殷勇
- 作品数:4 被引量:10H指数:2
- 供职机构:武汉大学人民医院更多>>
- 发文基金:中国博士后科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 人肾癌组织中热休克蛋白gp96-肽复合物提取、纯化及体外的免疫效应被引量:4
- 2005年
- 目的建立从人肾癌组织中提取、纯化热休克蛋白(HSP)gp96肽复合物的方法,并检测其体外免疫效应。方法采取三步蛋白纯化法从人肾癌患者肿瘤组织中提取、纯化HSPgp96肽复合物,SDSPAGE、Westernblot鉴定HSPgp96肽复合物。应用酶联免疫斑点(ELISPOT)法检测HSPgp96肽复合物、单纯多肽产生γ-干扰素效应T细胞频数的体外免疫活性。结果应用该方法提取的蛋白质经SDSPAGE和Westernblot特异性鉴定,证实是HSPgp96肽复合物;蛋白得率为每g湿重肾癌组织可纯化HSPgp96肽复合物40~60μg。γ-干扰素ELISPOT检测,HSPgp96肽复合物组产生γ-干扰素效应T细胞频数最高(287.50±22.34),以后依次为单纯多肽组(135.25±12.80)、阳性对照组组(102.25±14.76)、阴性对照组(35.50±11.10),各组与阴性对照组比较差异有统计学意义(P<0.05);HSPgp96肽复合物组与单纯多肽组、阳性对照组比较差异有统计学意义(P<0.05);单纯多肽组与阳性对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论三步蛋白纯化法不仅操作简便、重复性高,而且提取的HSPgp96肽复合物具有高获率、高纯度、高特异性及高免疫效应等优点。
- 张杰殷勇田波孟颂东张孝斌
- 关键词:肾癌肿瘤组织纯化方法免疫效应
- 应用蛋白质组学技术在人肾癌组织中发现2个特异性生物标志物被引量:6
- 2005年
- 目的探讨人肾肿瘤组织和正常肾组织之间蛋白质的差异表达,寻找特异性生物标记物。方法应用蛋白质组学(SELDI)技术,检测12例人肾肿瘤和正常肾组织蛋白质谱图表达。结果与正常肾组织比较,在IMAC3蛋白质芯片上人肾肿瘤组织谱图中显示2个特异性蛋白质峰明显增高,相对分子质量依次为5750.4和5861.7,其特异性和敏感性高。结论人肾肿瘤组织中特异性蛋白质的发现,对进一步研究肿瘤发生机理及其临床特异性生物标志物的检测等具有重要意义。
- 张杰田波殷勇张孝斌邓碧萍许洋马龙华赵诚实
- 关键词:蛋白质组学技术肾肿瘤生物标记物相对分子质量蛋白质芯片肾组织
- 热休克蛋白gp96与肾癌
- 2004年
- 热休克蛋白gp96(HSPgp96)是一种高度保守和呈单态性的蛋白质。它能与细胞内大量多肽非共价结合 ,参与MHCⅠ类抗原的提呈。用肿瘤源HSPgp96 肽复合物免疫小鼠可诱发抗相应肿瘤细胞的MHCⅠ类限制性CD8+ 细胞毒性T细胞免疫应答 ,并能产生记忆性T细胞应答 ,具备了作为疫苗的一个关键要素 ,为肿瘤免疫治疗开辟了一个新的途径。本文对HSPgp96与肾癌免疫治疗的研究作一概述。
- 殷勇张杰张孝斌
- 关键词:肾肿瘤热休克蛋白质类
- 肾癌组织与正常肾组织中热休克蛋白gp96-肽复合物体外免疫效应比较
- 2005年
- 目的:研究人肾癌组织中提取、纯化的热休克蛋白(HSP)gp96 肽复合物的体外免疫效应。方法:分别从12例肾癌患者肿瘤组织标本及5例肾外伤患者切除的正常肾组织中提取、纯化 HSPgp96 肽复合物。应用酶联免疫斑点(ELISPOT)法检测肾癌患者肿瘤组织,正常肾组织中提取的HSPgp96 肽复合物、单纯多肽刺激人外周血单核细胞(PMBC)产生γ 干扰素效应T细胞频数。结果:肿瘤组中 HSPgp96 肽复合物产生γ 干扰素效应 T细胞频数最高[每孔(287.6±22.3)个],肿瘤组中HSPgp96 肽复合物,单纯多肽产生γ 干扰素效应 T细胞频数明显高于正常肾组织组(P<0.01)。两组中HSPgp96 肽复合物与单纯多肽产生γ 干扰素效应T细胞频数存在明显差异(P<0.05)。结论:肾肿瘤组织中提取的HSPgp96 肽复合物具有明显最强的体外免疫效应。
- 殷勇张杰田波孟颂东张孝斌
- 关键词:HSPGP96免疫效应肾癌酶联免疫斑点法