王国华
- 作品数：17 被引量：106H指数：7
- 供职机构：第四军医大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 胎盘提取物促淋巴细胞增殖活性及稳定性实验初探被引量：15
- 2001年
- 目的从人胎盘组织制备促进免疫细胞增殖提取物并寻求保存提取物的适宜条件。方法通过热处理胎盘匀浆液制备提取物 ,并用溴化四唑蓝染料结合法测定体外促小鼠脾淋巴细胞的增殖活性 ,同时对提取物进行放射性同位素60 Co照射。结果经Lowry′s法测定为每 1g胎盘组织含 2～ 3mg蛋白质 ,其促细胞增殖率 >80 % ,经同位素处理后低温保存数月活性不受影响。结论此法制备的提取物不仅活性高 ,且方法简便、重复性好 ,该提取物作为一种稳定、可靠、明显的促淋巴细胞增殖反应具有上规模开发、生产、应用于临床的价值。
- 王国华程往太马红燕陈志阳药立波
- 关键词：淋巴细胞增殖反应
- 就“糜蛋白酶的制备及活性测定”相关问题的探讨被引量：2
- 2003年
- 重新定义糜蛋白酶的活性单位以及改进书写格式.①将酪氨酸进行一系列的倍比稀释和Folin一酚试剂呈色反应来制定标准曲线;②采用酸提取和硫酸铵分段盐析从猪胰腺组织中分离、纯化糜蛋白酶;③活性测定是通过酶作用于底物依生成产物量来间接了解酶活性.将在pH 7.4、温度25 ℃时,保温10 min能使底物酪蛋白水解出5 μg酪氨酸的糜蛋白酶量规定为一个活性单位.经改进后可读性、操作性强,易于掌握;书写格式明确、层次分明,一目了然.
- 王国华陈志阳杨志福刘新平药立波
- 关键词：糜蛋白酶酶活性酪氨酸
- 特异性转移因子对人AFP促进小鼠H22腹水肝癌细胞RNA合成的拮抗效应被引量：2
- 1993年
- 用亲和层析法从3～5月龄引产胎儿肌肉组织中提纯AFP.用纯化AFP免疫小鼠,取其脾脏按匀浆透析法制备AFP特异转移因子(SP-TF),取正常未免疫鼠脾脏制备非特异转移因子(N—TF),从预接种小鼠腹水中分离Hz2腹水肝癌细胞(H22细胞),体外用[3H]—UR参入方法,从转录水平观察SP—TF对AFP促进小鼠H22细胞生长的拮抗效应。结果表明:SP—TF对AFP促进H22细胞RNA合成具有非常显著的拮抗效应。此效应具有抗原特异性和供体依赖性。
- 许卫民李树凯王易伦赵忠良王国华苏成芝
- 核心蛋白聚糖的分离、纯化及活性鉴定被引量：12
- 1999年
- 为研究、开发治疗肺、肝等纤维化疾病的一种天然白蛋白多糖——核心蛋白聚糖（Ｄｅｃｏｒｉｎ），综合归纳了国外研制Ｄｅｃｏｒｉｎ的技术、方法，供从事Ｄｅｃｏｒｉｎ研究及有兴趣开发Ｄｅｃｏｒｉｎ新药的科技人员或制药公司参考。
- 王国华柴玉波何鹏陈南春陈志阳刘新平
- 关键词：核心蛋白聚糖博来霉素胶原蛋白
- 小鼠颌下腺神经生长因子的制备和活性鉴定被引量：1
- 1998年
- 目的：制备具有生物活性的NGF．方法：以小鼠颌下腺为原料，采用FPLC方法分离神经生长因子，SDS-PAGE电泳检测NGF的分子质量和纯度，采用脊髓和背根神经节培养方法检测NGF的生物活性．结果：经FPLC柱纯化的NGF在SDS—PAGE电泳显示为一条分子质量14ku的区带，NGF得率可达600μg／g，比活性达2×105／mg，具有明显的促进细胞增殖的活性．结论：本方法可用于NGF的制备．
- 王国华陈南春惠宏襄聂晓燕白玉杰刘新平药立波杨浩
- 关键词：颌下腺神经生长因子
- 鼠肌核心蛋白聚糖的研制被引量：3
- 2000年
- 目的 :从动物组织中提取纯化核心蛋白聚糖 (Decorin) ,检测其活性。方法 :以大鼠肌肉为原料 ,采用匀浆、透析、层析等步骤分离、纯化Decorin ,经SDS PAGE检测其分子量和纯度 ,并经细胞株A5 49检测生物学活性结果 :Decorin在SDS PAGE显示分子量约为 37～ 38kD两条带 ,得率约为 2mg/g组织 ,对A5 49具有明显的抑制生长活性 ,抑制率 >5 0 %。结论 :此法获得的Decorin将有可能作为天然药物用于治疗肿瘤。
- 陈志阳王国华柴玉波刘新平药立波
- 关键词：核心蛋白聚糖转化生长因子-Β
- 一种简便、快速检测淋巴细胞增殖的方法被引量：25
- 2000年
- 目的 :建立转移因子 (TF)等免疫增强制剂体外生物活性简便、快速的检测方法。方法 :利用溴化四唑蓝法测定TF等促进小鼠脾淋巴细胞的增殖活性。结果 :TF、胸腺因子、胎盘因子三者均能明显地促进淋巴细胞增殖 ,平均增殖率为 6 3 .5 1%、77.6 5 %、86 .6 1%。结论 :此法稳定可靠 ,易于掌握、普及。
- 陈志阳王国华杨敏刘新平药立波
- 关键词：淋巴细胞增殖胸腺因子
- 用MTT－LAI方法鉴定人胃癌特异性转移因子的免疫活性被引量：18
- 1994年
- 本文以四唑翁盐－白细胞粘附抑制实验（ＭＴＴ－ＬＡＩ）代替同位素－ＬＡＩ实验，用于胃癌特异性转移因子（ｓｐ－ＴＦ＿１）抗原持异活性的检测，克服了同位素法的不便。在摸索到的最佳ｓｐ－ＴＦ＿１浓度（１０￣（－４）ｕ／ｍｌ）和胃癌抗原浓度（１０￣（－３）ｕｇ／ｍｌ）条件下的实验结果表明：在胃癌抗原（ｓｃＡｇ）存在下，ｓｐ－ＴＦ＿１能明显抑制白细胞的粘附；而非特异性转移因子（ＴＦｎ）则无此作用。且ｓｐ－ＴＦ＿１与乙脑病毒（ＥＢｖ）或乙肝抗原（ＨＢｓＡｇ）共同温育也不表现出粘附抑制活性。实验证明：ＭＴＴ－ＬＡＩ实验是体外检测特异性转移因子细胞免疫活性的快速、简便的方法。此外．本文用该法观察了不同温度下ｓｐ－ＴＦ＿１活性的稳定性。
- 王方王国华苏成芝张晓光
- 关键词：胃肿瘤
- 胃癌高表达基因erk的PCR扩增、克隆和鉴定被引量：4
- 1997年
- 对在胃癌高表达的EPH家族基因erk胞外的配体结合区基因扩增及克隆．方法：从胃癌患者手术切除标本中提取RNA，反转录为cDNA，以计算机辅助分析设计并合成引物进行RT－PCR，并将扩增片段克隆入pUC19质粒，用酶切及PCR方法筛选鉴定阳性克隆．结果：RT－PCR扩增片段与设计相符，且特异性好，无非特异产物出现，表明所设计引物符合要求．酶切及巢式PCR、PCR－RFLP方法证明克隆片段正确插入pUC19的HindIII和BamHI位点，并将重组克隆命名为pGE42．结论；克隆的完成为进一步研究该基因在胃癌的发生中的作用，寻找其胞外配体及进行表达产物的细胞定位等工作打下基础．
- 张晓光王方阎小君苏成芝王国华杨敏
- 关键词：胃癌基因克隆多聚酶链反应
- 简化提取核心蛋白聚糖的方法及扩大活性检测范围被引量：2
- 2001年
- 目的简化分离、纯化核心蛋白聚糖的程序 ,了解其对瘤细胞生长的抑制作用。方法经匀浆、溶解沉淀、透析、研磨等步骤制备核心蛋白聚糖 ,MTT染料结合法检测A5 49、BT32 5等四种癌细胞体外生物学活性。结果简化法制备的核心蛋白聚糖得率为 3mg/g大鼠肌肉 ,SDS PAGE显示在相对分子质量 36～ 38kD间有两条带 ,除明显抑制A5 49生长外 ,对Hela、胃 790 1及BT32 5三者同样具有抑制生长活性 ,抑制率依次为 6 9.19%、48.19%、5 4.47%、6 7.80 %。结论此法成本低、纯度好。
- 王国华陈志阳王晓锁蒲勤药立波
- 关键词：核心蛋白聚糖癌细胞株活性检测
