科鱼腥草逆转录聚合酶链反应基因
- 黄芩苷联合连翘苷对甲型流感病毒核蛋白基因表达的影响被引量：13
- 2018年
- 目的病毒的高变异率,使得抗病毒药物的研发显得非常重要,文中探讨黄芩苷联合连翘苷对甲型流感病毒核蛋白(Nucleoprotein,NP)基因表达的影响。方法通过瞬时转染技术将甲型流感病毒核蛋白真核重组质粒pc DNA3.1(+)/核蛋白导入Hela细胞以建立甲型流感病毒核蛋白真核表达载体,检测黄芩苷(15.625μg/m L)联合连翘苷(12.5μg/m L)组核蛋白基因表达量。选用低、中浓度的黄芩苷(IC25、IC50)联合低、中、高浓度的连翘苷(IC25、IC50、IC75)进行药物联合实验,实验分为Hela细胞对照组;脂质体对照组;重组质粒转染组;黄芩苷IC25+连翘苷IC25组;黄芩苷IC25+连翘苷IC25组;黄芩苷IC25+连翘苷IC75组;黄芩苷IC50+连翘苷IC50组;黄芩苷IC50+连翘苷IC50组;黄芩苷IC25+连翘苷IC75组。转染后使用各实验组药物进行干预,继续培养48 h后,采用反转录-实时荧光定量PCR(RT-qPCR)测定各实验组Hela细胞内核蛋白基因的拷贝量,评价黄芩苷联合连翘苷对靶细胞核蛋白基因表达的影响,并分析药物联合作用效果。结果重组质粒转染组核蛋白基因表达量为(62.868±13.587)×104copies/μL,Hela细胞对照组为(2.131±0.172)×104copies/μL,脂质体对照组为(1.627±0.489)×104copies/μL,黄芩苷联合连翘苷组为(7.596±2.066)×104copies/μL。黄芩苷IC25+连翘苷IC25组、黄芩苷IC25+连翘苷IC50组、黄芩苷IC25+连翘苷IC75组对靶细胞核蛋白基因表达的抑制率分别为:(37.87±9.11)%、(58.65±5.53)%、(79.12±5.35)%。通过Compu Syn软件分析药物联合指数CI分别为:1.242、0.954、0.947。黄芩苷IC50+连翘苷IC25组、黄芩苷IC50+连翘苷IC50组、黄芩苷IC50+连翘苷IC75组对靶细胞核蛋白基因表达的抑制率分别为:(62.00±4.26)%、(70.87±3.06)%、(83.00±2.90)%。通过Compu Syn软件分析药物联合指数CI分别为:0.895、0.855、0.892。黄芩苷联合连翘苷对核蛋白基因的表达的抑制作用总体表现为协同作用,低浓度黄芩苷与�
- 黄智生杨斌张清孙坚
- 关键词：黄芩苷连翘苷基因表达
- 双黄连抑制流感病毒甲_1型基因的研究被引量：8
- 2009年
- 目的通过对实时荧光定量RT-PCR检测流感病毒甲1型多聚酶蛋白(PA)基因,了解双黄连作用病毒的效应。方法采用实时荧光定量RT-PCR法标准曲线测药物抑制甲1型PA病毒基因效应。结果以实时荧光RT-PCR法,重复测7次取平均值,对照组病毒基因为3.62×106±0.90拷贝数/ug,试验组病毒基因为4.57×105±1.23拷贝数/mg。发现病毒对照组基因明显高于试验组(P<0.001)。结论提示双黄连可抑制流感病毒甲1基因。
- 孙坚王农荣杨斌何士勤
- 关键词：双黄连流感病毒实时荧光定量RT-PCR基因
- 黄芩总黄酮对甲型流感病毒核蛋白表达的影响被引量：7
- 2012年
- 目的探讨黄芩总黄酮(Total flavonoids of Scutellaria baicalensis Georgi,TFSB)对甲型流感病毒核蛋白(NP)的干预作用。方法本实验设HeLa细胞组、pcDNA3.1(+)空载体组、pcDNA3.1(+)/NP组、TFSB组,其中pcDNA3.1(+)空载体组、pcDNA3.1(+)/NP组分别通过瞬时转染将重组质粒pcDNA3.1(+)、pcDNA3.1(+)/NP转染到HeLa细胞中;TFSB组在将重组质粒pcDNA3.1(+)/NP转染到HeLa细胞的同时使用TFSB进行药物干预。转染48 h后,采用胶体金免疫层析试纸法测维持液中NP的表达,荧光定量RT-PCR测NP基因起始核酸量。结果胶体金免疫层析试纸法测NP表达示:pcDNA3.1(+)/NP组、TFSB组为阳性;荧光定量RT-PCR示:pcDNA3.1(+)/NP组和TFSB组NP基因起始拷贝数分别为(8.90±2.53)×106copies/μl、(6.15±1.49)×106copies/μl,采用t检验进行统计学分析:差异无统计学意义(P>0.05)。结论黄芩总黄酮对甲型流感病毒NP基因和NP的表达没有影响。
- 张清杨斌王农荣段林建何士勤孙坚
- 关键词：黄芩总黄酮核蛋白抗流感病毒药瞬时转染
- 绞股蓝增强红细胞免疫功能的研究被引量：1
- 2007年
- 目的探讨绞股蓝对RCIA的影响。方法采用红细胞C36受体试验,测定红细胞免疫吸附力(RCIA)。结果恶性肿瘤病人的RCIA与正常对照组比较明显不同(P<0.01),但是,经绞股蓝处理后,病人的RCIA显著升高(P<0.01)。结论绞股蓝具有增强红细胞免疫粘附能力。
- 杨斌孙坚王农荣杨慧何士勤
- 关键词：绞股蓝红细胞免疫恶性肿瘤
