温玉荣
- 作品数：13 被引量：10H指数：2
- 供职机构：西安交通大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金陕西省自然科学基金中央级公益性科研院所基本科研业务费专项更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 一种Vsig4纳米抗体及其抗原表位鉴定方法和应用
- 本发明一种Vsig4纳米抗体及其抗原表位鉴定方法和应用，属于生物制药技术领域。还公开了编码该纳米抗体的基因序列以及能够表达该纳米抗体的表达载体和宿主细胞，同时还公开了该纳米抗体和鼠源Vsig4和人源Vsig4结合的抗原表...
- 郑芳温玉荣
- 文献传递
- 一种人源T细胞表面抑制性分子的特异性纳米抗体及其应用
- 本发明公开了一种人源T细胞表面抑制性分子的特异性纳米抗体及其应用，通过深入研究肿瘤内T细胞表面的T细胞免疫球蛋白和含粘蛋白结构域蛋白3(TIM‑3)，采用噬菌体展示技术对TIM‑3纳米抗体进行表达；通过生物淘筛技术筛选出...
- 郑芳温玉荣夏明远秋香王禾
- 文献传递
- 靶向巨噬细胞膜蛋白Vsig4特异性纳米抗体的构建和筛选被引量：2
- 2017年
- 目的构建V-set and immunoglobulin domain containing 4(Vsig4)特异性纳米抗体,以期作为巨噬细胞的分子探针。方法用Vsig4重组蛋白对羊驼进行免疫,分离血液中的淋巴细胞,利用噬菌体展示技术,构建噬菌体展示文库,经过连续3次生物淘筛获得与Vsig4蛋白结合的噬菌体,经测序和基因比对所得VHH序列,用ELISA法筛选出抗Vsig4的高亲和力纳米抗体,并用Vsig4稳定表达细胞系验证纳米抗体的结合能力。结果成功构建了插入率为70%、库容量为7.27×107的噬菌体表达文库,经过克隆筛选获得136个Vsig4阳性单克隆,经测序获得15个不同的VHH基因,将这些基因克隆至原核表达体系,表达和纯化后获得了高纯度的Vsig4纳米抗体,其中Nb119的亲和力最高,并且可以与Vsig4稳定表达细胞系结合。结论成功构建并筛选了特异性、高亲和力的Vsig4纳米抗体,以期用于检测巨噬细胞表面Vsig4的表达和构建特异性分子探针。
- 郑芳罗思羽韩燕宁启兰温玉荣
- 人铁调节蛋白1依靠其亚细胞定位进行折叠和转换
- 2009年
- 顺乌头酸酶是不同生物体中催化柠檬酸盐和异柠檬酸盐的相互转变的铁-硫水解酶。真核生物中的顺乌头水解酶具有额外角色，如多细胞生物双重活性细胞溶质顺乌头酸酶-铁调节蛋白1。在酵母线粒体中这种蛋白质的产生用于检测某些特定细胞器中铁调节蛋白1的折叠，这些细胞器是硫铁蛋白合成的部位。人铁调节蛋白1的这种行为类似于酵母和人类的真正的线粒体顺乌头酸酶。所有在酵母线粒体中的酶都是有活性的，但在电子显微镜观察下铁调节蛋白1形成高密度颗粒。纯化的包涵体进行MS分析证实了人铁调节蛋白1和酮戊二酸脱氢酶合成元件1，一个酮戊二酸脱氢酶亚单位的存在。酮戊二酸脱氢酶合成元件1触发线粒体聚集物的形成，因为后者在酮戊二酸脱氢酶合成元件1-突变体中缺乏，使得聚集物形成不像在细胞溶质中那么有效。对经过纯化的线粒体进行元素分析可知，虽在线粒体中铁调节蛋白1的铁结合量和硫铁簇合成迅速，但这种高密度颗粒含铁并不充足。数据表明，具有双重活性的细胞溶质铁调节蛋白1顺鸟头酸酶的适当折叠在线粒体中比在真正线粒体顺鸟头酸酶少。此外，有效清除聚集铁调节蛋白1-酮戊二酸脱氢酶合成元件1复合物，并不发生在细胞器中，这就强调分子的相互作用决定了铁调节蛋白1的命运。此外，人铁调节蛋白1的正确折叠相对于其他顺乌头酸酶家族的成员来说很大程度上决定于它所在的细胞环境。
- 郑芳温玉荣郑全庆
- 关键词：啤酒酵母易位
- 一种人源T细胞表面抑制性分子的特异性纳米抗体及其应用
- 本发明公开了一种人源T细胞表面抑制性分子的特异性纳米抗体及其应用，通过深入研究肿瘤内T细胞表面的T细胞免疫球蛋白和含粘蛋白结构域蛋白3(TIM‑3)，采用噬菌体展示技术对TIM‑3纳米抗体进行表达；通过生物淘筛技术筛选出...
- 郑芳温玉荣夏明远秋香王禾
- Vsig4和免疫球蛋白Fc段融合蛋白的真核表达纯化被引量：1
- 2016年
- 目的:本项目将通过构建中国仓鼠卵巢细胞(Chinese hamster ovary,CHO)真核表达系统获取小鼠Vsig4膜外端和免疫球蛋白Ig G3a-Fc段的融合蛋白,鉴定Vsig4-Fc和Vsig4纳米抗体的相互作用。方法:采用重合延伸PCR法融合小鼠Ig G3a-Fc和Vsig4胞外段的基因序列,将该融合基因插入真核表达载体中并转染CHO细胞。Western blotting鉴定转染细胞上清中的目标蛋白,通过连续两次亚克隆筛选,获得高表达小鼠Vsig4-Fc融合蛋白的单克隆,之后大量培养增殖转染细胞并收集细胞培养上清,选择Protein A柱纯化方法纯化Vsig4-Fc蛋白,最后经ELISA法鉴定Vsig4-Fc和纳米抗体的结合能力。结果:在CHO细胞中成功构建了小鼠Vsig4-Fc真核表达稳转系,并且在真核表达体系中获得可表达15 mg/L的双分子结构Vsig4-Fc的稳定转染细胞系。经鉴定小鼠Vsig4-Fc融合蛋白能与Vsig4纳米抗体结合。结论:重合延伸PCR法使得Vsig4和Fc基因片段的融合更为高效,两次亚克隆筛选优势细胞系大幅提高了真核蛋白的表达量,为进一步研究Vsig4的生物学功能奠定重要基础。
- 郑芳罗思羽韩燕张富军温玉荣
- 关键词：融合蛋白蛋白质纯化
- 一种基于含硫蛋白过表达提高微生物有机硒合成能力的方法及应用
- 本发明公开的一种基于含硫蛋白过表达提高微生物有机硒合成能力的方法，属于有机硒生物合成技术领域，通过给微生物基因组中导入外源含硫蛋白基因，并将其在高硒低硫环境中进行培养。在外源含硫蛋白过表达中，含硫氨基酸(半胱氨酸和甲硫氨...
- 杨水云赵浩淼廖丹李少峰徐文赵良瑞温玉荣高恩方庆梅
- 文献传递
- 中国汉族女性中G72基因与精神分裂症的关系被引量：2
- 2010年
- 目的研究在中国汉族女性中NMDA受体途径重要基因G72与精神分裂症的关系。方法在545名中国汉族女性(精神分裂症患者260例,正常对照285例)中对位于G72基因的3个单核苷酸多态性位点(rs3916965、rs3916967和rs2391191)进行基因分型和连锁不平衡分析。结果遗传标记rs3916967的等位基因G(P=0.0386)和rs2391191的等位基因A(P=0.0096)均与精神分裂症相关。此外,由3个单核苷酸多态性位点构建的单倍型分析表明,单倍型GAG在病例-对照组中表现出统计学差异(P=0.0024)。结论在中国汉族女性中,G72基因是精神分裂症的一个重要易感基因,在后续的研究中有必要对本结果进行进一步的验证。
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- 关键词：精神分裂症单核苷酸多态性汉族
- 一种Vsig4纳米抗体及其抗原表位鉴定方法和应用
- 本发明一种Vsig4纳米抗体及其抗原表位鉴定方法和应用，属于生物制药技术领域。还公开了编码该纳米抗体的基因序列以及能够表达该纳米抗体的表达载体和宿主细胞，同时还公开了该纳米抗体和鼠源Vsig4和人源Vsig4结合的抗原表...
- 郑芳温玉荣
- 一种基于含硫蛋白过表达提高微生物有机硒合成能力的方法及应用
- 本发明公开的一种基于含硫蛋白过表达提高微生物有机硒合成能力的方法，属于有机硒生物合成技术领域，通过给微生物基因组中导入外源含硫蛋白基因，并将其在高硒低硫环境中进行培养。在外源含硫蛋白过表达中，含硫氨基酸(半胱氨酸和甲硫氨...
- 杨水云赵浩淼廖丹李少峰徐文赵良瑞温玉荣高恩方庆梅
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