潘素娜
- 作品数：3 被引量：9H指数：1
- 供职机构：中国科学院上海药物研究所更多>>
- 发文基金：中国科学院知识创新工程重要方向项目国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 蟾毒灵诱导人宫颈癌HeLa细胞凋亡的蛋白组学研究被引量：8
- 2012年
- 目的:该文通过考察蟾毒灵(bufalin)处理人宫颈癌HeLa细胞株后对细胞蛋白质表达谱的影响,寻找蟾毒灵在HeLa细胞中的可能作用靶点。方法:通过MTT检测细胞活性确定蟾毒灵的IC50,并通过流式细胞术和Hoechst 33342染色检测蟾毒灵诱导细胞凋亡。应用蛋白质组学技术寻找差异表达蛋白点并进行鉴定,用Western blotting试验进行确认。结果:蟾毒灵具有较强的细胞毒作用,IC50(154±21.5)nmol.L-1,可以诱导HeLa细胞发生凋亡。蛋白组学的结果显示蟾毒灵处理组与对照组相比有11个差异表达蛋白,其中9个蛋白点发生了下调;2个蛋白发生了上调。这些蛋白可能是蟾毒灵在HeLa细胞中的作用靶点。Western blotting分析显示heat shock protein 27,vimentin,HNRPK在蟾毒灵处理后的表达调节结果与双向电泳的结果吻合。结论:蟾毒灵可以诱导人宫颈癌HeLa细胞发生凋亡,其凋亡诱导作用可能是多个靶点蛋白共同参与的结果。
- 潘素娜王育红冯利兴范翠英果德安刘璇樊金玲
- 关键词：蟾毒灵HELA细胞细胞凋亡双向电泳
- 蟾毒灵抗肿瘤作用机制的蛋白组学研究
- 近来年，尽管宫颈癌的治疗方案不断改善，但它仍然是威胁女性生命的恶性肿瘤之一。蟾毒灵(bufalin)是中药蟾酥中提取的一种活性最强的毒性配基。研究发现，蟾毒灵具有广泛的抗肿瘤作用，可以诱导多种肿瘤细胞分化和凋亡。但是，蟾...
- 潘素娜
- 关键词：蟾毒灵HELA细胞双向电泳蛋白质组学
- 文献传递
- 人蛋白酶体亚基PSMB1的重组表达、纯化及在蛋白酶体抑制剂体外筛选中的应用被引量：1
- 2012年
- 蛋白酶体是真核细胞中的一类多亚基蛋白酶复合物,它在胞内蛋白质降解的泛素-蛋白酶体通路中起关键作用。重组表达蛋白酶体的活性亚基可以用于在体外筛选、寻找具有蛋白酶体抑制剂作用的化合物。将人蛋白酶体催化亚基(PSMB1)cDNA的编码区(全长726 bp)克隆至原核表达载体pET28a(+),构建重组质粒pET28a-PSMB1,转化大肠杆菌BL21(DE3),通过1 mmol/L IPTG,20℃过夜诱导,获得相对分子量约为27 kDa的重组蛋白,采用IMAC亲和层析柱纯化重组蛋白,纯化后的重组蛋白纯度超过95%。重组蛋白酶解后经NanoLC-MS/MS鉴定表明所表达的融合蛋白氨基酸序列完全正确。在体外BIAcore分析中,重组蛋白表现出对不同化合物的选择性结合能力,其中与蛋白酶体抑制剂雷公藤红素的结合较强,10μmol/L的雷公藤红素与重组蛋白的结合达到27 RU,并且具有良好的浓度依赖型。本研究建立了表达、纯化人蛋白酶体催化亚基PSMB1的方法,并应用于具有蛋白酶体抑制活性化合物的体外筛选。
- 范翠英冯利兴张冬梅潘素娜刘璇果德安樊金玲
- 关键词：原核表达BIACORE体外筛选
