杨晓容
- 作品数：5 被引量：38H指数：3
- 供职机构：中国药科大学药学院药物制剂研究所更多>>
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- 壳聚糖纳米粒作为基因载体的研究:影响转染效率的因素被引量：7
- 2008年
- 目的：以增强型绿色荧光蛋白质粒（pEGFP）为报告基因，探讨影响壳聚糖（CS）介导的基因转染率的因素。方法：复凝聚法制备pEGFP／CS纳米粒，选用HEK293细胞，考察CS相对分子质量、CS中的氨基与pEGFP中的磷酸基的比值（N／P比）、纳米粒粒径、介质pH值和血清对转染率的影响。结果：相对分子质量5×10^3的CS获得较高转染率；转染率随N／P比增加而提高；介质pH≤6．8有利于转染；在230～1290nm范围，粒径对转染效率无影响；CS介导的转染不受血清影响。结论：CS相对分子质量、N／P比和介质pH值是影响转染率的因素，低相对分子质量水溶性CS有利于提高转染。
- 张淑芸袁喜英杨晓容宗莉
- 关键词：壳聚糖PEGFP纳米粒转染效率
- 壳聚糖纳米粒作为基因载体的研究:粒径对转染效率的影响被引量：11
- 2007年
- 研究粒径对壳聚糖（chitosan，CS）纳米粒介导的转染效率的影响。通过调整CS溶液加入质粒基因（plasmid DNA，pDNA）溶液的速度和涡旋时间制备250，580和1300nm粒径pDNA/CS纳米粒，研究粒径对CS介导的细胞转染效率的影响。为深入探讨粒径对转染效率的影响，考察了3种粒径pDNA/CS纳米粒的药剂学性质，对抗核酸酶作用和细胞对纳米粒的吸附和摄取行为。结果表明：本文制备的3种粒径纳米粒的药剂学性质和凝聚pDNA的能力等特性基本无差别，均能有效保护pDNA免受核酸酶降解；在HEK293细胞中的转染效率无显著差异；与细胞共孵育4h，流式细胞仪测定的三者细胞摄取率与摄取量相似；荧光显微图像显示3种粒径纳米粒均以小聚集体形式吸附于细胞表面，激光扫描共聚焦显微图像显示直径约为2μm小聚集体较易被细胞内吞入胞。因此粒径在250-1300nm中对壳聚糖纳米粒介导的细胞转染率基本无影响。
- 杨晓容宗莉袁喜英
- 关键词：纳米粒PDNA粒径转染效率
- 荧光探针示踪pDNA/壳聚糖纳米粒在细胞内转运被引量：2
- 2008年
- 目的采用荧光探针追踪质粒DNA(pDNA)/壳聚糖(CS)纳米粒在细胞内转运轨迹,分析CS介导的细胞转染屏障。方法绿色荧光蛋白质粒基因作为报告基因进行体外转染实验,用异硫氰酸荧光素分别标记pDNA和CS,荧光显微镜下观察细胞对pDNA/CS纳米粒的吸附,流式细胞技术测定细胞对pDNA/CS纳米粒的摄取率,激光扫描共聚焦显微镜下观察pDNA/CS纳米粒在细胞内转运和入核过程。结果pDNA/CS纳米粒以小聚集体形式吸附在细胞表面,细胞吸附受介质pH值的影响。流式细胞仪定量分析表明,细胞对pDNA/CS纳米粒有高摄取率,共温孵4h,细胞摄取率为88·8%。激光扫描共聚焦显微图像显示,pDNA/CS纳米粒依赖细胞内吞功能经细胞(内外)转运通道进入细胞。pDNA/CS纳米粒与细胞共温孵3h,CS主要分布在胞浆中,pDNA不仅分布在胞浆中,核内也清楚可见荧光标记的pDNA。结论荷正电的pDNA/CS纳米粒以小聚集体形式被细胞吸附,通过细胞胞吞作用进入细胞。pDNA/CS纳米粒主要在胞浆中解离,pDNA入核。实验提示,增加pDNA/CS纳米粒在胞浆中解离将有助于提高CS介导的转染效率。
- 杨晓容宗莉朱敏艳袁喜英吴政宏
- 关键词：质粒DNA纳米粒
- 壳聚糖介导的基因转染研究
- 目的壳聚糖(CS)以其安全性和转运、保护基因的能力,被认为是有发展潜力的非病毒类载体。就目前研究,CS作为基因载体存在着转染率低的问题,本文以增强型绿色荧光蛋白质粒基因(pEGFP)作为报告基因进行细胞转染试验,探讨影响...
- 宗莉张淑芸袁喜英杨晓容
- 关键词：壳聚糖PEGFP纳米粒细胞转染
- 文献传递
- 壳聚糖纳米粒作为基因载体的研究:制备,特征和对DNA的保护被引量：20
- 2005年
- 目的:制备载基因壳聚糖纳米粒,研究纳米粒药剂学特征以及对DNA的保护作用.方法:复凝聚法制备纳米粒,对纳米粒的形态、粒径及分布、Zeta电位、包封率、载药量和处方影响因素进行了考察,凝胶阻滞法分析壳聚糖和pDNA的聚合方式,pDNA保护性试验考察壳聚糖纳米粒抵抗核酸酶的能力.结果:制备的pDNA/壳聚糖纳米粒为结构较紧密的不规则球形,平均粒径为(240.4±13.2)nm,多分散指数为(0.173±0.05),Zeta电位为(18.4±0.6)mV,包封率为(95.2±1.9)%,载药量为(30.7±0.8)%.凝胶阻滞分析结果表明,纳米粒荷正电,pDNA与壳聚糖之间通过静电作用而完全结合.纳米粒的粒径、Zeta电位受处方中的壳聚糖相对分子质量、N/P(壳聚糖中伯胺基数目/pDNA中磷酸基数目)比、pDNA浓度、Na2SO4浓度和pH值等因素影响.pDNA保护性试验表明,壳聚糖纳米粒对pDNA有保护作用.结论:壳聚糖可以有效凝聚pDNA,采用复凝聚法可制得200～500 nm范围荷正电的纳米粒,有较高的包封率和载药量,可有效保护pDNA免受核酸酶降解.壳聚糖作为黏膜给药的非病毒基因载体具有应用价值.
- 宗莉陈伶俐张淑芸杨晓容朱家壁
- 关键词：纳米粒基因载体PDNA黏膜
