王勇涛
- 作品数:3 被引量:0H指数:0
- 供职机构:吉林大学白求恩医学部临床医学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金吉林省产业技术研究与开发项目吉林省自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 下调Smad7表达对PC12细胞OGD损伤的影响
- 2014年
- 目的探讨抑制Smad7基因表达对PC12细胞氧糖剥夺(OGD)损伤的影响及其机制。方法利用PC12细胞OGD模型体外模拟神经细胞缺血性损伤,通过RNA干扰技术,沉默Smad7基因表达,实时定量PCR、Western blot检测Smad7基因的表达情况,MTT检测下调Smad7基因表达对细胞OGD损伤存活率的影响,Western blot检测Activin A(ActA)蛋白的表达情况。结果体外合成的siRNA转染可下调Smad7基因转录及蛋白水平的表达;经OGD16h,阳性转染组细胞存活率较阴性组显著增加,阳性转染组细胞ActA蛋白表达较阴性组显著升高。结论Smad7可负向调控缺血损伤诱导的ActA/Smads通路激活过程,抑制其表达能够发挥神经保护作用。
- 王一鸣程也付丹阳王勇涛王姣琦梅春丽莽靖徐忠信
- 关键词:SMAD7氧糖剥夺
- 磷酸化Smad3在神经元样细胞氧糖剥夺中的表达变化
- 2015年
- 目的探讨磷酸化Smad3蛋白在神经元样PC12细胞氧糖剥夺中的表达变化。方法利用鼠神经生长因子(NGF)诱导大鼠嗜铬细胞瘤细胞(PC12)向神经元样细胞转化,应用无糖DMEM培养液联合连二亚硫酸钠(Na2S2O4)构建氧糖剥夺模型(oxygen-glucose deprivation,OGD),体外模拟神经元缺血性损伤。MTT检测神经元样细胞OGD 0,3,6和12h存活率,Western blot检测OGD前后磷酸化Smad3蛋白表达。结果成功建立神经元样PC12细胞的OGD模型;OGD 3h后细胞存活率显著下降,至OGD 12h降至最低54.7%;细胞内磷酸化Smad3表达在OGD 3、6h与OGD 0h组相比略升高,至OGD 12h时明显降低。结论磷酸化Smad3参与在神经元样细胞OGD早期ActA/Smads通路的活化。
- 徐仲航王一鸣王勇涛王姣琦何金婷莽靖邵延坤徐忠信
- 关键词:OGD
- siRNA靶向沉默Smad7对PC12细胞氧糖剥夺敏感性的影响
- 2014年
- 目的探讨siRNA靶向沉默Smad7基因对PC12细胞氧糖剥夺(OGD)损伤的影响及其相关机制。方法体外建立PC12细胞OGD模型,利用RNA干扰技术,沉默Smad7基因表达,实时RT-PCR及Western印迹检测Smad7基因的表达,Hoechst33342染色检测细胞凋亡情况,实时RT-PCR检测Smad3基因mRNA的表达变化。结果 siRNA转染下调Smad7基因mRNA及蛋白的表达,靶向沉默Smad7联合OGD 16 h组细胞凋亡较OGD 16 h组明显减少;Smad7低表达的PC12细胞内Smad3 mRNA的表达明显增加。结论 Smad7基因沉默降低PC12细胞对OGD损伤的敏感性,提高Smad3基因在转录水平上的表达。
- 王一鸣程也付丹阳王勇涛王姣琦梅春丽莽靖徐忠信
- 关键词:SMAD3SMAD7SIRNA氧糖剥夺