柯遐义 作品数:8 被引量:98 H指数:5 供职机构: 中山大学 更多>> 发文基金: 国家高技术研究发展计划 广东省自然科学基金 更多>> 相关领域: 农业科学 文化科学 更多>>
用高速微弹轰击技术将外源基因导入甜玉米的研究 被引量:5 1994年 利用不至自行研制和设计的高速微弹轰击装置将外源新霉素磷酸转移酶(NPTⅡ)基因和β-葡萄糖苷酸酶(GUS)基因导入甜玉米品种甜1328的幼胚细胞中,经筛选培养20~30天后得到抗G418的抗性愈伤组织。NPTⅡ点滴分析和DNA杂交证明了外源基因在抗性愈伤组织细胞中的整合与表达. 张秀文 柯遐义 石和平 陈春洪 丰宝健关键词:甜玉米 外源基因导入 愈伤组织 以玉米幼胚为受体的外源基因转化研究 被引量:14 1995年 选用具有较强再生能力的甜玉米品种华农超甜42的幼胚作转化受体,以自制的脉冲放电式电激仪HPES3将新霉素磷酸转移酶(NPTⅡ)基因和β-葡萄糖苷酸酶(GUS)基因导入到受体细胞并成功地得到了转基因植株。NPTⅡ点滴分析、MU荧光检测和DNA点杂交的结果都证实了外源基因在转化愈伤组织和植株中的整合与表达。通过对转化条件的摸索,发现幼胚存活率为70%左右时可得到较好的转化结果;在不同的输出方式中,长脉冲输出校短脉冲输出对转化更有利;其它电激条件、幼胚胚龄与筛选程序对玉米幼胚转化也有很大的影响。 柯遐义 张秀文 石和平 陈春洪 李宝健关键词:玉米 幼胚 基因转化 玉米幼胚培养及其影响因素的研究 被引量:9 1996年 选取10个不同的玉米品种于大田栽种并自花授粉,采其授粉后14~24d的幼胚进行培养,筛选出了5个较易诱导体胚而再生植株的品种.在影响玉米幼胚培养的许多重要因素中,如2,4-D,KT,NAA,6-BA,ZT,ZiP,Ag+,水解酪蛋白,琼脂糖,脯氨酸和谷氨酰胺等,2,4-D和Ag+是最关键的因子.以华农超甜42号玉米幼胚为材料进行培养时,2,4-D15mg/L与Ag+10mg/L浓度下的MS培养基(再结合其它因子的适当组合)比较易于诱导出胚性愈伤组织,从而有利于其植株再生.以琼脂糖代替琼脂粉对体胚诱导也有较好效果. 柯遐义 张秀文 石和平 李宝健关键词:玉米 幼胚 愈伤组织 体胚发生 植株再生 猪精子电激法转移基因研究初报 Ⅰ不同电激条件对猪精子活力和死亡的影响 1991年 电激法(electroporation),也有译名电脉冲刺激、电场转移基因法等。其基本原理是,生物细胞在外界的高电压,短脉冲电场作用下,细胞膜结构发生变化,使膜产生可逆性的电穿孔。此时若在细胞膜周围放置一定浓度和大小的 DNA 分子,DNA 能在细胞膜产生瞬间电穿孔的时候进入细胞,从而达到向生物细胞导入外源基因的目的。 王建忠 魏平华 彭国良 王祖昆 雷春 石和平 柯遐义关键词:精子活力 转移基因 应用电激法将外源基因导入小麦的研究 被引量:3 1993年 建立了以小麦成熟胚为外植体的组织培养系统。应用电激仪HPES-3,摸索了适合小麦种胚外源基因转化的电激条件,并以含有潮霉素磷酸转移酶(HPT)基因的质粒 pLCN_(1055)DNA 直接对萌动的小麦种胚进行电激转化,在含有潮霉素(Hm)的小麦愈伤组织培养基中培养,获得了假定的转基因愈伤组织。Southern 杂交初步证明 HPT 基因已整合至小麦愈伤组织的基因组中。将这些转基因愈伤组织培养成苗还在试验之中。 陈春洪 张秀文 柯遐义 石和平 李宝健关键词:小麦 基因导入 影响小麦成熟胚培养的几种因素研究 被引量:30 1995年 选取6个春小麦品种的成熟胚进行培养,着重研究不同基因型、培养基、种子贮藏时间、愈伤组织诱导培养时间等对分化的影响。确定了较好的分化培养基,供试品种中,华农400有较好的分化性能;不同基因型的小麦诱导愈伤组织产生的能力差别不大,分化绿点及生根的能力有一定差异,而分化成苗的能力则有很大的变化;种子贮存时间与愈伤组织诱导培养时间对分化有较大的负影响。 柯遐义 陈春洪 杨芳 李宝健 陈家旺关键词:小麦 分化 通过基因枪轰击转化获得转基因小麦植株的研究 被引量:30 1997年 利用JQ-700型高速基因枪将pDM302质粒DNA上的bar基因即PAT酶(phosphinothricinacetyltransferase)基因导入了冬小麦品种“农大146”的幼胚中。经过在含有phosphinothricin(简称ppt)的选择培养基上筛选,得到了9块具有ppt抗性的愈伤组织。PCR电泳检测与PCR-Southern杂交结果显示,外源bar基因已转化进了由其中4块愈伤组织再生出的转基因的小麦植株中。 黄粤 柯遐义 李宝健关键词:小麦 BAR基因 基因枪 转基因植株 利用电激法转化小麦幼胚的研究 被引量:22 1997年 利用我们实验室自制的脉冲放电式电激仪HPES-3,我们将合bar基因即PAT酶(phosphinothricinacetyltransferase)基因的pDM302质粒DNA导入了一个春小麦品种(TriticumaestivumL.)“T2003”的幼胚中。经过在含有ppt(phosphinothricin)的选择培养基上筛选,得到了抗ppt的愈伤组织和再生小苗。PCR检测与DNA点杂交结果显示,外源bar基因已整合进了转基因的小麦植株中。 柯遐义 黄粤 石和平 李宝健关键词:小麦 幼胚 转基因植株 基因工程