王翠艳 作品数:5 被引量:9 H指数:2 供职机构: 内蒙古医学院附属医院 更多>> 发文基金: 内蒙古自治区自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
腺相关病毒介导的血管内皮生长因子基因与骨髓间充质干细胞联合治疗大鼠肢体缺血的研究 被引量:1 2010年 目的 探讨腺相关病毒(rAAV)介导的人血管内皮生长因子(VEGF)165基因转染大鼠骨髓间充质干细胞(MSC)移植对血管新生的影响.比较单纯干细胞移植与联合基因治疗的疗效.方法 全骨髓培养法提取培养MSC;rAAV-VEGF165转染MSC中,酶联免疫吸附试验(ELISA)及反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测VEGF的表达;以近交系大鼠建立骨骼肌缺血模型,40只大鼠随机分为4组,每组10只.对照组注射磷酸盐缓冲液(PBS);干细胞组移植等量MSC,转染术后7 d组和转染术后10 d组分别于结扎7 d和10 d后的缺血区移植转染VEGF基因的MSC,移植6周后做Ⅷ因子染色检测血管新生情况.结果成功培养出MSC,免疫组化CD44阳性表达,CD34阴性表达;流式细胞术CD90阳性表达.在转染rAAV-VEGF165后转染组1、3、5、7、9 d上清液中VEGF165分泌水平分别为(131.98±6.00)、(263.96±4.58)、(540.85±5.97)、(208.98±5.06)、(174.45±5.00)ng/L,明显高于未转染组的(68.72±1.99)、(76.47±4.98)、(89.86±1.99)、(84.93±8.97)、(68.71±5.98)ng/L[t值分别为14.14、51.16、79.28、27.56、26.07,(均P<0.05)],且5 d时达到高峰,此后表达开始下降.琼脂糖凝胶电泳可见在579 bp处见到高亮度条带,证明rAAV-VEGF165成功转染进MSC细胞中.转染后的生长曲线及细胞形态较未转染组无明显变化.Ⅷ因子染色示转染术后10 d组动物缺血区毛细血管密度[(9.35±2.72)条/视野]明显高于对照组[(1.05±0.50)条/视野]和干细胞组[(3.10±1.43)条/视野](均P<0.01),较转染术后7 d组[(6.95±1.69)条/视野]亦有一定程度的升高(P<0.05).结论 MSC有利于VEGF基因的稳定表达,可作为VEGF基因的良好细胞载体,且联合应用效果高于单独移植MSC,移植最佳时间为术后10 d. 魏芳晶 王翠艳 阴淑莹 徐敏关键词:血管内皮生长因子类 骨髓祖代细胞 依赖病毒 血清基质金属蛋白酶与不同类型心绞痛病人近期预后的关系 2009年 目的:探讨未接受介入治疗的不同类型心绞痛病人血清基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、基质金属蛋白酶组织抑制因子-1(TIMP-1)水平的变化与近期预后的关系。方法:46例不稳定型心绞痛病人为UAP组,36例稳定型心绞痛病人为SAP组,30名体检健康者为对照组。比较各组血清MMP-9和TIMP-1水平变化;随访3mo主要心血管事件。结果:UAP组入院第1d MMP-9水平高于SAP组(P>0.05),前者持续在第3d(272.23±20.09 vs 165.57±22.34)ng/mL、第7d继续升高(337.35±53.12 vs 125.22±27.25)ng/mL,后者则持续下降(P<0.05);TIMP-1表现同样的变化趋势。3mo随访期间发生心脏事件33例,无心脏事件49例。有心脏事件入院第1、3、7d血清MMP-9水平高于无心脏事件(P<0.05)。结论:UAP病人MMP-9、TIMP-1血清水平动态升高,与近期心血管事件有关。MMP-9、TIMP-1可作为不同类型心绞痛病人危险分层的指标之一。 魏芳晶 阴淑莹 张晓云 王翠艳 徐敏关键词:心绞痛 基质金属蛋白酶-9 基质金属蛋白酶组织抑制因子-1 不稳定型心绞痛临床疗效观察 被引量:5 2011年 不稳定型心绞痛是由于冠脉内不稳定的粥样斑块继发病理改变使局部心肌血流量明显下降所致的心绞痛,有进展致心肌梗死或心源性猝死的风险。本研究观察步长丹红注射液治疗冠心病不稳定型心绞痛病人的临床疗效及副作用,现报道如下。 阴淑莹 薛明明 王翠艳关键词:冠心病 不稳定型心绞痛 丹红注射液 急性心肌梗死介入治疗后细胞因子变化与心肌灌注的关系 被引量:1 2008年 目的探讨急性心肌梗死(AMI)患者急诊经皮冠状动脉介入治疗(PCI)后白细胞介素8(IL-8)、可溶性细胞间黏附分子1(slCAM-1)变化与心肌灌注的关系。方法急性ST段抬高型心肌梗死患者98例,接受急诊PCI治疗,于术前5 min,术后6 h、12 h、24 h分别抽取动脉血标本,采用酶联免疫双抗体夹心法(ELISA)检测ICAM-1及IL-8。PCI术后1个月做双核素心肌灌注显像(DISA SPECT)检查,根据心肌灌注程度分为心肌灌注不良组、心肌灌注良好组。结果IL-8在PCI术前5 min两组均已呈现升高趋势(P〉0.05),术后6 h心肌灌注不良组进一步升高达峰值(P〈0.01),术后12 h、24 h心肌灌注不良组[分别为(94.3±169.9)和(44.1±27.8)ng/L]仍高于心肌灌注良好组[分别为(27.4±26.8)和(21.5±12.2)ng/L,P〈0.01和P〈0.05]。两组slCAM-1在PCI术前5 min比较,差异无统计学意义(P〉0.05);术后6 h、12 h、24 h均持续高于心肌灌注良好组(P〈0.05)。结论急性心肌梗死PCI术后心肌灌注不良患者血浆IL-8、slCAM-1水平明显高于心肌灌注良好者,提示细胞因子IL-8、slCAM-1参与血运重建后心肌灌注障碍的发生、发展。 魏芳晶 阴淑莹 王翠艳 张燕 张晓云 乔晓绢 石秀换 李云霞关键词:心肌梗死 心肌再灌注 重组腺相关病毒介导人血管内皮生长因子165基因在大鼠骨髓间充质干细胞中的表达 被引量:2 2009年 目的探讨以腺相关病毒(rAAV)为血管内皮细胞生长因子165基因(VEGIF165)载体,在体外转染大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs),并研究其相关特性。方法 (1)全骨髓培养法提取培养MSCs,利用免疫组化法检测MSCs表面标志CD34、CD44;流式细胞分析法检测CD90。(2)rAAV-VEGF165转染MSCs,采用ELISA及PCR检测VEGF的表达,比较转染前后细胞的变化情况,观察VEGF165基因转染对MSCs的影响。结果 (1)成功培养出MSCs,CD44阳性表达,CD34阴性表达,CD90阳性表达。(2)在转染rAAV-VEGF165后转染组上清中VFGF165分泌水平明显高于未转染组(p<0.05),5 d时达到高峰,此后表达开始下降。琼脂糖凝胶电泳可见高亮度条带。表明rAAv-VEGF165成功转染进MSCs细胞中,绘制生长曲线,显示rAAV-VEGF165基因转染后对MSC生长无影响。结论rAAV-VEGF表达载体可有效感染MSCs,并在体外高效表达,为MSCs联合基因治疗提供了实验依据。 魏芳晶 王翠艳 阴淑莹 张晓云 乔小娟 石秀换 李云霞关键词:血管内皮生长因子类 基因 干细胞 血管