王乾华
- 作品数：16 被引量：32H指数：3
- 供职机构：华中科技大学同济医学院附属协和医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金湖北省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 轴突导向因子netrin-1基因沉默对胎盘血管生成影响的体内外实验研究被引量：2
- 2011年
- 目的 研究轴突导向因子netrin-1基因沉默对胎盘血管生成的影响.方法 应用RNA 干扰技术分别沉默netrin-1基因在人脐静脉内皮细胞（HUVEC）和孕鼠胎盘组织中的表达;用四甲基偶氮唑蓝（MTT）比色法检测细胞活性;克隆形成实验检测细胞增殖能力;细胞迁移实验检测细胞迁移能力;小管形成实验检测细胞管腔形成能力;观察胎鼠体质量;CD34因子的免疫组化链霉亲和素-生物素-过氧化物酶复合物（SABC）法检测孕鼠胎盘的微血管密度.结果 （1）HUVEC：沉默netrin-1基因后,HUVEC细胞活性受到抑制,克隆形成率由（69±6）%降至（46±5）%,迁移细胞数由（86±17）个降至（46±13）个,小管形成的分支点数由（37±9）个降至（17±5）个,HUVEC的netrin-1基因沉默前后比较,差异均有统计学意义（P＜0.05）.（2）孕鼠胎盘组织：沉默孕鼠胎盘组织netrin-1基因后,胎鼠体质量由（2.39±0.17）g降至（2.12±0.10）g,胎盘微血管密度由（258±38）条/mm2降至（197±32）条/mm2,孕鼠胎盘组织netrin-1基因沉默前后比较,差异均有统计学意义（P＜0.05）.结论 沉默netrin-1基因,可以抑制体外HUVEC的细胞活性及增殖、迁移和管腔形成能力,同时使体内胎盘组织的血管生成能力下降.netrin-1是重要的促胎盘血管生长基因.
- 谢涵邹丽朱剑文杨昀钟少平王乾华
- 关键词：神经生长因子类肿瘤抑制蛋白质类基因沉默新生血管化生理性胎盘
- 轴突导向因子-1在血管生成模型中的作用研究
- 2010年
- 目的 研究神经轴突导向因子-1（Netrin-1）在体内和离体血管生成模型中的作用.方法 通过离体大鼠动脉环实验和小鼠活体内Matrigel plug方法检测Netrin-1对血管形成的影响.结果 ①活体外大鼠动脉环实验结果表明10μg/L,50μg/L和100 μg/L Netrin-1均能够促进血管的生成,且50μg/L Netrin1具有最大效应.②小鼠活体内Matrigel plug结果显示含有Netrin-1的Matrigel plug变为红色,CD34免疫荧光染色显示Matrigel plug内有血管样结构形成,所含血红蛋白值为53.4±7.3,与空白对照组5.8±0.9比较差异有统计学意义（P＜0.01）.结论 Netrin-1在在体和离体血管生成模型中均具有促血管生成效应,是一种有效的血管生成因子.
- 王乾华朱剑文钟少平邹丽
- 关键词：MATRIGELPLUG血管生成动脉环
- 重组结缔组织生长因子shRNA质粒的构建及其对肝星状细胞基因表达的影响
- 2016年
- [目的]构建同时干扰大鼠结缔组织生长因子(CTGF)2个不同基因位点的shRNA质粒,并将其转染肝星状细胞(HSC),研究其对CTGF基因表达的影响。[方法]针对大鼠CTGF mRNA靶向序列设计并合成2对DNA模版序列,用PCR的方法将2条CTGF靶向特异性的shRNA分别链接到质粒pGenesil1.2载体的U6启动子和H1启动子。将构建的干扰质粒以阳离子脂质体法转染HSC-T6细胞,应用RT-PCR及Western Blot检测CTGF的表达。[结果]成功构建CTGF shRNA重组质粒;通过RT-PCR和Western Blot分析发现干扰质粒组的CTGF mRNA与蛋白表达水平明显下降(P<0.05)。[结论]重组CTGF shRNA能有效抑制HSC中CTGF的表达。
- 余琴王乾华赵磊毕昊
- 关键词：短发卡状RNA结缔组织生长因子质粒肝纤维化
- 胎膜早破,别惊慌也别忽视
- 2022年
- 在漫长的妊娠期,孕妇可能会出现各种状况,其中,胎膜早破(俗称“破水”)是孕妈们经常听到的词语之一。胎膜早破是指胎膜在临产前发生自然破裂,可发生于任何孕周,是孕期最常见的并发症。根据发生时间,胎膜早破可分为足月胎膜早破和未足月胎膜早破。孕妈们对待胎膜早破往往有两种相反的心态:有些过分惊慌,要求立刻终止妊娠;有些满不在乎,甚至在“破水”后还淡定地洗完澡,才来就医。实际上,这两种做法均不可取。
- 王乾华
- 关键词：胎膜早破自然破裂终止妊娠临产前孕周
- UNC5B在人早孕胎盘微血管内皮细胞中的表达及意义被引量：1
- 2010年
- 目的:探讨神经轴突导向因子Netrin-1受体在人早孕胎盘微血管内皮细胞(HPMECs)中的表达及意义。方法:采用Percoll密度梯度离心法分离HPMECs,并进行鉴定。实时定量PCR技术检测HPMECs中Netrin-1的6种受体(UNC5A、UNC5B、UNC5C、UNC5D、DCC和neogenin)mRNA的表达;应用RNA干扰技术检测Netrin-1受体对HPMECs凋亡的影响。结果:①成功分离HPMECs,免疫荧光鉴定结果显示Ⅷ因子相关抗原和CD34呈阳性。②实时定量PCR结果显示,Ne-trin-1的6种受体中,仅检测到UNC5BmRNA在HPMECs中存在表达。③转染siRNA-UNC5B质粒后,HPMECs凋亡率较对照组明显下降(P<0.05)。结论:Netrin-1受体UNC5B在HPMECs中表达且能促进HPMECs的凋亡,提示其在胎盘血管形成过程中有重要作用。
- 王乾华朱剑文钟少平邹丽
- 关键词：NETRIN-1胎盘微血管内皮细胞
- CTGF在肝纤维化过程中的表达变化及其对大鼠肝星状细胞功能的影响被引量：3
- 2016年
- 目的探讨结缔组织生长因子(CTGF)在肝纤维化过程中的表达变化,并观察其对大鼠肝星状细胞(HSC)功能的影响。方法采用ABC免疫组化法观察肝纤维化动物模型制模后不同时间点的CTGF表达变化;构建CTGF 2个不同基因位点的shRNA重组体质粒并转染HSC,利用实时PCR检测CTGF表达,通过MTT及细胞粘附实验检测细胞功能变化。结果随着肝纤维化进展,CTGF阳性表达呈增强趋势(P<0.05);成功构建表达靶向CTGF的shRNA重组真核表达质粒;MTT实验结果显示干扰质粒组细胞增殖水平[吸光度值为(0.81±0.06)]弱于对照组(1.39±0.07)及阴性质粒组(1.28±0.06),均P<0.05;细胞粘附实验表明干扰质粒组细胞粘附率为(38.1±6.2)%,明显低于对照组的(63.1±3.6)%和阴性质粒组的(62.2±5.0)%,均P<0.05。结论 CTGF参与了肝纤维化的过程,是促进肝纤维化发展的最重要细胞因子之一,且表达水平随肝纤维化进展逐渐升高。CTGF shRNA重组体能明显抑制HSC的增殖和粘附能力。
- 余琴王乾华毕昊余谨付蓉杨茹
- 关键词：结缔组织生长因子肝纤维化肝星状细胞细胞粘附
- Neogenin对人滋养细胞RGMa、DAPK、Neogenin mRNA表达及细胞凋亡的影响被引量：2
- 2010年
- 目的:观察不同浓度Neogenin对人滋养细胞RGMa、DAPK、Neogenin表达的影响,以阐明Neogenin在滋养细胞凋亡过程中的作用。方法:先用含0,0.5,1,5,10及50ng/ml的Neogenin无血清培养基预处理TEV-1细胞24h,用噻唑蓝(MTT)比色、流式细胞术(FCM)检测细胞增殖指数及凋亡率;用实时定量PCR检测TEV-1细胞RGMa、DAPK、Neogenin mRNA的变化。结果:MTT、FCM检测表明Neogenin能诱导TEV-1凋亡,且呈一定的浓度依赖性,Neogenin对TEV-1细胞增殖无明显影响。TEV-1细胞RGMa mRNA的表达水平依次为空白对照组(0ng/ml Neogenin)的0.62±0.04,0.90±0.04,0.97±0.04,0.90±0.03及0.75±0.03;DAPK mRNA的表达水平依次为空白对照组的0.68±0.02,0.35±0.01,0.74±0.01,0.51±0.01及0.33±0.01;Neogenin mRNA的表达水平依次为空白对照组的1.45±0.03,1.80±0.05,1.22±0.08,1.47±0.00及1.14±0.00。即随着Neogenin浓度增加,TEV-1细胞内DAPK mRNA表达下调,Neogenin mRNA表达上升,RGMa mRNA的表达水平基本不变。结论:Neogenin可促进TEV-1细胞凋亡,这一过程可能是经DAPK途径调控的。
- 钟少平赵茵胡彬谢涵王乾华王莹邹丽
- 关键词：滋养细胞NEOGENIN死亡相关蛋白激酶
- 早产的预防措施被引量：4
- 2011年
- 早产至今仍是世界产科领域的难题。有文献报道,早产的发生率逐年升高,早产儿具有较高的发病率、死亡率和后遗症,约75%～90%的新生儿死亡与早产有关。因此,预防早产便成为首要而关键的问题,对保障母婴生命健康具有重要意义。本文就目前早产预防的研究进展提出三级预防措施。
- 邹丽王乾华
- 关键词：早产药物宫颈环扎术
- 紫杉醇在卵巢癌合并心脏病治疗中的应用
- 2017年
- 目的：探讨紫杉醇在卵巢癌合井心脏病治疗中的应用。方法：选取我院2014年6月至2016年6月收治的卵巢癌合井心脏病患者16例作为研究对象，根据治疗方法的不同分为对照组与研究组。对照组卵巢癌合并心脏病患者使用环磷酰胺药物进行治疗，研究组卵巢癌合并心脏病患者使用紫杉醇药物进行治疗，对比两组卵巢癌合并心脏病患者治疗效果。结果：研究组患者使用紫杉醇进行治疗，治疗有效率显著高于对照组患者，两组差异有统计学意义（P〈0．05）。结论：卵巢癌合并心脏病患者在临床治疗中，使用紫杉醇进行治疗，效果较使用环磷酰胺药物更寿理想，安全性高，且药物本身的不良反应患者可以耐受，临床中应当广泛推广及应用。
- 冯春翠唐慧娟朱剑文王乾华刘岚
- 关键词：紫杉醇卵巢癌心脏病
- Caveolin-1在围植入期小鼠子宫内膜组织中的动态变化
- 2012年
- 目的检测caveolin-1在胚胎植入过程中小鼠子宫内膜组织中的表达,探讨其在胚胎植入过程中的作用。方法选择成年雌性昆明小白鼠42只,随机均分为7组(处于动情期的未孕组、妊娠3.5天组、妊娠4.5天组、妊娠5.5天组、妊娠6.5天组、妊娠7.5天组、妊娠9天组),采用免疫组织化学和RT-PCR方法检测子宫内膜组织中caveolin-1蛋白及mRNA水平在围植入期的变化。结果 (1)caveolin-1在胚胎植入前期(0d、3.5d)小鼠子宫内膜组织中的表达高于胚胎植入期(4.5d、5.5d、6.5d),差异有显著性(P<0.05)。(2)caveolin-1在胚胎植入后期(7.5d、9d)小鼠子宫内膜组织中的表达高于胚胎植入期(4.5d、5.5d、6.5d),差异有显著性(P<0.05)。(3)caveolin-1在胚胎植入后期小鼠子宫内膜组织中的表达略高于胚胎植入前期,但差异无显著性(P>0.05)。结论 Caveolin-1在胚胎植入前期和后期均高表达,植入期低表达。这种变化提示caveolin-1是影响胚胎植入的重要因素之一。
- 刘俊王乾华周丽汪琳
- 关键词：CAVEOLIN-1胚胎植入子宫
