毛雪琴
- 作品数：90 被引量：469H指数：14
- 供职机构：浙江省农业科学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金浙江省自然科学基金浙江省科技计划项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生历史地理更多>>
- GUS为负标记的稻瘟病菌目标基因替换突变体双筛选体系(英文)被引量：3
- 2009年
- 目标基因替换是基因功能研究的重要方法,在生物工程领域广泛应用。为了提高真菌目标基因替换的效率,以稻瘟病菌为研究对象,建立了一种以gusA基因为负筛选标记的目标基因替换突变体双筛选体系(GUS-DS)。首先,检测了78个真菌菌株的内源GUS活性,发现除3个菌株外均呈阴性。同时,将gusA基因导入稻瘟病菌、镰刀病菌、炭疽病菌后,转化子可获得高的GUS活性。表明gusA可用作真菌中的筛选标记。然后,以gusA为负标记,HPH为正标记,以过氧化物酶体定位信号受体基因MGPEX5与MGPEX7的替换为例,建立稻瘟病菌GUS-DS体系。对潮霉素抗性筛选获得的转化子通过GUS活性检测进一步筛选,呈阴性者为可能突变体。通过PCR与Southern杂交对可能突变体进行验证,以此评估GUS-DS的筛选效率。结果表明GUS-DS将Δmgpex5与Δmgpex7的筛选效率由原来的65.8%和31.2%分别提高到90.6%和82.8%。另外,还建立了一种适合于GUS-DS的多重PCR法(M-PCR)用于突变体的验证。通过扩增目标位点的不同区段,可以有效区分突变体、野生型和随机插入转化子。M-PCR法验证突变体简便、迅速,可信度与Southern杂交相同。GUS-DS及M-PCR为功能基因组学及生物工程的研究提供了有力的工具。
- 王教瑜张震杜新法柴荣耀毛雪琴邱海萍王艳丽孙国昌
- 关键词：GUS活性
- 水稻不同类型品种上的稻瘟病菌群体小种的演变被引量：14
- 1999年
- 根据１９９５－１９９８年浙江省稻区稻瘟病菌生理小种的鉴定结果，选择适当的病菌和品种互作组合，通过继代接种实验模拟研究水稻不同类型品种上的稻瘟病菌演变。结果表明，浙江省稻区稻瘟病菌群体组成复杂，籼、粳稻品种上的稻瘟病菌类型存在较大差异，稻瘟病菌和水稻品种继代互作后不同品种上病菌群体中小种比例发生了明显变化，多数品种上菌系组成出现了小种优势，不同类型品种上发生的优势小种差异是导致田间病菌群体组成时常变化的根本原因。上述研究对于品种的合理推广应用和抗病性丧失预测具有重要意义。
- 柴荣耀杜新法毛雪琴孙国昌陶荣祥金敏忠
- 关键词：稻瘟病菌水稻品种
- 超级稻品种(材料)抗病虫性的鉴定被引量：9
- 2002年
- 通过室内接虫接菌方法 ,对 38份超级稻品种 (材料 )进行了抗白背飞虱、褐飞虱、稻瘟病和白叶枯病鉴定。筛选出对白背飞虱、褐飞虱和白叶枯病中抗以上的品种 (材料 )分别为 13、5、15和 18份 ,其中三抗的有R5 2 7、E18和Ps-32A 3个品种 (材料 ) ,四抗的有超丰占和R2 812个品种 (材料 )。
- 沈君辉毛雪琴孙国昌刘光杰程式华
- 关键词：超级稻白背飞虱褐飞虱白叶枯病白叶枯病
- 利用空间诱变技术进行早籼稻新品种的改良被引量：17
- 2014年
- 利用卫星搭载2个早籼稻品系浙105和浙207干种子,进行空间诱变处理。回收后SP2-SP7逐代选择,以主要农艺经济性状改良为目标,结合稻瘟病和白叶枯病抗性筛选,获得一批突变品系;选用72对分布于水稻12条染色体上的SSR引物对5个变异株系与原种对照进行DNA分子检测。结果表明：空间诱变对水稻品种产生了不同程度的生理损伤,SP1表型不分离,SP2出现不同程度的变异,SP3起逐代选择获得农艺经济性状、稻瘟病和白叶枯病抗性变异株,从中选出得到明显改良的新品系;5个变异株系与原种之间均存在着不同程度的SSR多态性差异。
- 俞法明严文潮毛雪琴金庆生李小华陈蕾陆艳婷
- 关键词：早籼稻空间诱变稻瘟病白叶枯病SSR
- 马唐生防菌Col-68发酵条件的筛选被引量：3
- 2012年
- 为了最大程度增强马唐生防菌Col-68在发酵过程中产孢能力以及次生代谢产物除草活性,试验以Col-68发酵滤液对马唐种子根、芽生长的抑制率为活性指标,综合不同培养条件下菌株产孢的差异,利用单因素筛选试验筛选出了适合该菌株发酵的不同碳氮源、碳氮比及初始碳源适宜浓度。研究结果表明,在初始pH=6.5,每300 mL锥形瓶装液120 mL,接种100μL菌原液,28℃、160 r.min-1震荡培养10 d的最佳发酵条件下,菌株活性差异显著,以蔗糖为碳源时Col-68活性、产孢量以及对马唐根长抑制率最高,蔗糖浓度在30～50 g.L-1时菌株产孢量以及对马唐根长抑制率较高,发酵最适宜利用的氮源为硝酸钠,最佳碳氮比则为2.5∶1.0。同时,不同条件下的发酵滤液对马唐根生长的抑制率均明显高于对芽生长的抑制率。
- 赵美娜邱海萍姜华张震毛雪琴王教瑜柴荣耀杜新法王艳丽孙国昌
- 关键词：生物除草剂马唐发酵条件
- 稻瘟病菌不同拼接版本基因组序列差异性比较
- 2013年
- 为了明确稻瘟病菌不同拼接版本基因组序列的差异,促进合理利用不同拼接版本基因组序列,比较了不同版本稻瘟病菌基因组数据库微卫星序列的分布情况,功能基因的位置及长度差异,SSR引物的位置差异等。结果表明,不同基因组数据库在序列长度上差异明显,功能基因的位置、SSR引物位置和SSR核苷酸重复类型数量也差异明显。无毒基因Avr-Pizt连锁标记比较分析表明Avr-Pizt基因定位在不同数据库中差别明显。不同稻瘟病菌数据库中,第7染色体的序列与其上的BAC序列之间差异显著,虽然这不影响功能基因的分析,但影响无毒基因图位克隆的定位区间的判断。因此,稻瘟病菌研究者应根据实际情况选择相应的数据库。
- 毛雪琴姜华王艳丽张震柴荣耀王教瑜邱海萍杜新法孙国昌
- 关键词：稻瘟病稻瘟病菌基因组图位克隆无毒基因
- 气候变化对浙江省水稻主要病虫害发生的影响及其对策研究
- 徐红星王艳丽金志凤吕仲贤张震郑许松毛雪琴高广春邱海萍朱平阳刘桂良钟列权王国迪钟雪明李小荣徐南昌陈再廖
- 课题来源于浙江省科技厅。全球气候变化是20世纪90年代以来最为引人注目的环境和科学问题之一，已经引起各国政府、科学界与公众的强烈关注。过去100年中全球地面温度上升了0.74℃，是过去1000年中最温暖的100年。中国是...
- 关键词：
- 关键词：水稻病虫害防治气候变化
- 水稻纹枯菌总DNA提取方法的比较被引量：9
- 2011年
- DNA的浓度,尤其是DNA的纯度严重影响后续基因组酶切等结果。为寻找一种高质量的水稻纹枯菌总DNA的提取方法,采用CTAB法、CTAB改良法、SDS法、蜗牛酶法、蛋白酶K法5种方法分别提取水稻纹枯菌总DNA。通过紫外吸光度测定DNA的纯度和浓度、琼脂糖凝胶电泳、PCR扩增、限制性内切酶酶切反应及Southern杂交评价DNA的质量,最终得出蛋白酶K法是获取高质量水稻纹枯菌基因组DNA的最佳方法。
- 任衍春张震毛雪琴邱海萍姜华柴荣耀王艳丽孙国昌
- 关键词：总DNASOUTHERN杂交
- 水稻主要抗瘟基因对我国菌株的抗性分析和利用评价被引量：17
- 1999年
- 为了明确主要抗瘟基因的抗性现状和利用价值,1995～1996年采用来自浙江、四川、湖北、广东等7个省(市)的155个稻瘟病菌菌株,测定了日本13个已知基因粳稻品种的抗性表现。结果表明,13个抗瘟基因对我国菌株的抗性均不强,菌株毒力频率均在20％以上。但对我国各稻区的菌株而言,多数稻区仍有1～3个基因的抗性保持较高的水平,浙江稻区Pi-z^t基因仍有很好的抗性,能抗95.7％的浙江菌株,四川稻区Pi-k^h、Pi-z、Pi-k等3个基因仍具有较好的抗性,云南稻区Pi-z^t、Pi-ta^2基因具有较强的抗性,因此各地仍可因地制宜地加以利用。
- 孙国昌杜新法柴荣耀毛雪琴孙漱沅
- 关键词：水稻稻瘟病抗瘟基因菌株抗性分析
- 不同杀菌剂对水稻穗期稻瘟病和稻曲病的防治效果被引量：11
- 2016年
- 试验结果表明,7种杀菌剂对水稻穗期稻瘟病均具有较好的防治效果;其中,75%三环唑可湿性粉剂400 g·hm^(-2)防效最好,达93.8%,拿敌稳、阿米妙收、咪鲜胺、稻瘟酰胺、稻瘟灵和春雷霉素等6种杀菌剂可与其轮换使用。7种杀菌剂对稻曲病的防治效果从高到低依次为欧博、阿米妙收、爱苗、己唑醇、拿敌稳、丙环唑和井冈霉素,防效为96.7%~76.9%。拿敌稳和阿米妙收可同时用于防治稻瘟病和稻曲病。
- 叶秀芬张震邱海萍毛雪琴柴荣耀张昌杰
- 关键词：杀菌剂稻瘟病稻曲病
