沈皆亮
- 作品数：64 被引量：375H指数：11
- 供职机构：重庆医科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金重庆市自然科学基金重庆市科技攻关计划更多>>
- 相关领域：医药卫生文化科学生物学更多>>
- 医学本科生参与课余科研实践的模式探索被引量：8
- 2018年
- 随着社会进步，现代医学教育要求医学生毕业后应具备医疗、教学、科研等多方面能力，而科研实践是切实提高学生综合能力的有效实现途径。但目前本科阶段的医学教育还是以基础知识和临床实践为主，对于科研能力的培养还相当欠缺。本课题组前期问卷调查显示，本科阶段高年级临床医学专业学生对科研感兴趣、有需求，但其自身科研能力还较差，并缺乏参与科研训练的机会。
- 郭秀明沈皆亮江维张晓军胡侦明梁勇郝杰
- 关键词：医学本科生现代医学教育学生综合能力医学专业学生本科阶段
- 白血病抑制因子对退变髓核细胞胞外基质的影响及其机制研究
- 2018年
- 目的:探讨退变椎间盘髓核组织白血病抑制因子(leukemia inhibit factor,LIF)表达及其对胞外基质表达的影响。方法:40只新西兰兔随机分5组(1组为对照组,4组为实验组),每组8只。针刺法建立L4/5、L5/6椎间盘退变模型,术后0、2、4、8周对椎间盘进行MRI扫描及HE染色评价退变程度,免疫组化检测髓核组织LIF的表达。体外原代培养兔髓核细胞,不同浓度重组LIF蛋白刺激髓核细胞24、48、72 h,Western blot检测聚蛋白多糖(Aggrecan)、Ⅱ型胶原(COLLA2α1)的表达,免疫荧光检测最大浓度组和对照组Aggrecan的表达并行Western blot检测金属蛋白酶组织抑制物-1(tissue inhibitor of metalloproteinases,TIMP-1)和基质金属蛋白酶-3(matrixmetalloproteinase-3,MMP-3)的表达。结果:影像学和组织学评分显示椎间盘退变随造模时间延长而加重,各组间差异有统计学意义(1.000±0.000,2.000±0.535,2.750±0.463,3.875±0.354,P=0.000;4.000±0.000,7.375±0.518,9.375±1.302,11.750±0.463,P=0.000)。免疫组化显示2周组LIF表达最高,随着椎间盘退变加重,其表达降低,但各组均高于0周组,差异有统计学意义(559.608±68.689,16 135.613±577.329,8 149.739±457.189,2 018.254±211.870,P=0.000)。细胞学实验显示,加入不同浓度LIF刺激后,Aggrecan、COLLA2α1的蛋白表达与LIF刺激浓度呈正相关,各处理组与对照组差异有统计学意义(0.191±0.020,0.212±0.020,0.321±0.041,0.511±0.032,0.561±0.042,P=0.000),Aggrecan免疫荧光结果与之相符。处理组TIMP-1表达明显高于对照组(0.454±0.022,0.211±0.012,P=0.000),MMP-3明显低于对照组(0.243±0.013,0.362±0.021,P=0.000)。结论:LIF在退变髓核组织中表达上升,且具有促进胞外基质合成作用,其潜在机制与LIF能够上调TIMP-1并下调MMP-3作用相关。
- 周浩肖强沈皆亮王棚郑鹏骥刘沪喆郝杰王羿阳胡侦明
- 关键词：椎间盘退变髓核细胞白血病抑制因子胞外基质
- SDF-1/CXCR4信号轴促进退变椎间盘胞外基质降解的研究被引量：5
- 2017年
- [目的]探讨SDF-1/CXCR4信号轴对于退变椎间盘胞外基质的影响及其潜在的作用机制。[方法]分别从年龄相匹配的椎间盘突出症和脊柱骨折手术患者中获取椎间盘组织,通过术前磁共振(MRI)采用Pfirrmann分级对椎间盘样本进行退变程度分组。免疫组化和western blot检测两个组椎间盘组织SDF-1、CXCR4、MMP-3,MMP9,Collagen Ⅱ和Aggrecan的表达。对取自椎间盘突出症患者的组织进行分离,细胞原代培养。取第3~6代细胞加入100ng/ml SDF-1或转染CXCR4小干扰RNA(siRNA)后共培养24 h,荧光定量PCR和western blot检测CXCR4、Collagen Ⅱ和Aggrecan的表达,Annexin V/PI双染法检测细胞凋亡率。为进一步探讨其潜在的分子机制,NF-κB抑制剂PDTC(20μmol/L)或CXCR4-siRNA转染髓核细胞后,观察NF-κB的主要基团P65磷酸化水平(p-P65)及核转移情况,胞外基质的表达和细胞凋亡水平是否发生改变。[结果]通过MRI的Pfirrmann分级标准,椎间盘突出组的分级为Grade Ⅲ~Ⅴ级,而脊柱骨折组的分级为Grade Ⅰ、Ⅱ级,分别定义为退变组和正常组。通过检测两组未进行处理的椎间盘组织发现,SDF-1、CXCR4、MMP-3和MMP-9在退变组中表达增高,而胞外基质的主要成分Collagen Ⅱ和Aggrecan表达则在退变组织中明显降低。而体外细胞实验结果显示,SDF-1处理后CXCR4的表达明显增高,同时伴随细胞凋亡的增高,而Collagen Ⅱ、Aggrecan的表达则显著降低,但这一作用可以随着CXCR4被siRNA靶向沉默后受到明显抑制。作者进一步采用PDTC或CXCR4-siRNA处理细胞后发现,SDF-1可以明显提高p-P65表达水平,促进P65基团的核转移,而这些作用随着CXCR4表达降低而受到抑制。此外PDTC抑制NF-κB活性后,细胞凋亡水平明显下降,而Collagen Ⅱ和Aggrecan的表达则明显上升。[结论]SDF-1/CXCR4信号轴在退变椎间盘中表达增高,它可以促进胞外基质的降解,增加细胞的凋亡水平,其潜在的机制通过调控NF-κB的活性
- 何斌沈皆亮许圣茜郝杰胡侦明
- 关键词：椎间盘退变SDF-1/CXCR4NF-ΚB胞外基质细胞凋亡
- 白藜芦醇恢复去分化正常髓核细胞表型的实验研究被引量：6
- 2013年
- 目的研究体外单层培养与藻酸盐微球立体培养对人正常髓核细胞分化的影响,并探讨白藜芦醇(resveratrol,RES)恢复藻酸盐微球立体培养下去分化髓核细胞表型的调节机制。方法取6例腰椎爆裂骨折患者自愿捐赠的正常髓核组织分离培养髓核细胞,并行细胞鉴定;取单层培养的第1、3、5、7代髓核细胞分别行形态学观察、β-半乳糖苷酶(senescence-associatedβ-galactosidase,SA-β-gal)染色观察细胞衰老情况及甲苯胺蓝染色观察蛋白多糖表达。分别取单层培养和藻酸盐微球立体培养的第1代髓核细胞检测细胞增殖情况。取立体培养1周的第7代髓核细胞随机分为立体培养空白组(A组)、RES组(B组)、沉默交配型信息调节因子2同源蛋白1(silent mating type information regulation 2homolog 1,SIRT1)-小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)+RES组(C组)、阴性对照-siRNA+RES组(D组),另设置髓核细胞单层培养空白组(E组),行相应培养后采用Western blot检测SIRT1、聚蛋白多糖(Aggrecan)和Ⅱ型胶原蛋白表达,实时荧光定量PCR检测SIRT1 mRNA表达水平。结果细胞鉴定提示培养细胞为髓核细胞。形态学观察及SA-β-gal、甲苯胺蓝染色示,在体外连续单层培养条件下,正常髓核细胞易发生去分化,且随着传代次数增加趋势愈明显。藻酸盐微球立体培养48 h内髓核细胞增殖显著低于单层培养(P<0.05),但能显著提高去分化髓核细胞SIRT1、Ⅱ型胶原与Aggrecan蛋白的表达,E组与A组比较差异有统计学意义(P<0.05);与A组相比,B组3种蛋白表达显著提高(P<0.05)。C组SIRT1 mRNA和蛋白表达均受明显抑制,显著低于B、D组(P<0.05),Ⅱ型胶原与Aggrecan蛋白表达也显著低于B、D组(P<0.05)。结论连续体外单层培养条件下,髓核细胞增殖速度较快,但在培养过程中易发生去分化现象;而在藻酸盐微球立体培养条件下,RES可以恢复去分化髓核细胞表型,合成更多细胞外基质,这一机制与
- 沈皆亮胡侦明钟小明王大武徐林飞
- 关键词：髓核细胞细胞表型白藜芦醇
- SDF-1/CXCR4信号轴通过NF-κB通路诱导人退变髓核细胞凋亡被引量：6
- 2017年
- 目的探讨趋化因子SDF-1/CXCR4信号轴对人退变椎间盘髓核细胞凋亡的调控作用及其分子机制。方法将术中摘取的椎间盘标本根据Pfirrmann退变程度分为正常组和退变组。用免疫组织化学法、定量PCR和Western blot等检测SDF-1和CXCR4的表达。用退变椎间盘髓核原代细胞培养,取第3~5代的细胞给予10 ng/mL SDF-1刺激、CXCR4-siRNA转染及NF-κB特异性抑制剂PDTC(20μmol/L)等不同处理,Western blot和q-PCR验证转染效率和信号通路上靶蛋白(基因)的表达;Annexin V/PI检测细胞凋亡率;细胞免疫荧光检测NF-κB的重要基团P65的核转移情况。结果 SDF-1和CXCR4在退变椎间盘组织中表达显著升高(P<0.05);SDF-1可以诱导退变髓核细胞的凋亡,但在CXCR4的表达受到沉默后,SDF-1的促凋亡作用被抑制(P<0.05);加入SDF-1的诱导后,磷酸化P65的表达水平明显增高(P<0.05),P65向核内移位;用PDTC抑制NF-κB活性后,SDF-1促凋亡作用明显减弱(P<0.05)。结论 SDF-1/CXCR4信号轴促进髓核细胞凋亡的机制可能与Akt/NF-κB信号通路相关。
- 刘宗超刘勇王振龙韦章超沈皆亮胡侦明
- 关键词：SDF-1/CXCR4椎间盘退变AKTNF-ΚB
- 低强度脉冲超声对立体培养的人退变髓核细胞的影响
- 2013年
- 目的探讨低强度脉冲超声对三维立体培养的人退变髓核细胞的作用。方法取人腰椎退变髓核组织,进行髓核细胞的分离、培养、鉴定,取P3代细胞转至藻酸钙凝珠后予以不同超声强度(0、15、30、60、120 mW/cm2)的脉冲超声刺激1 w(20 min/d)。分别应用流式细胞仪检测细胞凋亡率,RT-PCR及Western blot法检测细胞中聚集蛋白多糖和Ⅱ型胶原在mRNA及蛋白水平的表达差异。结果超声强度为30、60、120 mW/cm2组的细胞凋亡率较对照组(0 mW/cm2)低(P<0.05),超声强度为15 mW/cm2组与对照组相比差异无显著性(P>0.05);在mRNA及蛋白表达水平上,30、60、120 mW/cm2组较对照组均有显著性差异(P<0.05),组间比较无显著性差异(P>0.05)。结论低强度脉冲超声能抑制体外藻酸钙凝珠立体培养的人退变髓核细胞凋亡,促进细胞合成细胞外基质(聚集蛋白多糖和Ⅱ型胶原),从而延缓或修复椎间盘退变。
- 张晓军胡侦明郝杰沈皆亮
- 关键词：低强度脉冲超声细胞外基质
- 明胶海绵预注射在椎体成形术中预防骨水泥渗漏的体外研究被引量：18
- 2015年
- 目的:以离体椎体标本为对象,研究明胶海绵预注射在椎体成形术中预防骨水泥渗漏的效果。方法:选用老年女性尸体胸腰椎标本制成压缩骨折模型,随机分为单纯骨水泥组(A组)、明胶海绵预注射+单纯骨水泥(B组)。在19℃时测定2组骨水泥动态粘度后,在离体标本上模拟经皮椎体成形术(percutaneous vertebroplasty,PVP),骨水泥调和后取第3、6、9、12 min 4个时间点分别匀速缓慢推注5 ml骨水泥,分别测量每组骨水泥的渗漏率和渗漏量。结果:单纯骨水泥粘度随时间延长而增高,且加入明胶海绵对粘度有较大影响,B组骨水泥的粘度均要比A组高,差异具有统计学意义(P=0.000)。骨水泥调和后第9 min是较为适宜的灌注时间点,B组的渗漏量明显小于A组(P=0.035)。结论:传统低粘度骨水泥结合明胶海绵预注射的方法,可明显减少骨水泥渗漏率和渗漏量,较为经济,便于操作,具有良好的临床推广前景。
- 徐林飞胡侦明江维沈皆亮王智方
- 关键词：明胶海绵椎体成形术骨水泥渗漏
- 椎间孔镜偏心环锯技术治疗腋下型腰椎间盘突出症被引量：5
- 2019年
- 目的观察经皮椎间孔镜偏心环锯技术治疗L5~S1腋下型腰椎间盘突出症(LDH)的临床疗效。方法回顾性分析40例L5~S1腋下型LDH,均行经皮椎间孔镜下偏心环锯技术治疗。采用Oswestry功能障碍指数(ODI)、视觉模拟评分(VAS)及改良MacNab标准评价临床疗效。结果病人均顺利完成手术,手术时间(72.36±15.79) min,透视次数(15.44±3.51)次,术后卧床时间(7.36±1.46) h。随访(14.68±3.89)个月,术后VAS、ODI评分均较术前明显降低(P <0.01),末次随访优良率为87.50%。结论经皮椎间孔镜偏心环锯技术能有效治疗L5~S1腋下型LDH,近期疗效确切,远期疗效有待进一步随访。
- 莫小毅沈皆亮胡侦明郝杰
- 低强度脉冲超声通过PI3K/Akt通路促进人退变髓核细胞合成细胞外基质被引量：7
- 2013年
- 目的探讨低强度脉冲超声(LIPUS)对人退变髓核细胞合成细胞外基质的影响及机制。方法取人腰椎退变髓核组织,进行髓核细胞的分离、培养、鉴定,取P3代细胞转至藻酸钙凝珠培养。实验分组如下:LIPUS组:超声刺激1周,20 min/d;对照组:不予超声刺激同条件培养1周;LY294002组:超声刺激并加入LY294002共培养1周。应用ELISA法检测上清中髓核细胞分泌的aggrecan和Ⅱ型胶原(Col2α1);RT-PCR法检测细胞中aggrecan和Col2α1在mRNA水平的表达差异;Western blot法检测细胞中aggrecan、Col2α1、Akt及p-Akt的表达差异。结果予以LIPUS刺激后,上清中的aggrecan和Col2α1浓度较对照组升高(P<0.05),细胞内aggrecan和Col2α1在mRNA及蛋白水平的表达与对照组比较均有增高(P<0.05),Akt的表达无明显变化(P>0.05),p-Akt的表达增高(P<0.05),加入特异性抑制剂LY294002后,aggrecan和Col2α1的合成明显降低(P<0.05)。结论低强度脉冲超声能通过PI3K/Akt信号通路促进藻酸钙凝珠立体培养的人退变髓核细胞合成细胞外基质。
- 张晓军胡侦明郝杰沈皆亮
- 关键词：低强度脉冲超声PI3K/AKT通路细胞外基质
- 肩关节腋位X光片拍摄用体位固定装置
- 本发明涉及X光片拍摄辅助装置技术领域，具体为肩关节腋位X光片拍摄用体位固定装置，包括支撑管，支撑管的下端外壁均匀固定设有多个支撑腿，多个支撑腿的底部远离支撑管的一端均设有万向轮，支撑管的外管壁滑动设有活动管，活动管的外管...
- 沈皆亮刘传肖波 杨大梅吴迪
