沈亚峰
- 作品数：32 被引量：44H指数：4
- 供职机构：第二军医大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划军队医药卫生科研基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学自动化与计算机技术更多>>
- 胃癌细胞DNA聚合酶的电镜原位杂交
- 2006年
- 叶煦亭沙继宏汤莹孙结王小平梁媛媛沈亚峰杨勇骥江键
- 关键词：DNA聚合酶Β胃癌细胞DNA修复酶DNA复制电镜
- Presenilin1基因对心肌细胞肌浆网钙容量的影响
- 2017年
- 目的:探讨Presenilin1基因对心肌细胞肌浆网钙容量的影响。方法:本实验以AAV-9为载体构建心肌特异性PS1-shRNA重组腺相关病毒,通过尾静脉注射PS1-shRNA重组腺相关病毒干扰大鼠心肌组织中Presenilin1基因的表达,并利用激光扫描共聚焦显微镜检测并记录心肌细胞肌浆网钙容量及舒张期自发钙释放事件的变化;同时,采用western blot技术分析各组大鼠心肌组织中雷诺丁受体及钙泵表达水平的改变。结果:与对照组相比,PS1-shRNA重组腺相关病毒干预组大鼠心肌细胞肌浆网钙容量显著降低,自发钙释放事件明显增加;雷诺丁受体表达水平略降低,钙泵表达水平无显著性变化。结论:Presenilin1基因表达水平降低会引起心肌细胞钙泄漏,从而造成心肌细胞肌浆网钙容量降低。
- 王飞飞吕园园沈亚峰袁青宁李天胡适范晓燕汤莹林方兴叶煦亭雷长海杨勇骥
- 关键词：肌浆网
- 抗平颏海蛇短链神经毒素全人源单克隆抗体的筛选、制备及生物活性研究
- 2017年
- 目的重组表达3种平颏海蛇短链神经毒素,利用噬菌体抗体库筛选制备全人源抗毒素单克隆抗体并评估其生物活性。方法以重组表达纯化的神经毒素蛋白作为抗原,从自主构建的噬菌体抗体库中筛选获得噬菌体抗体,经序列测定确定其抗体类型后构建完整抗体。利用真核表达系统表达纯化抗体后鉴定其抗原结合活性、生化特性及药代动力学特性。在体内验证抗体药物的抗毒素作用。结果经过4轮筛选,获得2株能同时结合3种神经毒素的噬菌体单链抗体,并将其制备成完整的抗体,进一步证实所获得的抗体可特异性结合3种抗原。2株全人源抗体均可拮抗神经毒素对昆明小鼠的致死作用。结论利用重组神经毒素和噬菌体抗体库技术成功获得了特异性抗平颏海蛇短链神经毒素的全人源治疗性抗体。
- 胡适沈亚峰李天雷长海
- 关键词：平颏海蛇单克隆抗体抗毒素
- 膜片钳-激光扫描共聚焦显微镜同步实时控制系统的建立及其在心肌细胞膜钙离子通道研究中的应用
- 2012年
- 目的建立膜片钳-激光扫描共聚焦显微镜同步实时控制系统,并将其应用于体外心肌细胞膜钙离子通道的研究,验证其应用效果。方法通过在激光扫描共聚焦显微镜上加装膜片钳装置,采用计算机自动控制技术建立膜片钳与激光扫描共聚焦显微镜的同步实时控制系统;将建立好的装置应用于观察体外雄性大鼠心肌细胞膜钙离子通道,并分析观察结果。结果成功建立膜片钳-激光扫描共聚焦显微镜同步实时控制系统;当刺激心肌细胞时,激光扫描共聚焦显微镜-膜片钳同步实时控制系统在通过激光扫描共聚焦显微镜观察钙火花的同时可通过膜片钳记录心肌细胞膜钙离子通道电流信号。定量分析结果表明相邻两个钙火花之间的时间间距分别为(10.055±0.021)、(10.079±0.021)、(10.087±0.021)s,符合膜片钳设定的刺激间隔(10 s);单个钙火花在空间上均局限于2μm直径范围,在时间上平均经历了约30 ms,从出现至达到最高浓度平均需10 ms,从达到最高浓度到消失平均需20 ms,与钙火花理论吻合。结论成功建立膜片钳-激光扫描共聚焦显微镜同步实时控制系统,在心肌细胞实现了在利用膜片钳进行全细胞记录观测和测定钙离子通道电流及其开闭时程的同时,利用激光扫描共聚焦显微镜获得了钙火花的显微结构形态图像,测定钙离子的位点变化,有助于进一步了解质膜钙离子通道的内部机制。
- 刘红王晔汤莹沈亚峰杨勇骥雷长海
- 关键词：膜片钳术共焦显微镜检查钙通道
- 心衰心肌细胞肌浆网钙泵对兴奋收缩偶联功能的影响被引量：2
- 2010年
- 目的:研究钙泵介导的钙回摄对成年大鼠心室肌细胞兴奋收缩偶联功能的影响。方法:急性分离正常组和心衰组大鼠心室肌细胞,采用激光扫描共聚焦显微镜研究肌浆网的钙容量,然后利用异丙肾上腺素(ISO,1μmol/L)激活心肌细胞β-肾上腺素受体后采用激光扫描共焦显微镜记录其对心肌细胞介导的钙释放;采用Western-blot分析心肌细胞肌浆网钙泵表达水平。结果:心衰组的钙容量显著低于对照组(n=10,P<0.01);ISO胞外灌流后,心衰组心肌细胞钙释放水平显著降低(n=10,P<0.05);心衰组钙泵表达水平低于对照组(n=6,P<0.01)。结论:钙泵介导的钙回摄能影响心肌细胞肌浆网钙容量,并进一步影响心肌细胞兴奋收缩偶联的功能。
- 王永亮范晓燕刘关省胡淑婷沈亚峰汤莹杨勇骥
- 关键词：心肌细胞钙泵
- 槐定碱对心肌梗死大鼠心功能及心肌细胞超微结构的影响被引量：3
- 2012年
- 目的研究槐定碱对心肌梗死大鼠心功能及心肌细胞超微结构的影响。方法采用结扎冠状动脉左前降支方法制备SD大鼠心肌梗死模型,随机分为模型对照组和槐定碱低、中、高(5、10、20 mg/kg)剂量组,另设假手术组,每组10只。实验结束后测定左室舒张末压(LVEDP),左室内压最大上升、下降速率(±dp/dtmax)和心脏质量指数(HM/BM),用透射电子显微镜观察各组大鼠心肌细胞超微结构的变化。结果与假手术组相比,模型对照组的±dp/dtmax降低,LVEDP升高,HM/BM升高(P均<0.01);与模型对照组相比,加药各组的±dp/dtmax升高,LVEDP降低,HM/BM降低,除低剂量组-dp/dtmax外,余者与模型对照组相比差异均有统计学意义(P<0.01,P<0.05);电镜结果显示假手术组大鼠心肌细胞肌丝排列整齐,线粒体结构正常。模型对照组大鼠心肌细胞肌丝溶解,线粒体肿胀,嵴模糊不清,有显著的病理学改变;槐定碱低剂量组的肌丝溶解有轻微恢复,中、高剂量组肌丝溶解现象消失,肌丝排列整齐。结论槐定碱能改善心肌梗死大鼠的心功能,减轻心肌细胞超微结构的损伤。
- 路红沈亚峰曹密宋晓伟汤莹杨勇骥
- 关键词：槐定碱心脏功能超微结构
- 慢性心衰大鼠心肌细胞内雷尼丁受体及集钙蛋白的表达
- 2016年
- 目的： 研究慢性心衰大鼠心肌细胞内雷尼丁受体（RyR2）及其调节蛋白集钙蛋白的表达,探讨心衰心肌细胞内钙容量降低的机制.方法： 雄性SD大鼠被随机分为心衰组和假手术组,运用激光扫描共聚焦显微镜、透射电子显微镜、免疫印迹等方法研究2组大鼠心肌细胞肌浆网内钙容量、心肌细胞超微结构及心肌细胞内肌浆网钙释放通道RyR2和其调节蛋白集钙蛋白表达的变化.结果： 慢性心衰大鼠心功能左心室舒张末期压力、左室压力最大上升速率均显著低于假手术组.假手术组大鼠心肌细胞的肌小节完整,肌丝排列整齐,线粒体结构正常;心衰组大鼠部分心肌细胞肌丝溶解,线粒体肿胀,嵴断裂.慢性心衰大鼠心肌细胞肌浆网内钙容量显著低于假手术组.慢性心衰大鼠心肌细胞内RyR2的表达量无明显变化,集钙蛋白表达明显下降.结论： 慢性心衰大鼠心肌细胞内集钙蛋白表达下调,可能是导致心肌细胞肌浆网钙容量减少的原因之一.
- 胡淑婷沈亚峰彭涛杨勇骥
- 关键词：心肌细胞肌浆网
- 抗人EGFR和Notch多特异性抗体、其制备方法及用途
- 本发明属于生物医药技术领域，本发明公开了一种抗人EGFR和Notch多特异性抗体C‑T Crossmab，能与EGFR，Notch2，及Notch3结合。本发明的C‑T Crossmab包括两条重链多肽和两条轻链多肽，本...
- 胡适雷长海傅文燕沈亚峰李天
- 钙诱导钙释放机制与慢性心力衰竭的关系
- 2010年
- 目的：探讨钙诱导的钙释放（CICR）过程与慢性心力衰竭之间的关系.方法：采用冠状动脉左前降支结扎手术制作大鼠慢性心衰模型,酶解法分离成年大鼠心室肌细胞,然后使用NiCl2（5mmol/L）和毒胡萝卜素（TG, 100nmol/L）分别阻断钠钙交换体和钙泵,采用膜片钳和激光扫描共聚焦显微镜同步实时系统记录心肌细胞的L-型钙电流（ICa.L）以及CICR过程中的钙瞬变.结果：心衰大鼠心肌细胞的ICa.L低于正常大鼠心肌细胞的ICa.L;心衰组心肌细胞内CICR过程中的钙火花发生率低于正常对照组.结论：心肌细胞CICR功能的异常与心力衰竭的发生机制有着十分密切的关系,可能为导致心力衰竭发生的重要原因之一.
- 刘关省沈亚峰胡淑婷王永亮汤莹杨勇骥
- 关键词：心力衰竭L-型钙通道钙瞬变
- 基于无线图传对显微结构实验教学系统的研究与应用被引量：1
- 2017年
- 显微镜是生命科学教学研究中不可或缺的工具。在形态学实验实践教学中，很多实验是需要在显微镜下进行。但是普通显微镜只能一人进行显微观察，不能多人同时观看。教员和学员、学员与学员之间不能对同一个现象或者操作方法进行直观、
- 胡适王晔沈亚峰范晓燕林方兴李天杨勇骥雷长海
- 关键词：实验教学系统显微结构形态学实验教学研究生命科学
